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关键词： 胚胎干细胞   拟胚体   造血分化  

摘要： 目的优化利用单细胞聚团拟胚体(Spin-EB)培养诱导人多能干细胞造血分化的方式。方法采用Aggre Well TM800及V-96孔板两种培养板形成Spin-EB,在骨形成蛋白-4(BMP-4)、血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维生长因子(b FGF)组合培养基中诱导造血分化,通过流式细胞术检测不同分化条件下CD34+细胞的比例;选取CD34+细胞比例高的拟胚体(EB)形成方式,并通过造血集落形成实验及红细胞分化培养实验,验证EB来源的CD34+细胞的造血集落形成和红系分化能力。结果流式分析结果显示,在Aggre Well TM800培养板中培养所得的EB,其CD34+造血干祖细胞比例为22.6%,V-96孔板按照形成EB的细胞数目,CD34+造血干祖细胞比例分别为:3000个细胞/孔为10.8%、6000个细胞/孔为1.28%、9000个细胞/孔为1.23%。胚胎干细胞(ESC)来源的CD34+细胞形成的集落与脐带血CD34+造血干祖细胞形成的集落形态相似,并且在红系分化培养体系中分化为CD71+CD235a+的红细胞。结论 V-96孔板组EB形成和CD34+分化效率与用于EB形成的细胞数有相关性,3000个细胞/孔条件相对最优。采用Aggre WellTM800培养板形成EB及EB的造血分化效率均高于各组V-96孔板分化效率。

关键词： 睾丸   热损伤   胚胎干细胞   原位注射  

摘要： 目的:探讨大鼠隐睾模型的建立和胚胎干细胞睾丸内原位注射对热损伤所致的睾丸生精功能损害的疗效。方法:Wistar大鼠20只,取右睾丸手术建立隐睾模型,于7、10、14、21及28 d后行隐睾下降固定术,下降后选取不同的时间点行附睾穿刺液及睾丸病理检查;另Wistar大鼠20只,随机分为A组(n=10)和B组(n=10)。A组左睾丸为干细胞组(ES),右睾丸为自身空白对照(NPBS);B组左睾丸为组间对照组(JPBS)。各组在隐睾建模2周后行隐睾下降固定术并同时行睾丸内原位注射处理,2周后比较生精小管的直径(d)、精小管百分率(r)和生精小管的Johnsen评分(z)。结果:隐睾建模后10、14、21、30 d及隐睾复降后2月的附睾穿刺液中均未能发现精子,睾丸复降的中后期,部分生精小管的生精细胞层数仍然存在不同程度的恢复,含有生精细胞的d继续增加(P<0.05);干细胞注射后各组附睾穿刺液内均未见精子,ES组与NPBS组生精小管z差异有统计学意义(P<0.05)。结论:短期的睾丸热损伤是可逆的,超过10 d则严重影响到睾丸的生精功能,原位注射胚胎干细胞在本实验中尚不能证实对睾丸损伤有修复作用,但此研究方向仍具有极高的可行性。

关键词： 核糖体失活蛋白   植物   抗真菌活性   基因工程   立枯丝核菌  

摘要： 核糖体失活蛋白(RIPs)是一类主要出现在植物中并具有r RNA N-糖苷酶活性的蛋白质,大体上分为Ⅰ型和Ⅱ型2类。介绍了RIPs在抗真菌活性、毒性和免疫原性方面的研究进展,并对其在抗立枯丝核菌植物基因工程方面的应用进行了综述。

关键词： 风湿性疾病   RNA   自身免疫病   后基因时代   完成标志   人类基因组计划   表观遗传   基因测序   疾病诊断   细胞分化  

摘要： 风湿性疾病是侵犯关节、骨骼、肌肉、血管及结缔组织为主的一组疾病,其中多数为自身免疫病。目前该类疾病发生、发展的分子机制尚不明确,多数认为是由机体免疫紊乱导致,但又是什么诱导了这种紊乱的产生仍然未知。随着2006年人类基因组计划中基因测序的完成,人类基因图谱绘制的完成标志着人类已经进入后基因时代。近年研究表明,表观遗传机制在风湿性疾病的发生发展中起着重要作用。

关键词： 基因工程   快速设计   分液罐  

摘要： 以分液罐为研究对象提出了基于基因工程的定制产品的快速设计方法。研究了产品基因工程的基本理论、方法以及包括基因提取、基因扩增等在内的基于基因工程的产品快速设计的关键技术,并将其应用于定制产品的快速设计中,并以分液罐为开发对象进行了实例验证。结果表明,基于基因工程的产品快速设计,可以实现产品的系列化、规范化和自动化设计,有助于提高企业设计效率,能快速响应市场个性化定制需求。

关键词： 贝尔纳   科技政策研究   晚期资本主义   七分之一   布什政府   国家统治   生物伦理学   科研项目   当代科学   瓦尔  

摘要： 20世纪以来,科学与政治之间的关系成为研究者关注的一个热点问题。从贝尔纳提出政治对科学的计划与调控,到凡尼瓦尔·布什要求政府大力资助科学研究并保障其独立性,从贝克的风险社会中科学对政治话语权的侵蚀,到哈贝马斯认为科学技术已成为晚期资本主义国家统治的“正当性来源”,在科学社会学、科学哲学、科技政策研究,以至社会学及哲学的各个领域,科学与政治关系的话题都被反复提及和深入讨论。

关键词： C57BL/6胚胎干细胞   基因打靶   BALB/c囊胚   嵌合鼠表观嵌合度   种系遗传  

摘要： 为了提高通过C57BL/6（B6）胚胎干细胞（embryonic stem cells,ES cells）获得基因打靶小鼠的效率,该研究利用经过体外和体内多能性验证的C57BL/6 ES细胞系B6-1-6,开展了37组平行的制作基因打靶小鼠的实验。首先,对不同的囊胚获取的方式进行对比;其次,统计37组实验中的嵌合鼠表观嵌合度与种系遗传效率,并对二者相关性进行分析。对于BALB/c小鼠,自然排卵相较于激素超排能够得到更多囊胚（2.91个囊胚/只vs 0.82个囊胚/只）;对于最佳注射个数的探索,利用C57BL/6 ES细胞系B6-1-6进行基因修饰并注射囊胚,注射65-97个胚胎获得阳性打靶动物的可能性为95%;嵌合鼠毛色嵌合率与种系遗传率有一定相关性（r=0.316,P=0.057）,而嵌合鼠眼睛颜色与种系遗传效率显著正相关（r=0.328,P〈0.05）。该研究探索了用于C57BL/6 ES细胞注射的BALB/c囊胚获取方式的优化和最佳的注射数量,以及嵌合鼠表观嵌合度与种系遗传效率相关性等方面,以期为相关的研究提供有益的参考。

关键词： 三氯乙烯   人胚胎干细胞   心肌分化   基因表达   钙离子通道  

摘要： 目的:探讨三氯乙烯(TCE)对人胚胎干细胞心肌发育分化的影响。方法:以人胚胎干细胞H9体外心肌定向分化为模型,分化培养液中添加不同剂量的TCE(分别为处理组100 ppb组,1 ppm组,10 ppm组)以及DMSO(对照组)。对诱导后形成的拟胚体以及不同发育阶段的细胞进行检测,通过MTT法测定细胞的生存能力,统计有自主节律跳动的拟胚体的数量;流式细胞仪计数分析细胞分化比例;荧光定量PCR检测心肌特异性基因表达;并应用基因芯片方法初步筛选检测三氯乙烯对心肌细胞钙离子通道相关的基因表达的影响。结果:TCE的三个浓度处理组均未显示细胞毒性,但高浓度组明显抑制向心肌细胞分化,能产生自主节律搏动的拟胚体比例显著降低,同时心肌特异性标记物c Tn T表达随剂量的增加而显著降低。在具有自主节律性的拟胚体中,钙离子通路的相关基因表达受到影响。结论:推测TCE通过降低成熟心肌的比例,以及影响心肌细胞中钙离子通道相关基因表达来共同导致心脏发育异常。

关键词： 世界粮食问题   世界粮食安全   联合国粮农组织   草铵膦   生物基   大豆种植   粮食需求   种业市场   种植面积  

摘要： 随着人口的不断增加,世界需要更多的粮食。生物基燃料也需要消耗大量粮食,如玉米、大豆等。现在世界上还有10亿人处于饥饿状态,联合国粮农组织估计,从2012年到2050年全球粮食需求增加70%。如何解决世界粮食问题?权威杂志《Nature》多次发文讨论世界粮食安全问题,专家们认为利用生物技术提高作物产量和抗逆能力才是解决饥饿问题的根本。1全球转基因作物的发展转基因作物(GMC)是广义的。

关键词： 转基因   生态环境   食品安全  

摘要： 近年来,转基因农作物已经被大面积种植,因其高产、稳产等特点解决了粮食短缺、环境破坏等世界性难题;但其负面报道也越来越多。在国内,关于转基因作物的利弊已经掀起了激烈的争论。基于此,在总结转基因作物优良农业性状和巨大商业价值的同时,分析转基因作物可能给农业生态环境造成的影响以及食品安全问题。