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关键词： 抗病基因   基因工程   原理   转化方法   前景  

摘要： 随着植物抗病基因的分离,植物抗病机制的分子生物学和植物抗病基因工程取得了重大研究进展.该文就植物抗病基因工程的原理、目的基因、转化方法的进行综述,并对植物抗病基因工程的前景做了展望.

关键词： 黄芪水提取物   血管平滑肌细胞   胚胎干细胞   分化  

摘要： 目的:研究黄芪水提取物(Astragalus radix extract,ARE)对小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)来源的血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)分化的影响。方法:将ESCs直接接种到IV型胶原包被的培养皿中建立VSMC分化模型,向培养液中添加不同剂量ARE(对照组不添加ARE,ARE低剂量组60 g/m L ARE,ARE高剂量组(120 g/m L ARE),将3组细胞连续培养14天。分别应用免疫荧光染色、实时定量PCR及Western Blot技术检测各组VSMC分化标志物表达情况。应用胆碱能受体激动剂卡巴可刺激各组细胞检测收缩反应。应用实时定量PCR技术检测调控VSMC分化的重要因子的变化。结果:与对照组相比,ARE处理后VSMC分化标志物表达显著增加,且呈剂量依赖性。ARE处理可提高VSMCs的收缩能力。此外,ARE处理后,转化生长因子(Transforming growth factor)的表达显著增加。结论:黄芪水提取物可能通过激活TGF-促进ESCs向VS MCs分化。

关键词： 胰岛   人胚胎干细胞   肝细胞核因子1β   miR-375  

摘要： 目的探讨miR-375对人胚胎干细胞（hESC）定向分化为胰岛素分泌细胞（IPCs）的调控作用及其潜在机制。方法体外诱导hESC定向分化为IPCs，分析miR-375与其预测靶基因肝细胞核因子1β（HNF-1β）之间表达水平的动态变化关系；以miR-375过表达的慢病毒载体感染分化第二阶段细胞，实验分为空白对照组、阴性对照（GFP）组及miR-375过表达组；应用实时定量PCR和（或）Westernblotting法检测各组分化细胞中miR-375、HNF-1β、胰岛细胞分化或功能相关的关键基因的表达。两组间比较用t检验，多组间比较用单因素方差分析和Q检验。结果hESC分化五个阶段中miR-375表达水平呈先高后低的变化趋势，相对表达量分别为100％、（472．25±33．53）％、（768．00±25．65）％、（54．25±5．74）％、（30．75±5．70）％（F=1137．57，P〈O．001）。HNF．1B表达水平在分化第三阶段开始明显上升，在分化第四阶段达到高峰【分别为（279．50±21．30）％、（645．00±64．55）％，F=224．86，P〈0．0011，变化趋势与1／miR-375的变化趋势相似。慢病毒感染后，miR-375过表达组的HNF-1β mRNA表达水平与GFP组、空白对照组无显著差异（F=1．467，P〉0．05），而miR．375过表达组的HNF-1β蛋白表达水平则下降至GFP组的（38．75±9．22）％（F=60．69，P〈0．001）。与GFP组相比，miR-375过表达组分化第四阶段细胞的胰十二指肠同源盒因子1（Pdx-1）表达水平显著升高，分化第五阶段细胞（IPCs）的Nkx6．1、配对盒因子4（Pax-4）及胰岛素的表达水平则显著降低（F=105．19～484．05，均P〈0．001）。结论miR-375对hESC向IPCs定向分化具有重要的调控作用，该作用可能是通过影响转录因子HNF-1β表达而实现的。

关键词： 非结核分枝杆菌   DNA测序   菌种   鉴定   感染性疾病   麻风分枝杆菌   影像学表现   复合群  

摘要： 分枝杆菌包括MTB复合群、麻风分枝杆菌和非结核分枝杆菌。截至2014年9月已经通过文献报道证实的分枝杆菌及其亚群有169种（http：／／***／***），而各种分枝杆菌感染性疾病的症状和影像学表现十分相似，但治疗却不尽相同。快速、准确鉴定分枝杆菌菌种是诊断和治疗各种分枝杆菌感染性疾病的关键。

关键词： 基因污染   危险责任   不可量物侵害   容忍义务   纯粹经济损失  

摘要： 转基因作物对其他作物造成的基因污染,分为处于实验阶段的转基因作物造成的基因污染和已经许可上市的转基因作物造成的基因污染。实验阶段,转基因作物尚处于风险交流和风险评估阶段,具有高度危险性;已经许可上市的转基因作物虽不排除风险,但危险性较低。于实验阶段发生的基因污染,应适用侵权责任法中的高度危险责任。基因污染一般发生于相邻土地间,侵害了相邻不动产权利人的财产权,已经许可上市的转基因作物造成的基因污染应适用物权法第90条之不可量物侵害。基因污染对土地、作物造成有形损害后发生的损失,不属于纯粹经济损失。基因污染导致非转基因作物无法以非转基因产品标识投入市场或者只能以转基因产品标识投入市场,且并非当地惯行做法和不可防范时,受害者没有容忍义务,可以行使妨害防止请求权和损害赔偿请求权。

关键词： 生物农业   态势分析   农业发展   国民经济发展   转基因作物   生物农药   生物肥料   生物饲料  

摘要： 生物农业的内涵广泛，与我国国民经济发展和人口健康密切相关。文章以生物农药、生物肥料、生物饲料、动物疫苗和转基因作物为主要内容，对我国生物农业的政策、发展现状与态势进行了分析，并与国际发展态势相比较，提出了我国产业发展面临的问题与对策。

关键词： 胚胎干细胞   成体干细胞   源性   多向分化潜能   自我更新能力   组织工程   社会伦理学   干细胞来源  

摘要： 干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞群体,目前已被应用于组织工程和再生医学邻域[1-2].根据来源不同,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞[3].胚胎干细胞存在潜在的社会伦理学争议,阻碍了其应用[4].成体干细胞虽然能从骨髓、外周血、脂肪、牙髓、毛囊[5]等组织获取,但存在取材困难、创伤较大、数量有限等问题[6].因此,探索一种新的干细胞来源是目前生物医学界研究的热点.

关键词： 转基因作物   种植面积   公顷   生物技术应用   服务组织  

摘要： 根据国际农业生物技术应用服务组织近日发布的一份报告，2014年全球转基因作物种植面积创新纪录，达1．815亿公顷，比2013年增加600万公顷。其中，美国继续以7310万公顷种植面积领先全球；中国种植转基因作物390万公顷，位列全球第六。

关键词： CRISPR-Cas9   Prmt1   小鼠胚胎干细胞  

摘要： 目的利用CRISPR-Cas9系统构建Prmt1敲除的E14小鼠胚胎干细胞系,并分析验证其敲除效果。方法利用第3代基因编辑技术CRISPR-Cas9系统,针对Prmt1第4、5、6、7外显子设计4条gRNAs,gRNA两两组合转染E14细胞,特异性的敲除E14细胞中的Prmt1,并在蛋白质水平,mRNA水平和基因组水平分别验证敲除效果。结果与对照组相比,两组敲除实验组都检测不到Prmt1蛋白质和mRNA的表达,基因组测序结果分析显示,两实验组中Prmt1的mRNA均出现无义突变,使其mRNA的翻译异常终止。同时,实时定量PCR结果显示,精氨酸甲基转移酶家族其他成员Prmt2,Carm1和Prmt6 mRNA表达不受影响。结论成功获得特异性敲除Prmt1的E14细胞系,为研究Prmt1在胚胎干细胞中的作用提供了重要工具。

关键词： 梅山猪   瘦肉率   种群   培育   农科院   畜牧兽医研究所   中国农业科学院   基因工程  

摘要： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所猪基因工程与种质创新团队通过基因编辑技术，成功制备并培育出具有“双肌”表型的肌抑素纯合子突变梅山猪新种群，该种群与野生梅山猪相比瘦肉率提高近12％。研究成果于日前在线发表于《科学报告》。