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关键词： 山药   生物技术   种质资源   基因工程   组织培养  

摘要： 为促进山药的快繁,对近年来国内外山药生物技术的研究成果进行综述,重点对山药的种质资源离体保存、遗传多样性和鉴定、组织培养、基因工程等方面的研究进行了评述,同时对今后山药生物技术的发展前景提出建议。

关键词： 胚胎干细胞   人羊水   成体干细胞   干细胞来源   生物学特性   cell   基因治疗   fluid  

摘要： 干细胞一直是生物学界和医学界的研究热点.根据来源不同,干细胞分为胚胎干细胞（embryonic stem cell,ESC）和成体干细胞,这2种细胞各有优势与局限性.近年来发现的介于两者之间的羊水干细胞（amniotic fluid derived stem cell,AFSC）,以其特有的优势成为一种新的干细胞来源.AFSC从产前诊断时羊膜腔穿刺所得标本中获得,取材方便,避免了伦理的限制,且无致瘤性.AFSC具有向外、中、内胚层细胞分化的潜能,可诱导分化为神经、肌肉、心血管、皮肤等组织,为疾病治疗和基因治疗的研究提供新的干细胞来源.本文将简要介绍ESC和成体干细胞的特点以及AFSC的发展历程,讨论AFSC的生物学特性,并阐述其在疾病治疗方面的进展.

关键词： 基因工程   牧草培育   应用  

摘要： 目前,国外对于基因工程在牧草培育中的应用已经取得了突破性的进展,而我国关于该种技术的应用还处在初级发展阶段。主要对现阶段我国牧草育种取得的初步成果进行分析,并对基因工程在牧草培育中的应用进行展望。

关键词： 市场潜力   根特大学   矿物质含量   Biotechnology   Nature   色稻米   万能药   农业科技   遗传修饰   农艺性状  

摘要： 可增加维生素和矿物质含量的转基因作物对促进公众健康具有巨大的潜力,但是由于转基因作物的负面舆论,对于消费者而言其可用性仍然受到阻碍。近期发表在《Nature Biotechnology》杂志上的,来自比利时根特大学的研究证明,这些作物的市场潜力很大。在过去的几年里。

关键词： 精准医学   人类基因组计划   DNA测序   DNA双螺旋结构  

摘要： 精准医学是美国总统奥巴马的智囊团经过深思熟虑所精心策划的,其用意是告诉大家精准医学的科学基础是DNA,是基于人类基因组计划的精雕细琢。DNA双螺旋结构的发现和人类基因组计划是生命科学的第一次和第二次革命,在此基础上的DNA测序和基因组技术驱动了精准医学这一崭新思想的提出,其意义深远。

关键词： 胚胎干细胞   细胞移植   肝   小鼠  

摘要： 目的研究小鼠胚胎干细胞在正常肝脏微环境中的迁移、分化及对正常肝组织的影响。方法分离小鼠生殖腺嵴获取胚胎干细胞,体外扩增、5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记后经尾静脉注入正常小鼠体内。于注射后2、4周取肝脏,连续冷冻切片,采用苏木精-伊红染色、免疫荧光双染色和PAS染色检测移植细胞在肝内的分布、清蛋白表达和糖原合成情况,显微计数分析肝细胞的增殖状态。结果移植2周,受体鼠肝脏内均可见散在分布的大而圆的BrdU和清蛋白双阳性细胞,PAS染色呈强阳性反应;体积小的BrdU阳性细胞,清蛋白表达呈阴性。移植4周,单位面积内BrdU阳性细胞数量较2周时减少,PAS着色较2周时浅,糖原颗粒细小、分布均匀,肝细胞的形态比较规则,但体积变大,胞核大而松散,单位面积的肝细胞数量较正常肝脏减少,肝小叶结构与正常鼠比较无显著改变。结论静脉移植的胚胎干细胞可以迁移至正常肝脏,在肝脏微环境中分化为肝细胞,并刺激正常肝细胞增殖。

关键词： 胚胎干细胞   培养基,无血清   培养基,条件性   组织工程   干细胞   培养   无血清培养   人胚胎干细胞   多能性   饲养层   基质   限定性培养基   科技型中小企业技术创新基金   深圳市战略新兴产业发展专项资金  

摘要： 背景:人胚胎干细胞有永久自我更新和向外、中和内胚层分化的能力,具有重要的基础研究价值和临床应用前景,可应用于再生医学、药物毒性筛选、早期胚胎发育、细胞移植治疗和基因治疗等领域,但是在限定条件下的大规模细胞培养、控制和定向分化技术的发展仍然具有实质性的挑战。在治疗应用方面,许多研究者试图建立可在无异源限定性和规模化培养体系中维持细胞多能性的培养方法。目的:综述近几年报道的人胚胎干细胞的无血清培养体系研究进展,重点是在发展适于治疗用途的无血清和无异源培养体系进程中,面临的挑战和进步。方法:应用计算机检索CNKI和Pub Med学术数据库中2008至2015年关于人胚胎干细胞无血清培养的文章,排除观点重复和陈旧的文章,最后对58篇文章进行归纳汇总。结果与结论:研究者已经在使用人源性饲养层细胞、无饲养层基质及限定性成分培养基上做了许多尝试,旨在选择合适的基质和培养基,使异源性成分达到最小化或者不使用,以求获得临床级别的细胞株。但是目前的细胞制品距离临床应用还有很大的距离,仍有很多问题需要解决,比如细胞制品的规范化、标准化、个性化定制等。相信随着干细胞研究和行业的规范,胚胎干细胞产品将会在临床得到广泛应用。

关键词： 植物   耐冷   功能基因   基因工程   新进展  

摘要： 低温是影响植物生长发育及作物产量最主要的环境胁迫因子之一。从合成渗透调节物质基因、抗冻蛋白基因、脂肪酸去饱和代谢关键酶基因、抗氧化酶类基因等全面系统地概述了耐冷功能基因及其在植物耐冷基因工程中的应用新进展,以期为植物耐冷遗传改良及育种奠定基础。

关键词： 胚胎干细胞   Mash-1   神经分化   小鼠  

摘要： 目的探讨过表达Mash-1基因对小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)向神经细胞分化的影响。方法采用病毒感染技术将MSCV-Mash-1基因、MSCV空载体感染至小鼠ESC(CE3细胞)(MSCV-Mash-1-CE3组、MSCV-CE3组),RT-PCR鉴定细胞Mash-1基因的表达情况;然后采用悬滴培养法使其形成拟胚体,再经神经培养液贴壁诱导分化。培养7、21 d于倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;免疫荧光染色检测细胞贴壁后其神经干细胞和神经元标记蛋白巢蛋白(nestin)和β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)的阳性率;实时荧光定量PCR检测诱导培养0、1、7、14、21 d时,细胞甲胎蛋白(α-fetal protein,AFP)(内胚层标记基因)、Brachyury(中胚层标记基因)、FGF-5(外胚层标记基因)、Oct3/4(ESC标记基因)、nestin(神经干细胞标记基因)和β-tubulinⅢ(神经元标记基因)表达情况。以正常CE3细胞作为对照(CE3组)。结果与MSCV-CE3组和CE3组比较,MSCVMash-1-CE3组细胞Mash-1基因表达明显升高。经神经培养液诱导培养7、21 d后,MSCV-Mash-1-CE3组可见许多细胞折光性增强,长出细长轴突,出现单极、双极或多极形态,呈神经干细胞和神经元细胞形态;MSCV-CE3组和CE3组仅能观察到少数细胞长出细长轴突。免疫荧光染色检测示MSCV-Mash-1-CE3组诱导分化7 d nestin阳性率和21 dβ-tubulinⅢ阳性率显著高于MSCV-CE3组及CE3组(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测示,与CE3组及MSCV-CE3组比较,培养1 d后MSCV-Mash-1-CE3组Brachyury表达明显降低(P<0.05),FGF-5和nestin表达增高(P<0.05);7 d后β-tubulinⅢ表达亦显著增高(P<0.05);CE3组及MSCV-CE3组以上指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组间各时间点AFP和Oct3/4表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达Mash-1基因能促进小鼠ESC向神经细胞方向分化。

关键词： 胚胎干细胞   诺考达唑   阿非科林   细胞周期  

摘要： [目的]探究诺考达唑和阿非科林联合应用对人胚胎干细胞周期同步化到G1和S期的作用并观察药物对细胞生长和生物功能的影响。[方法]采用诺考达唑和阿非科林先后作用于胚胎干细胞,流式细胞仪测定细胞周期,显微镜下观察药物对细胞生长状态的影响,荧光染色技术观察胚层标志物α-SMA和β-tubulin表达。[结果]加入诺考达唑和阿非科林后,G1期为66.35%,S期为33.52%,多数细胞被同步化在G1期;诺考达唑作用16 h,G1期为18.45%,S期为79.10%,多数细胞从周期抑制中恢复;能够形成典型的拟胚体;荧光染色显示α-SMA和β-tubulin均有表达。[结论]诺考达唑和阿非科林联合作用能够使胚胎干细胞66.35%同步化在G1期,诺考达唑作用16 h,79.10%的细胞同步化在S期。中胚层标志物α-平滑肌肌动蛋白和外胚层标志物β微管蛋白在蛋白水平均有明显表达。去除药物后,细胞未发生显著性损伤。