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关键词： 基因漂移   外部性   转基因作物   侵权理论  

摘要： 转基因作物的扩大种植正加剧着基因漂移产生的外部性生态风险;在该基础风险之上,制度设计缺失、监管力度不够、社会信任危机还将这一风险不断放大,而其根本症结在于基因漂移导致的污染产权界定不清。文章采用侵权理论,提出将基因漂移产生的污染产权分配给传统作物种植者,并提出从宏观立法建构、微观责任建构以及局部规则补充三个方面进行基因漂移侵权体系的整体搭建,以期能为基因漂移的外部性治理提供一些有效的私益救济路径。

关键词： NANOG   AMPK/mTOR   乳腺癌   细胞侵袭  

摘要： 目的探讨胚胎干细胞多能因子NANOG通过AMPK/mTOR通路介导乳腺癌细胞活性与侵袭。方法2019年7月至2020年8月期间收集首都医科大学附属北京同仁医院58例乳腺癌患者,将每例患者入院时的临床资料进行对比分析。qRT-PCR检测癌旁组织与癌组织中NANOG的表达水平,Western blot验证NANOG调控AMPK/mTOR通路。使用敲减NANOG的特异性质粒或AMPK的抑制剂Compound C处理细胞,MTT检测细胞活力,Transwell检测细胞侵袭能力。结果qRT-PCR检测发现,与癌旁组织(1.00±0.31)相比,癌组织中NANOG表达水平(1.45±0.27)升高(t=8.34,P<0.001),与正常乳腺上皮细胞MCF-10A(1.00±0.12)相比,乳腺癌细胞系BT474(2.64±0.25,t=10.24,P=0.001)、MCF-7(1.56±0.13,t=5.48,P=0.005)、ZR-75-30(1.84±0.16,t=7.28,P=0.002)中NANOG表达水平均升高,在BT474细胞中表达最高,可作为预测乳腺癌的特异性生物分子。NANOG的表达水平可能与淋巴结转移、组织学分级、病理类型有关,与非淋巴结转移患者(1.36±0.23)或非浸润性患者(1.35±0.25)相比,淋巴结转移患者(1.54±0.27,t=2.61,P=0.012)或浸润性患者(1.53±0.26,t=2.60,P=0.012)中NANOG表达水平升高。敲减NANOG后AMPK蛋白及磷酸化水平升高,mTOR、p70S6K蛋白及磷酸化水平降低(均P<0.05)。细胞中敲减NANOG能抑制乳腺癌细胞活性(si-RNA:100.00±8.65,si-NANOG:58.36±4.58)(t=7.37,P=0.002)与侵袭能力(si-RNA:121.41±10.34,si-NANOG:58.34±8.41)(t=8.20,P=0.001),使用AMPK抑制剂处理细胞后,敲减NANOG产生的作用被解除(均P<0.05)。结论胚胎干细胞多能因子NANOG抑制AMPK/mTOR通路的激活可促进乳腺癌细胞活性与侵袭能力,NANOG可作为预测乳腺癌的有效生物分子。

关键词： SATB1   质粒构建   DNA测序  

摘要： 核基质结合蛋白SATB1调控染色质的空间结构,参与真核生物基因表达。本论文通过PCR获得SATB1目的基因,然后与载体mCherry-C1同时用EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切后,用T4连接酶进行连接。连接质粒转入感受态宿主细胞并在Kana抗性的LB培养基中培养。分离获得Kana抗性单克隆菌株并进行扩大培养后提取重组质粒。对重组质粒进行双酶切验证和DNA测序检测。本论文成功构建mCherry-SATB1真核表达质粒,为后续研究SATB1的功能机制奠定基础。

关键词： 三氧化二砷   胚胎干细胞   中胚层分化   TET2   甲基化  

摘要： 目的研究三氧化二砷(ATO)调节胚胎干细胞(ESC)的中胚层分化和分化相关基因的表达。方法构建10-11易位2蛋白(TET2)的敲低慢病毒载体(shTET2)和过表达慢病毒载体(pVd-TET2),阴性对照分别为shNC和pVd-null,并转染培养的ESC细胞(CGR8)。使用ATO联合pVdTET2处理CGR8。细胞分为对照组、ATO、shNC、shTET2、ATO+pVd-null、ATO+pVd-TET2。Western blot检测以上各组ESC干性蛋白Nanog、Oct4、Rex-1,分化相关蛋白AFP、cleaved-CASP3、PARP-1(p85),中胚层标志物APOA1、EOMES,及外胚层标志物PAX6、TFAP2B、ZIC1的表达量。免疫缺陷小鼠体内注射ATO、shNC、shTET2处理的CGR8细胞,10周后,免疫组织荧光法检测小鼠畸胎瘤组织中Nanog的阳性率。结果ATO抑制CGR8细胞的增殖率,增加Nanog甲基化水平,上调ESC干性蛋白和外胚层标志物的表达,下调TET2以及分化相关蛋白和中胚层标志物的表达量(均P<0.05)。在CGR8细胞中沉默TET2后表现出于ATO一致的结果。然而,与ATO+pAd-null组比,ATO+pVd-TET2组降低Nanog甲基化水平,下调ESC干性蛋白和外胚层标志物的表达,上调TET2以及分化相关蛋白和中胚层标志物的表达量(均P<0.05)。ATO和shTET2细胞都抑制体内畸胎瘤中Nanog的标记的中胚层分化(均P<0.05)。结论ATO通过抑制TET2促进Nanog甲基化并抑制中胚层的分化。

关键词： 除草技术   转基因作物   育种手段   耐除草剂   作物田   作用靶标   现代农业   机械除草  

摘要： 从有农耕史以来,人类不断与草害做斗争。除草剂改变了靠人工、畜力和机械除草的状况,以其快速、高效及低成本的优势在现代农业中占据重要地位。然而,由于新作用靶标化合物发现趋难,除草剂创制进入瓶颈时期。通过育种手段提高作物对除草剂的耐受能力,利用过去不能用在“目标”作物的除草剂选择性防治耐除草剂作物田杂草已成为除草技术的新尝试。

关键词： 胰岛素基因   乳糖酶基因   工业用酶   受体细胞   编码蛋白质   基因工程   抗除草剂基因   目的基因  

摘要： 一、目的基因和标记基因在基因工程的设计和操作中,用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因就是目的基因,主要是指编码蛋白质的基因,如与生物抗逆性(抗旱基因等)、生产药物(人的胰岛素基因等)、毒物降解(抗除草剂基因等)、工业用酶(淀粉酶基因等)等相关的基因以及与优良品质相关的基因(肠乳糖酶基因等).

关键词： 大豆   半胱氨酸   蛋氨酸   基因工程  

摘要： 大豆(Glycine max (L.) Merr.)作为食品和饲料重要的蛋白质来源，其含硫氨基酸的缺乏是制约其营养价值的关键因素。国内外研究者为了探索大豆蛋白氨基酸组分的改良开展了大量研究。本研究介绍了植物中硫吸收和同化的分子机制以及大豆中的硫转运蛋白家族；综述了大豆中半胱氨酸和蛋氨酸合成代谢的分子机理，对其中的丝氨酸乙酰转移酶(Serine acetyltransferase， SAT)、O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶(O-acetylserine (mercaptan) lyase， OAS-TL)、胱硫醚γ-合成酶(Cystathionine γ-lyase， CGS)、胱硫醚β-裂解酶(cystathionine β-lyase， CBL)等关键酶基因进行了介绍；对大豆中含硫氨基酸基因工程研究进展进行了汇总，并对未来的相关研究进行了展望，为进一步开展大豆品质改良提高研究提供科学参考。

关键词： 基因工程   课堂教学   教学探索   教学方式  

摘要： "基因工程"是各高校生物技术专业人才培养的重要课程之一,对培养学生的科学思想和实践能力有着关键作用."基因工程"的实践性强,原理抽象难懂,且与之相关的技术方法更新速度快,这也对授课教师提出了更高的要求.文章结合生物技术专业"基因工程"课堂教学现状,提出了通过优化课程内容、丰富教学模式、课程思政建设以及完善成绩评价体系等方式,在提升教学效果的同时培养学生的创新思维和专业素养,增强学习的自主性和成绩反馈的科学性,以实现生物技术专业高素质人才培养的目标.

关键词： 基因工程   益生菌   乳酸菌   CRISPR-Cas9技术   免疫调节  

摘要： 益生菌是一类有助于动物机体健康的微生物,在提高机体免疫力、改善肠道微生物平衡、促进养殖场环境等方面发挥重要作用。近年来,国内外学者对基因工程技术的探索已逐步深入,并在实际生产中加以应用。但是,目前为止绝大多数的研究将基因编辑技术着眼于真核生物。在此基础上,如何将基因编辑技术应用于益生菌,使益生菌发挥出更大的潜力是当前的研究热潮。因此通过基因工程技术将特定基因与益生菌进行基因编辑并表达,编辑后的益生菌可以表达特定的基因或者靶向对宿主发挥免疫调节作用。作者总结了基因编辑后的益生菌与宿主的相互作用,综述了CRISPR-Cas9技术在基因编辑乳酸菌及畜牧生产上的应用,同时经过分析比较不同基因编辑技术对乳酸菌进行基因编辑的方法,发现CRISPR-Cas9技术是目前针对乳酸菌和双歧杆菌等食品级益生菌相对灵活的基因编辑工具,能够实现益生菌在宿主体内发挥多重健康功效的目的,并对未来CRISPR-Cas9技术在基因编辑乳酸菌中的应用进行了展望,认为未来应将CRISPR-Cas9技术和其他基因编辑方法相结合,探索出更快更高效、简便的益生菌基因编辑技术。

关键词： 生物科学技术   农产品安全   农业灾害   现代农业   生态环境   转基因技术   科学规范   不可替代  

摘要： 农药是农业生产中重要的生产资料,其在防治病虫草鼠等引起的农业灾害,促进农业增产增收等方面发挥着不可替代的作用。然而,农药的长期大量不规范使用会对农产品安全和生态环境带来严重威胁。如何科学规范使用农药,提高农产品安全性和有效保护生态环境是当代农业现代化发展的关键问题。转基因技术作为一项先进的生物科学技术,将其应用于农业生产中可以显著改善作物的生长性状、提高作物产出量和生长率,目前已成为现代农业中应用较为广泛的技术手段。