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关键词： 脊髓损伤   勿动蛋白A胞外肽残基1-40   神经干细胞   基因工程  

摘要： 目的构建勿动蛋白A胞外肽残基1-40(NEP1-40)基因工程神经干细胞(NEP1-40-NSCs)并探究其对神经元轴突再生的影响。方法制备NEP1-40-NSCs,检测目的基因的表达量,同时鉴定其分化潜能;NEP1-40-NSCs组与神经干细胞(NSCs)组分别与大鼠海马组织神经元共培养后测量各组神经元轴突新增面积,同时鬼笔环肽染色观察生长锥及丝状伪足结构。多组间比较用单因素方差分析,两组间比较用t检验。结果NEP1-40-NSCs组β3-微管蛋白(Tuj-1)、少突胶质细胞转录因子2(Oligo2)及髓鞘碱性蛋白(MBP)所标记的阳性细胞数高于NSCs组(47.001±16.670比30.333±3.480、38.001±14.001比24.000±2.582、16.464±0.813比12.334±0.681,t=4.789、5.422、6.745,P<0.05),而胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的阳性细胞数低于NSCs组(22.002±20.331比42.330±3.575,t=5.688,P<0.05)。NEP1-40-NSCs组的轴突新增面积大于NSCs组[(9096.000±4292.000)μm2比(4803.000±541.300)μm2,t=7.929,P<0.05];鬼笔环肽染色结果显示与NSCs组比较,NEP1-40-NSCs组的生长锥面积增宽[(103.000±79.670)μm2比(23.330±8.192)μm2,t=9.725,P<0.05],伪足数量增多且长度增加[(0.122±0.037)μm比(0.085±0.008)μm,t=4.513,P<0.05]。结论NEP1-40-NSCs在体外能够促进神经元轴突的延长,影响生长锥的结构发育,具有促进脊髓损伤修复的潜力。

关键词： DNA   超声波打断   福尔马林   石蜡包埋   二代测序  

摘要： 二代测序(next generation sequencing,NGS)可以利用少量样本获得多基因多位点的突变信息,为患者选择合适的靶向治疗^([1])。目前比较多试剂盒使用的杂交捕获法建库流程首先需要将待测序的DNA分子用超声波打碎成200~500 bp长的片段,短的DNA片段有利于进行DNA分子快速杂交和高灵敏目标基因检测。本实验应用Covaris M220超声波打断仪对福尔马林固定石蜡包埋标本(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)DNA进行破碎,得到比较满意的结果,现介绍如下。

关键词： 转基因食品检测   食品安全   商业化种植   转基因作物   技术探析   未来发展趋势  

摘要： 近年来,商业化种植的转基因作物品种变得越来越丰富,转基因食品安全也吸引了越多越多人的关注。基于此,本文以转基因食品检测技术为主要研究内容,分析了转基因食品的基本情况、转基因食品检测技术的分类与方法,最后提出了转基因食品检测技术在食品检测工程中的具体应用及其未来发展趋势,旨在确保转基因食品检测技术的作用得以顺利发挥,加强对食品安全的把控。

关键词： SOLO分类理论   基因工程习题   思维结构   突破路径  

摘要： 教学实践结果表明,大部分学生缺乏突破基因工程习题的思路,其根本原因是缺乏对基因工程习题思维结构特点的正确认识。因此,以SOLO分类理论为指导,对基因工程习题的思维结构特征进行研究,并提出以过程为核心,辐散周边知识;以基因为媒介,深挖内在联系;以情境为拓展,增加思维深度的突破思路。

关键词： 科研引导   “本-硕”衔接   入学教育   基因工程   综合实验  

摘要： 研究生招生规模日益增长,给研究生入学引导带来更大压力。大部分硕士新生在入学阶段会普遍面临困境,而现在普遍采用的“大课堂式”入学宣讲,针对性和专业性不足。针对于此,我们提出将入学教育“嵌入”到具体专业课程中,潜移默化且有针对性地对学生进行入学引导,以基因工程及综合实验为例,通过项目式教学模式形成“层进式”课程体系,与科研实战对接,采用“理+实”一体化教学夯实学生专业基础,将入学引导教育内容按需融入,构建能够发挥“科研引导”作用的专业课程。通过对学生和教师的调研发现,“科研引导型”专业课程改革成效显著,师生满意度超过95%,特别在师生前期需求强烈的“思维培养”“技能训练”等方面获得较高的评价。课程的实践能够作为研究生入学引导的创新模式和有益尝试,提升研究生培养水平,其未来示范推广前景良好。

关键词： 雷州黑鸭   EI24   DNA测序   单核苷酸多态性  

摘要： 为了探讨依托泊苷诱导的2.4蛋白(etopositde-induced 2.4protein,EI24)基因在雷州黑鸭群体中的遗传多态性,分析与雷州黑鸭产蛋性状相关的潜在遗传标记位点,本试验以雷州黑鸭为研究对象,采用PCR扩增技术获得EI24基因的目的片段,通过直接测序法检测到突变位点,随后使用GraphPad Prism 6.0软件对产蛋性状和基因型与单倍型之间进行多重比较,分析EI24基因的SNP位点与雷州黑鸭产蛋性能的相关性。结果表明,EI24基因内含子5中发现7个SNP位点,其中,I5-17G>T、I5-59G>A>T、I5-159G>A、I5-110T>A和I5-256C>A位点与雷州黑鸭开产日龄显著相关;I5-166G>A和I5-385C>T位点与雷州黑鸭开产体质量极显著相关。单倍型分析发现,H1H4单倍型可作为雷州黑鸭群体筛选低开产日龄、高开产体质量、高产蛋量个体的综合最优单倍型。说明EI24基因多态性可为选育优势高产蛋量的雷州黑鸭提供有利的遗传标记。

关键词： 免疫系统   生存竞争   原核生物   防御策略   基因编辑   诺贝尔奖   抗病毒机制   基因工程  

摘要： 为抵抗病毒的频繁入侵,原核生物进化出了许多精巧的防御策略,被统称为“原核免疫系统”[1~3].原核生物与病毒之间的生存竞争是自然界最大规模的斗争,也是生物技术的重要来源.其中,限制-修饰系统[4]和CRISPR-Cas系统[5]是分布最为广泛的原核免疫系统,它们的机制解析分别带来了基因工程和基因编辑的技术革命,均被授予诺贝尔奖.

关键词： 社会性科学议题   基因工程   生物学核心素养  

摘要： 以“基因工程的基本操作程序”为例,运用社会性科学议题(SSI)教学,通过核心议题形成、科学证据收集、知识体系构建、学习成果整合、教学评价实施等阶段,围绕目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因及其表达产物的检测鉴定四部分展开教学,有助于发展学生的生物学核心素养并构建多元的评价模式。

关键词： ESCs   单倍体ESCs   鱼类   多能性   核移植   半克隆  

摘要： 胚胎干细胞(ESCs)具有自我更新能力和多向分化潜能,可作为生物学进程、胚胎发育和再生医学等研究的理想实验模型,由此人们对不同物种胚胎干细胞的开发产生了浓厚的兴趣,包括在鱼类、啮齿类和灵长类中建立了胚胎干细胞系。该文重点总结了鱼类中ESCs和ESCs样细胞系的培养技术和应用难点,讨论了鱼类胚胎细胞系因体外长期培养丢失多能性、染色体数目异常、生殖系传递能力和嵌合体形成效率低等问题,并探讨了通过核移植、半克隆技术作为代替途径来解决生殖系嵌合问题以及快速制备转基因品系鱼类模型,希望对优化鱼类ESCs培养技术提供参考。

关键词： 葡萄糖阻遏作用   基因工程   酵母菌   葡萄糖信号通路   混合碳源利用  

摘要： 大多数微生物通过一种复杂的机制来感知和传递环境中的葡萄糖变化并对其做出适当的反应。酵母细胞中,葡萄糖主要通过Snf1/Mig1信号通路来阻遏三羧酸循环、糖异生、乙醛酸循环和替代碳源代谢等相关基因的转录表达。木糖、半乳糖、蔗糖、乙醇和有机酸等替代碳源只有当环境中的葡萄糖消耗殆尽后才能重启代谢编程,进行替代碳源的利用。而葡萄糖去抑制对于提高现代微生物工业生产效率、解决环境与能源问题具有重要意义。本文综述了Snf1/Mig1信号通路阻遏机制以及相关转录因子的活性位点,具体介绍了多种替代碳源的应用以及其受葡萄糖阻遏的具体机制,总结提出了根据不同背景缓解或解除碳代谢阻遏的策略,以期为酵母菌现代化生产应用范围的扩大和效率的提高提供新思路。