教学课程资源库 更多>>

关键词： 脂肪酸代谢   细胞代谢   胚胎干细胞   表观遗传   早期胚胎发育   内胚层   早期阶段   信号通路  

摘要： 目前对于早期胚胎发育和干细胞命运决定的研究主要关注于转录因子、信号通路和表观遗传,然而细胞代谢作为细胞命运转换过程中最早出现变化的生命活动之一,其对于早期胚层分化的影响仍知之甚少。研究表明,脂肪酸代谢活性以及相关产物的丰度在胚胎干细胞自发分化的早期阶段就发生明显变化,但脂肪酸代谢是否在内胚层命运决定中发挥作用尚不清楚。

关键词： 流变学特性   生长抑制物   合成生物学   溶氧浓度   基因表达产物   高密度培养   营养物质   高密度发酵  

摘要： 大肠杆菌因为生长速度快,易于培养,代谢可塑性强,拥有丰富的遗传和基因工程工具,成为代谢工程和合成生物学的最佳宿主之一[1]。利用重组大肠杆菌的高密度发酵,可以获得较高的生物量和显著提高目的基因表达产物的浓度[2]。但在工业发酵过程中,影响生物量产出的因素非常多,比如培养基的成分(细菌生长所需的营养物质)、发酵过程中生长抑制物的积累、溶氧浓度、培养温度、发酵液的pH值、补料方式以及发酵液流变学特性等[3]。近几年国内有关大肠杆菌高密度培养的文献报道表明,发酵32 h内的菌体密度大概在OD600为79~125[4-6]。

关键词： 胚胎干细胞   间充质干细胞   诱导性多能干细胞   临床研究  

摘要： 自2015年起我国干细胞临床研究采用研究机构与研究项目双备案管理,随着再生医学技术的发展和国家政策的规范,我国干细胞临床研究呈现出快速增长的趋势。本综述从干细胞种类、干细胞来源、治疗疾病和研究方法等方面讨论双备案制度下我国干细胞临床研究的进展情况。对干细胞临床研究存在的一些问题,包括临床方案设计缺乏科学性及严谨性、研究对象缺乏精准分层、研究项目存在重复与同质化现象,干细胞临床研究备案项目的未来转化,以及干细胞临床研究备案管理面临的挑战进行探讨分析和提出建议,为进一步推动我国干细胞临床研究的发展提供参考。

关键词： 软骨肉瘤   透明细胞型   多中心   免疫组织化学   DNA测序   荧光原位杂交  

摘要： 目的探讨透明细胞型软骨肉瘤(clear cell chondrosarcoma,CCC)的临床病理特征、诊断和鉴别诊断。方法回顾性分析6例CCC的临床病理学特征、影像学表现、免疫表型及分子遗传学特征,行HE、免疫组化染色及基因检测,并复习相关文献。结果6例中男性4例,女性2例,年龄26~51岁,平均年龄37.8岁;发病部位:股骨4例,肱骨1例,胸椎1例。临床表现均为长期疼痛,2例合并骨折。眼观:手术切除标本肿瘤最大径2.0~8.5 cm;镜检:肿瘤细胞呈分叶状、片状、巢团状分布,瘤细胞胞质透明,小叶中央可见骨小梁或成骨,小叶周围可见散在破骨样巨细胞,2例可见局灶经典型软骨肉瘤成分。免疫表型:肿瘤细胞S-100阳性,1例CKpan阳性,SATB2在骨母细胞中阳性,而在瘤细胞中阴性,Ki-67增殖指数为2%~5%。分子检测示IDH1/IDH2、H3F3A均为野生型。2例于术后14、44个月复发,其中1例同时转移到锁骨。结论CCC属软骨肉瘤亚型,绝大多数位于长骨骨骺和干骺端,以股骨近端最为多见,组织病理学以透明细胞、不规则骨小梁及破骨样多核巨细胞为特征,因其临床多呈低侵袭性,正确识别该亚型可避免临床过度治疗。

关键词： 耐除草剂转基因作物   草甘膦   草害治理   产业化种植  

摘要： 基因重组技术的发展突破了作物有性杂交的限制,为培育耐除草剂作物提供了新途径。转基因作物种植产生了显著的经济效益、社会效益和生态效益,种植面积迅速增长。全球转基因作物1996年仅170万hm^(2),2022年种植面积扩大到2.022亿hm^(2),增加了近120倍。面积最大的前5个国家转基因作物种植比例均在90%以上,阿根廷种植比例接近100%,耐除草剂性状一直是转基因作物的主要性状。2008年,我国启动了转基因生物新品种培育科技重大专项,利用生物育种技术研发出中黄6106、DBN8002、DBN9936、DBN9858、DBN3601T等多个含有耐除草剂草甘膦基因的转化体,并获得农业转基因生物生产应用安全证书。2021年-2023年,我国在云南、内蒙古等地开展了转基因作物试点种植,结果表明,草甘膦在上述转化体及其衍生品种上应用,除草效果好、增产节本优势明显,适合不同的轮作与栽培模式。本文概述全球转基因作物的研发和商业化应用情况,分析我国农田杂草危害现状及防控需求,结合具体国情和转基因耐除草剂作物应用需求,论述其在我国产业化应用的前景,以期为转基因耐除草剂作物的研究、种植和草害可持续控制提供参考。

关键词： 人胚胎干细胞   自然杀伤细胞   定向造血   SB431542   CHIR99021  

摘要： 目的探讨在造血分化阶段增强定向造血(DH)信号对人胚胎干细胞(hESCs)分化形成的自然杀伤(NK)细胞(也称为hESC-NK细胞)生成效率和功能的影响。方法hESC(H1)经离心法形成拟胚体,在诱导造血分化的第0至8天,对照组加入BMP4、VEGF、bFGF、SCF等细胞因子;而增强定向造血(DH)组在对照组的基础上添加WNT激动剂(CHIR99021)和Nodal-activin抑制剂(SB431542);进而采用一致的方法分化形成NK细胞。使用流式细胞术和靶细胞K562共培养等方法分析造血分化效率、NK细胞生成效率、体外效应功能及表面受体等相关分子表达。结果相较于对照组,DH组在造血分化阶段第8天动脉生血内皮细胞(CD34^(+)DLL4^(+))数量显著增加,原始造血相关细胞(CD34^(-)CD43^(+))显著降低(P<0.05)。在NK细胞分化第28天分析发现,DH组NK细胞(CD45^(+)CD56^(+))数量显著增加,效应功能相关分子IFN-γ、Granzyme B、Perforin、CD107a虽微弱上升,但无统计学差异,激活性受体CD16a和CD69明显增加,但NKP46显著降低,抑制性受体NKG2A显著增加,CD96显著降低(P<0.05)。结论在hESC向造血分化过程中增强定向造血信号,在不影响NK细胞体外功能的情况下显著提高NK细胞生成效率和CD16a表达,为提高hESC-NK细胞或iPSC-NK细胞生成效率提供了一种新的思路。

关键词： 支气管肺泡灌洗液   宏基因组二代测序   性能确认   准确度   结核分枝杆菌  

摘要： 目的建立一种宏基因组二代测序(mNGS)DNA流程检测BALF标本的性能确认方法。方法以Hela细胞代表宿主细胞,向无菌生理盐水中加入不同浓度Hela细胞、7种病原体(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉和腺病毒)和干扰物质制备模拟BALF标本,同时收集临床BALF标本,以传统检测方法为参比方法,评价mNGS检测结果,确定mNGS的最低检出限、精密度、抗干扰能力、稳定性和准确度。结果模拟标本中,肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、白色念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉和腺病毒7种病原体的最低检出限分别为150、262、102、67、96、83 CFU/ml和439拷贝/ml。模拟阳性标本中所有病原体重复检测结果符合率均为100%。抗干扰试验结果显示,人源核酸浓度越高,mNGS检出病原体序列数越少。以大肠埃希菌和宋内志贺菌评价mNGS对近源物种分辨能力,结果显示,当宋内志贺菌浓度为4000 CFU/ml时,该系统能稳定分辨大肠埃希菌和宋内志贺菌。稳定性试验结果显示,标本进行1、2、3次冻融或在4℃、-20℃、-80℃放置36 h后病原体序列数无明显变化。与传统检测方法相比,17份临床标本的初步准确度为82.4%(14/17)。2021年10月25日至2022年9月14日同济医院同时进行mNGS和传统方法检测的临床BALF标本的持续评估结果显示,mNGS相对细菌培养、真菌培养、分枝杆菌培养、结核分枝杆菌培养和常规PCR技术的准确度分别为67.5%(472/699)、81.5%(570/699)、92.3%(335/363)、96.4%(350/363)和86.8%(132/152)。与常规PCR技术比较,mNGS检测耶氏肺孢子菌、腺病毒、肺炎支原体的准确度分别为89.4%(84/94)、93.3%(56/60)和87.1%(61/70)。结论通过制备模拟BALF标本以及以传统检测方法为参比方法,可以初步评价mNGS检测BALF标本的性能特征。

关键词： 孤雌胚胎干细胞   分化   细胞移植   细胞治疗   疾病  

摘要： 研究发现,卵子孤雌激活后,从囊胚中获得孤雌胚胎干细胞(parthenogenetic embryonic stem cells, pESCs),pESCs表达多能性标志物,发生表观遗传修饰重编程。它们具有高度的分化潜能,在体内可产生畸胎瘤,在体外能形成类胚体。pESCs能分化成多种类型的细胞,已被用于细胞移植治疗研究。用pESCs分化来的成纤维细胞构建皮肤组织,移植到皮肤缺损处,能促进伤口愈合。源自pESCs的成骨细胞、成软骨细胞和肌腱细胞接种到支架上并移植到皮下后,能再生出骨、软骨和肌腱组织,从而可以为治疗这些组织的损伤提供细胞来源。pESCs分化产生的心肌细胞移植到患急性心肌梗死的宿主心脏后,可改善心脏功能。由pESCs分化的神经干细胞或神经元移植到受损大脑或患帕金森病的宿主大脑后,也能促进大脑皮层的修复,改善宿主的运动缺陷。因此,pESCs在临床上具有重要的应用和推广价值,从而为疾病的细胞移植治疗提供理论依据和临床应用策略。

关键词： 草原龙胆   基因工程   研究进展  

摘要： 草原龙胆(Eustoma grandiflorum)又称洋桔梗,是目前国际花卉市场上最受欢迎的高档鲜切花和盆花种类之一。近年来,国内外对草原龙胆基因工程的研究越来越多,文中对草原龙胆转基因高效遗传转化体系的建立和利用基因工程技术延长草原龙胆观赏期、增添其花色、增强其抗病虫害能力、提高其耐盐碱性的研究进展进行了综述,并对草原龙胆基因工程育种中出现的问题和草原龙胆基因工程的发展方向进行了讨论。