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关键词： 交替传译   词汇误译漏译   定语从句   翻译腔  

摘要： 本篇英汉交替传译实践报告所采用的语料来自于牛津辩论会网络视频。牛津辩论会历史悠久,辩论传统是邀请专家、学者、学生等人分别进行正反立场的主题演讲并于网络公开发布。本篇实践报告选取其中一篇演讲作为语料,辩论主题为“基因工程是否会削弱人类天性”。在完成英汉交替实践后,笔者分析了英汉交传过程中会遇到的问题,并提出与之对应的解决策略。 报告选择实践中的典型案例,从“词汇误译漏译”、“定语从句翻译不当”、“译语出现翻译腔”这三个角度对此次实践进行分析并得出如下结论。针对于词汇误译、漏译可以采用结合上下语境内容推测生词含义及对概念补充说明的口译技巧;源语定语从句翻译不当,可以采用译成前置定语和重复先行词的应对方法;译语出现翻译腔可以采用归化和语态转换的口译策略。此外,笔者总结反思了此次交传实践任务的不足,并对未来的口译学习提出了一些意见。

关键词： 石油污染土壤   生物修复   基因工程菌  

摘要： 随着石油开采量和使用量的不断增加,其在开采、运输、储存过程中的不规范操作或事故,导致大量石油进入环境中,造成了严重的环境污染问题。石油是一种成份十分复杂的天然有机化合物的混合物,通常由烷烃、芳香烃、胶质和沥青质组成。根据油源的不同,烷烃组分可占石油的50%～95%,且我国原油含蜡量高,其中石蜡主要成份为长链烷烃,导致了烷烃组分中的长链烷烃含量较高。长链烷烃因其含量高,难降解的特点,提高其处理效率就尤为重要。微生物修复是迄今为止修复石油污染较为有效安全的一种方法,但微生物往往受限于其降解能力,导致了处理效果不理想,通过分子生物学手段构建可降解石油污染物的基因工程菌用于污染修复是一种较为有效的方法,工程菌株因其具有降解能力强、降解底物范围广的特点,成为修复石油污染的理想菌株。 本研究对Acinetobacter vivianii KJ-1中长链烷烃降解基因almA进行原核表达并分析其降解功能。将该基因通过三亲接合转化法转入至野生型石油降解菌Acinetobacter calcoaceticus 21#中,分析其生长特性、降解能力、产酶活性的变化。考虑到基因工程菌直接投加到环境中可能存在着安全性问题,实验制备了石油降解酶制剂用于石油污染土壤修复中。最终对野生型菌株*** 21#进行了全基因组分析及工程菌株*** 21#-A3重测序分析,在分子水平上验证了其石油烃降解能力。主要研究结果如下: （1）对本实验室保藏菌株*** KJ-1中长链烷烃降解基因almA进行原核表达,测定了AlmA蛋白对2-癸酮和2-十二酮的酶活性,分别达到0.39（U/mg）和0.37（U/mg）。并测定了AlmA蛋白的代谢产物,其可催化脂肪酮转化为相应的酯,而在相同条件下不进行长链正构烷烃的羟基化。实验结果证明菌株KJ-1中AlmA蛋白具有Baeyer-Villiger单加氧酶（BVMO）活性,参与了烷烃降解途径中的次末端氧化途径。 （2）通过三亲接合转化法将*** KJ-1中almA基因转入至野生型石油降解菌Acinetobacter calcoaceticus 21#中,并通过PCR扩增及测序验证了almA基因被整合至*** 21#基因组中,成功构建出一株基因工程菌。对其生长特性、降解能力及产酶活性进行检测发现:外源基因的导入并未显著影响野生型菌株*** 21#的生长能力,受体菌与工程菌生长趋势大致相同,而在以正二十八烷为唯一碳源的无机盐培养基中,工程菌株*** 21#-A3表现出比野生型菌更强的增殖能力。在正二十八烷降解实验中,与野生型菌株21#相比,工程菌株21#-A3在7 d和14 d时对C的降解率分别提高了6.72%和6.89%。在测定粗酶液酶活时发现,重组工程菌21#-A3制备的粗酶液对2-癸酮、2-十二酮的酶活性分别提高了18.81%和18.56%。 （3）通过对菌株21#和21#-A3制备的酶制剂分别进行土壤修复实验可知,在第1 d和第4 d时两种酶制剂对石油的降解率并无显著差异,第7 d时,二者对1%和5%石油浓度土壤的石油降解率分别达到了20.32%、23.1%和31.64%、35.92%,两种酶制剂对5%石油污染土壤的石油降解率高于1%石油污染土壤,且21#-A3制备的酶制剂石油降解率显著高于21#制备的酶制剂（P<0.05）。 （4）完成了对*** 21#的全基因组分析。菌株*** 21#仅有一个环状的染色体,拼装后序列全长4089750 bp,不含有质粒,GC含量38.67%,预测共有3829条编码基因。通过对编码基因进行KEGG、COG、GO进行功能注释后发现:21#基因组中具有多条与石油烃降解相关基因,包括2个中链烷烃降解基因alk B1＿1、alk B1＿2,长链烷烃降解基因almA、Lad A基因及芳香烃降解基因cat A、cat B、cat C、ben D,并对其相应代谢通路进行了分析。通过对*** 21#中AlmA蛋白进行系统进化发育树及蛋白多重序列比对分析,预测了该蛋白同样具有BVMO活性。同时发现21#基因组中具有氯霉素、头孢菌素等小类抗生素及磺胺类、四环素抗生素等大类抗生素抗性基因。 （5）完成了对*** 21#-A3的重测序分析。编码区上共有11个核苷酸序列发生变化,1个短片段缺失,通过对蛋白功能分析后,预测该变化不会显著影响菌株21#-A3的生长发育能力。并在重测序过程中发现了一段新增氨基酸序列,此序列与*** KJ-1中AlmA序列相似性达到了

关键词： 生物技术   分子生物学   系统生物学   合成生物学   基因工程   抗体工程   生物制造   生物经济  

摘要： 本文首先介绍了生物技术的概念与发展历程，尤其是分子生物学、系统生物学、合成生物学等学科发展对形成生物核心技术、关键技术的影响以及生物技术的组成。其次，介绍了生物制造的概念、特征与作用意义。最后，阐述了生物经济的发展价值与态势。通过上述三方面的叙述与评论，提出以生物技术为支撑、生物制造为生产方式的生物经济将成为绿色发展的重要方向和构建循环经济重要引擎的基本观点，作为践行习近平总书记关于因地制宜发展新质生产力重大论断的领域性、专业性的体会认识，为体现在农工党界别优势领域有深度、广度的战略科学研究提供相关资料支撑。

关键词： 基因工程抗体   呕吐毒素   玉米赤霉烯酮   免疫层析   双特异性抗体  

摘要： 玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）是粮食中常见的真菌毒素,对生物体具有生殖毒性和遗传毒性等,因而建立快速检测方法限制受真菌毒素污染的粮食流入市场十分必要。基因工程抗体作为三代抗体,能够克服传统抗体制备的限制,实现高效制备,有效定向改造进化,可广泛地应用于免疫快速检测中。大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115、哺乳动物细胞Expi293F作为成熟的重组蛋白表达体系,广泛应用于基因工程抗体的制备中。本文以3种表达系统制备了ZEN和DON的单特异性和双特异性抗体。基于单特异性抗体构建胶体金免疫层析方法并应用于粮食谷物检测,基于ZEN和DON双特异性抗体构建同步免疫检测试剂盒,实现ZEN和DON的同时定量检测。本文的主要研究内容如下:（1）大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115表达系统的评价。从NCBI库获取DON和ZEN抗体可变区的基因序列（NCBI登录号:AAC53026.1,AAC53027.1;Y151141,AY151140.1）,将重链可变区和轻链可变区用（GlySer）连接构建单链抗体（single chain antibody,sc Fv）,并分别于大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中表达。结果表明,大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115表达的ZEN单链抗体（ZEN-sc Fv）均有活性,而DON的单链抗体（DON-sc Fv）对抗原均无识别活性。基于大肠杆菌BL21表达产物建立的酶联免疫吸附检测方法（Enzyme-Linked immunosorbent assays,ELISA）标准抑制曲线方程为Y=-0.009752X+1.275（R=0.9735）,IC为79.47 ng/m L;基于毕赤酵母GS115的表达产物的ELISA标准抑制曲线方程为Y=-0.01045X+1.218,R=0.9585,IC为68.71 ng/m L。（2）基于Expi293F哺乳动物细胞表达的ZEN和DON sc Fv、全长抗体（Immunoglobulin G,Ig G）以及双特异性单链抗体的评价研究。基于载体p CMV和p TT5,Expi293F细胞瞬时表达获得了ZEN和DON的sc Fv、Ig G、双特异性单链抗体,且基于p CMV载体表达产量更高。基于ZEN-sc Fv和ZEN-Ig G构建ELISA方法检测灵敏度分别为6.46 ng/m L和6.27 ng/m L;基于DON-Ig G和DON-sc Fv构建的ELISA方法灵敏度分别为140.35 ng/m L和69.01 ng/m L。双特异性单链抗体Bis-sc Fv对ZEN和DON具有结合活性,基于其构建的ELISA方法对ZEN和DON灵敏度分别为20.64 ng/m L和132.29 ng/m L,且具有较强的特异性。（3）基于基因工程抗体构建免疫检测方法。基于ZEN-Ig G,构建了检测谷物中ZEN的胶体金免疫层析方法,其视觉检测限为60 ng/m L,经HPLC方法学验证,该方法就有良好的准确性;基于双特性单链抗体建立双联酶联免疫检测方法,其ZEN和DON的定量范围分别为1 ng/m L～100 ng/m L和10 ng/m L～500 ng/m L,线性方程分别为Y=-0.4028Lg X+0.9614(R=0.9467,IC为13.98 ng/m L)和Y=-0.5275Lg X+1.585(R=0.9681,IC为113.99 ng/m L),该方法对玉米粉中的ZEN和DON的加标回收率为86.02%～108.14%,相对偏差小于15%。综上,基于大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115和哺乳动物细胞Expi293F三种宿主生物成功表达了ZEN和DON的单特异性抗体以及双特异性抗体,并基于哺乳动物细胞Expi293F表达抗体构建快检方法并实现应用,为高效的抗体制备和应用研究奠定了基础。

关键词： Wnt信号通路   自身免疫调节因子   胚胎干细胞   胸腺上皮祖细胞   内胚层细胞  

摘要： 背景:自身免疫调节因子(autoimmune regulator gene,Aire)及Wnt信号通路在小鼠胚胎干细胞多能性的维持及分化中都发挥着重要作用,但Wnt信号与Aire是否参与了小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞的分化尚未可知。目的:探讨Wnt信号通路和自身免疫调节因子与胚胎干细胞分化的关系。方法:采用两步分化方法定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内胚层再分化为胸腺上皮祖细胞,然后用Aire shRNA慢病毒感染小鼠胚胎干细胞,嘌呤霉素筛选单克隆稳定株,再采用两步分化方法进行诱导分化,分别于定向诱导分化第0,3,10天,采用细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot、Real-Time qPCR检测相关基因及蛋白的表达变化。结果与结论:①定向诱导分化第0天,免疫荧光染色显示SSEA1、OCT4表达呈阳性;②定向诱导分化第3天,免疫荧光染色显示SOX17、FOXA2表达呈双阳性;③定向诱导分化第10天,流式细胞术结果显示EPCAM1、K5、K8表达呈阳性;④与未分化的小鼠胚胎干细胞相比,诱导分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β蛋白表达升高,Aire蛋白表达降低;⑤与未分化的小鼠胚胎干细胞相比,诱导分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β及Aire mRNA表达升高;⑥与正常培养的小鼠胚胎干细胞及其最终分化的胸腺上皮祖细胞相比,敲低Aire基因的小鼠胚胎干细胞及其最终分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β蛋白表达水平降低。综上所述,Wnt信号通路和Aire共同参与了小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为小鼠胸腺上皮祖细胞的过程。

摘要： 美国生物学家迪安·海默所著《中国生物工程》(美国国家科学院出版社1989年出版)一书中，写到李载平之于中国生物工程的不可或缺：“在西方，众所周知，李载平是把分子生物学引入中国的先驱者，他还促进了国际合作……”中国分子生物学家李载平，为中国分子生物学和基因工程研究做出了奠基性的贡献。李载平（1925—2018）,18岁考入北京大学理学院化学系，22岁毕业后留校任医学院生化科助教。1956年考取中国科学院上海生化所研究生，师从曹天钦。1977年，担任生化所分子遗传研究室主任。1996年当选为中国工程院院士。2018年在上海去世。李载平的一生，亲历了中国生物化学研究从一穷二白到迈入国际前沿水平的发展过程。

关键词： 膀胱癌   卡介苗   纳米载体   基因工程   免疫治疗  

摘要： 癌症免疫治疗已成为继手术、放疗和化疗之后的第四大主流治疗选择，并取得了令人鼓舞的成果。肿瘤免疫治疗通过调动或激发机体自身的免疫功能，从而抑制和杀伤肿瘤细胞。然而，肿瘤免疫治疗作为一种新兴的治疗手段，由于缺乏有效的免疫细胞传递途径以及具有较高的毒副作用，在临床上的应用受到限制。近年来，纳米材料和基因工程在保护抗原递送、激活靶向T细胞、调节免疫抑制的肿瘤微环境和提高治疗效果等方面显示出巨大的潜力。卡介苗是一种用于预防结核病的减毒牛分枝杆菌活疫苗，于1927年首次报道其抗肿瘤活性。卡介苗可通过诱导多种细胞因子和趋化因子激活免疫系统，其特异性免疫和炎症反应可发挥抗肿瘤作用。20世纪70年代，卡介苗首次作为治疗膀胱癌的膀胱灌注药物，有效地提高了免疫抗肿瘤活性，防止肿瘤复发。最近，纳米卡介苗和基因工程卡介苗因其能诱导更强且更稳定的免疫反应，被提出作为膀胱癌的治疗方案。在本研究中，我们概述了纳米卡介苗和基因工程卡介苗用于膀胱癌免疫治疗的发展，并回顾了它们的潜力和挑战。

关键词： 道德生物增强   康德   自我完善   不完全义务   道德能动性   基因美德工程  

摘要： 道德生物增强（moral bioenhancement,MBE）作为一种技术手段，可以干预、修复人类的道德心理、道德认知、道德情感，从而增强人的道德动机和道德能力。MBE通过消除人性之恶和增强人性之善达成自我完善，这与康德伦理学不谋而合。在康德伦理学视域中，MBE作为一种不完全义务之自我完善的自由选择，它不但没有损害人的尊严和自由，相反，MBE增强了人的理性行动能力，为道德行动者借助MBE从情感和认知弱点的支配中解放出来提供了辩护空间。但与此同时，MBE康德伦理学辩护也存在四个困境：道德生物增强的还原论困境，道德生物增强的自由悖论，道德生物增强对自我同一性的威胁，道德生物增强自我家长主义独断。在此基础上，通过MBE康德伦理学的实践场景想象，进而分析康德伦理学能否为体育竞赛增强和基因美德工程进行辩护，探讨超级生化运动员和制造更加具有德性后代的伦理复杂性。

关键词： 生物基因工程   医药领域   生物技术   DNA   分子生物学  

摘要： 近年来，在我国科学技术迅猛发展的同时，生物基因工程也在大力推广现代生物技术。作为现代生物技术的产物，生物基因工程在医药领域扮演着十分重要的角色，使医疗水平得到了极大提升，推动了医疗产业的发展，也为人们的健康生活提供了保障。本文首先对生物基因工程进行概述，其次总结了生物基因工程在医药领域的具体应用，并对生物基因工程应用的利弊进行了分析，最后对生物基因工程未来发展进行展望。

关键词： 抗菌肽   亚心型四爿藻   基因工程   海湾扇贝   大菱鲆  

摘要： 当前细菌感染已对水产养殖业构成了严重威胁,进而对全球食品安全造成了潜在的负面影响。长期以来,抗生素一直作为防治水产动物细菌性疾病的主要手段,但抗生素的滥用导致了细菌耐药性的急剧上升,对生态系统和人类健康形成了严重隐患。抗菌肽作为天然免疫系统的重要组成部分,且具有独特的抑菌机制和相对较低的诱发耐药性风险,被视为对抗水产养殖中细菌感染的理想替代策略。因此本研究旨在通过基因工程手段,实现具有显著抗菌性能的两种抗菌肽CATHPb1和AsCATH4的串联表达,并对所获得重组抗菌肽的生物活性、稳定性和在实际水产动物中的应用效果进行系统性验证,以探寻减少抗生素使用的有效策略。本论文主要研究内容如下: (1)采用融合PCR技术对经密码子优化的CATHPb1和As-CATH4编码基因进行序列融合,通过同源重组方法将融合基因CATHPb-As-CATH整合入表达载体p TS中。采用基因枪法将重组质粒p TS-CATHPb-As-CATH导入宿主生物——亚心型四爿藻,在含有草丁膦的筛选培养基上经过7代筛选后,得到多株可以正常生长的重组藻株。分别在基因水平和蛋白质水平对重组藻株进行检测,最终得到2株成功整合重组抗菌肽基因并实现高效表达的突变株CAD。 (2)通过测定重组藻株CAD的生长曲线并与野生型藻株进行比较后发现,外源抗菌肽的整合并未对其生长造成不良影响。随后对其可溶性总蛋白进行提取,经测定重组抗菌肽对多种病原微生物(金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、灿烂弧菌)在体外具有显著抑菌效果,并在模拟体内环境如酸性条件和酶解条件下对重组藻株CAD进行稳定性分析,确认其可以在水产动物消化道内稳定存在至吸收部位,因而具有实际应用潜力。 (3)设计动物实验,将重组藻株CAD按照一定比例分别添加到水产动物海湾扇贝和大菱鲆饲料中,喂养一段时间后对重组抗菌肽在水产动物体内的生物活性进行检测。分别对扇贝幼苗和大菱鲆进行微生物群落和免疫相关活性检测,结果显示重组抗菌肽经海湾扇贝和大菱鲆摄食后均能够改善肠道微生物组成,减少潜在致病菌的相对丰度,提高机体抗氧化活性,并能够调节免疫功能。最后对大菱鲆进行副溶血弧菌攻毒实验,结果显示摄食重组藻株CAD的大菱鲆存活率显著提高,且重组抗菌肽在肠道中表现出明显的抑菌效果,大菱鲆肠道组织形态也得到显著改善。 综上,本研究成功实现了抗菌肽CATHPb1和As-CATH4在亚心型四爿藻中的串联表达,并证实了所得重组抗菌肽具有显著的体外抑菌活性和良好的稳定性。进一步的生物活性验证结果显示,该重组抗菌肽在扇贝幼苗和大菱鲆幼鱼体内不仅能够改善肠道微生物组成,提高抗氧化活性,调节免疫功能,而且还表现出明显的体内抑菌效果,并有助于改善肠道组织形态。以上结果不仅表明抗菌肽可作为切实可行的抗生素替代途径,也为抗菌肽在水产养殖业及其他领域应用提供基础。