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关键词： 国家重点实验室   特种经济动物   分子生物学   吉林省   培育   优异种质资源   基因组学   动物学  

摘要： 总体定位 特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域，重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、

关键词： 生态修复   浮游动物   演变   生物学评价  

摘要： 通过对实施生态修复的围隔水体内的浮游动物的跟踪监测分析,试验前期原生动物有6种,轮虫有10种,枝角类1种,桡足类3种,浮游动物密度1736个/L,生物总量1.75mg/L。试验后期:原生动物有3种,轮虫7种,枝角类有5种,桡足类1种,浮游动物密度100个/L,生物总量0.418mg/L。原生动物、轮虫、桡足类种类下降,枝角类种类上升。浮游动物的密度下降了94.2%,生物下降了76.1%。试验水体从中营养型水体转变为贫营养型水体。

关键词： 国家重点实验室   特种经济动物   分子生物学   吉林省   培育   质量监督检验测试中心   中国农业科学院   畜禽遗传资源  

摘要： 杨福合，男，1957年8月生，研究员，博士生导师，现任中国农业科学院特产研究所所长，兼吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地主任、农业部特种经济动植物及产品质量监督检验测试中心主任、国家畜禽遗传资源委员会委员、

关键词： 雅鲁河   大型底栖动物   群落结构   水质  

摘要： 在呼伦贝尔市境内雅鲁河流域设置12个点位采集大型底栖动物进行调查研究并对水质状况进行生物学评价。共采集到底栖动物24种,隶属于8目22科,其中水生昆虫19种,占总数79.2%,各点位种类不丰富。各点位优势种不同,但基本都以对水质敏感类群和中等耐污类群为主。各点位密度和生物量差异较大,底栖动物平均密度为89~493ind/m2,平均生物量为0.42~11.69g/m2。调查区域大型底栖动物以集食者和捕食者种类较多,分别为6种;各功能摄食类群分布受空间资源位的限制。Shannon-Wiener多样性指数评价结果为上游点位水质为轻-中污染型,下游点位水质为中-重污染型,BI指数评价结果显示除南大河水质为中度污染外,其余点位水质均为清洁。

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学理论体系奠定坚实的基础,使我国特种经济动物分子生物学在整体水平上达到国际先进水平。

关键词： 紧张焦虑   基因表达数量性状基因座   盐皮质激素受体   过氧化物酶生源轮因子3   低密度脂蛋白受体11  

摘要： 目的通过探讨盐皮质激素受体(nuclear receptor subfamily 3,group C,member 2,Nr3c2)的基因调节通路以发现新的参与紧张焦虑调节的基因并在分子水平了解Nr3c2参与紧张焦虑调控的机理。方法1.本实验结合课题组前期产生的BXD RI小鼠的杏仁核组织和海马组织的全基因组基因表达资料,和BXD RI小鼠的基因型资料,应用基因表达数量性状基因座定位分析Nr3c2基因的上游表达调控位点。综合运用遗传相关性分析,生物信息学分析等方法寻找Nr3c2的上游候选基因,遗传高相关基因,初步构建Nr3c2的基因表达调控网络。2.通过细胞培养、si RNA干扰、质粒构建、q PCR以及统计学分析等,体外验证Nr3c2基因的调节通路中的部分基因与Nr3c2间的调控关系。3.构建慢性不可预测性焦虑小鼠模型,通过Western Blot、q PCR、免疫组化和免疫荧光染色技术等分子生物学及形态学方法验证上述网络中的部分基因是否参与紧张焦虑的发生。结果1.通过基因表达数量性状基因座定位等系统生物信息学方法,筛选目的基因Nr3c2的上游候选基因,并通过后续基因表达变化相关性分析等方法最终挑选过氧化物酶生源轮因子3(peroxisomal biogenesis factor 3,Pex3)和低密度脂蛋白受体相关蛋白11(low density lipoprotein receptor-related protein 11,Lrp11)两个基因进行验证。2.为了验证Nr3c2两个上游候选基因Lrp11和Pex3是否与紧张焦虑相关,通过构建慢性焦虑小鼠模型与正常对照组相比较,Lrp11在焦虑组蛋白表达水平及mRNA水平表达升高,Pex3基因表达下降与对照组相比具有统计学意义(P<0.05),提示Lrp11和Pex3两个基因都与焦虑应答相关。3.为了验证Nr3c2的上游调节通路,在人胚胎肾细胞293T和神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中,分别干预Lrp11和Pex3的表达并观察其对Nr3c2表达的影响。结果表明干预Lrp11后Nr3c2的表达未发生具有统计学意义的差异;干预Pex3后Nr3c2的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.本实验首次构建了Nr3c2的调节通路,为焦虑症的分子机制研究提供了新的依据。2.本实验的研究结果表明Pex3是焦虑应答的相关基因,并且是焦虑症公认基因Nr3c2的上游调控基因,在焦虑症的发生发展过程中起到重要作用。3.本研究通过分子生物学实验发现Lrp11虽然并非Nr3c2的直接调控基因,但却可能通过与Nr3c2的协同作用参与紧张焦虑的发生。本实验首次发现,Lrp11是焦虑应答相关基因,验证Lrp11的调控网络为研究焦虑应答生物学机制提供了新依据。

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   吉林省   省部共建   培育基地  

摘要： 杨福合,男,1957年8月生,研究员,博士生导师,现任中国农业科学院特产研究所所长,兼吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地主任、农业部特种经济动植物及产品质量监督检验测试中心主任、国家畜禽遗传资源委员会委员、国家特种畜禽品种审定专业委员会主任委员、中国畜牧业协会副会长兼鹿业分会执行会长、

关键词： 表皮生长因子   酿酒酵母   断奶SD大鼠   断奶仔猪   生物学活性  

摘要： [背景]猪表皮生长因子(porcine epidermal growth factor,p EGF)作为一种重要的乳源性生长因子之一,能够刺激哺乳动物的小肠DNA合成及细胞增殖,促进肠道发育,改善肠道菌群结构,从而提高其生长性能及免疫功能等。[目的]本研究分别构建INVSc1-IE(+)(胞内表达EGF蛋白)、INVSc1-EE(+)(胞外表达EGF蛋白)及INVSc1-TE(-)(含His标签EGF蛋白)三种不同表达形式的重组酵母菌,且比较分析不同表达形式EGF蛋白在断奶SD大鼠及仔猪的体内外生物学活性,对于研发一种更适用于畜牧生产及临床医学的基因表达方式具有重要意义。[方法](1)从内江猪乳腺组织中克隆EGF基因,在综合考虑酿酒酵母密码子使用频率和表达效率的基础上,人工合成sp EGF(TAA+),Mfα-sp EGF(TAA+)及sp EGF(TAA-)全基因,构建p YES2-sp EGF(TAA+),p YES2-Mfα-sp EGF(TAA+)及p YES2-sp EGF(TAA-)表达载体并在酿酒酵母中进行表达。对重组酿酒酵母INVSc1-IE(+)(胞内表达EGF蛋白),INVSc1-EE(+)(胞外表达EGF蛋白)及INVSc1-TE(-)(含His标签EGF蛋白)的三种表达蛋白进行Tricine-SDS-PAGE电泳、蛋白质免疫印迹。(2)比较分析不同表达形式EGF对SD大鼠肠上皮细胞的体外增殖活性:随机选取60只断奶SD大鼠分成6组(每组3栏,每栏3-4只)——空白对照组(Control group)、空载体组[INVSc1(EV)]、胞内表达EGF组[INVSc1-IE(+)]、胞外表达EGF组[INVSc1-EE(+)组]、含His的EGF组[INVSc1-TE(-)]以及阳性对照组(rh-EGF),进行动物饲养试验,饲喂16天后,测定其生长性能(如,日增重、日均采食量、饲料转化率等)、肠道发育(如,绒毛高度、隐窝深度、黏膜总蛋白、DNA及RNA含量),血液理化指标(如,肌酸激酶CK及乳酸脱氢酶LDH)及免疫功能(如,Ig A、Ig G及Ig M),同时采用体外培养及RT-PCR检测重组酵母在断奶SD大鼠小肠内的存活情况。(3)在以断奶SD大鼠为模型的基础上,进一步比较分析不同表达形式EGF蛋白对猪肠上皮细胞体外增殖活性——选取120只21日龄断奶的仔猪,分成5组(每组4栏、每栏6只):对照组、空载体[INVSc1(EV)]组、INVSc1-IE(+)组、INVSc1-EE(+)组及INVSc1-TE(-)组,进行动物饲养试验,饲喂21天后,测定其生长性能(如,日增重、日均采食量及饲料转化率等)、肠道发育(如,绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度、黏膜总蛋白、DNA及RNA含量)、增殖细胞核抗原的免疫组化(PCNA)、血液理化指标(如,肌酸激酶CK、碱性磷酸酶ALP及乳酸脱氢酶LDH)及免疫功能(如,Ig A、Ig G及Ig M),同时采体外培养及RT-PCR检测重组酵母在断奶仔猪小肠内的存活情况。(4)在断奶仔猪的21天试验中,分别取不同处理组的断奶仔猪在0、7、14及21天的粪便,以变性梯度凝胶电泳(DGGE)检测技术测定其16S r DNA的V3区菌群,全收粪测定饲粮养分表观消化率(如,粗蛋白、粗脂肪、粗纤维及总能等)。(5)测定不同处理组断奶仔猪的十二指肠、空肠和回肠粘膜中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、蔗糖酶(Sucrase)及碱性磷酸酶(ALP)酶活性,采用荧光定量PCR检测CK、LDH、Sucarase、ALP和EGF-R基因的m RNA表达水平。[结果](1)根据RT-PCR和测序结果显示,成功地构建了p YES2-sp EGF(TAA+)、p YES2-Mfα-sp EGF(TAA+)和p YES2-sp EGF(TAA-)三种不同表达形式的载体,并在酿酒酵母中成功表达。在Tricine-SDS-PAGE电泳及蛋白质免疫印迹中可以分别观察到目的条带及印迹条带,且在纯化定量分析中,重组酿酒酵母INVSc1-IE(+)、INVSc1-EE(+)及INVSc1-TE(-)菌液中目的蛋白表达量均为30mg·L-1。(2)SD大鼠的体外生物学活性检测结果显示,胞内和胞外表达EGF蛋白较含His标签EGF蛋白对鼠肠上皮细胞的增殖作用更显著(P<0.05);断奶SD大鼠体内生物学活性检测的结果证实,胞内EGF蛋白、胞外EGF蛋白以及含His标签EGF蛋白较对照组和空载体组能显著地促进其小肠发育(如绒毛高度、隐窝深度、小肠粘膜总蛋白、总DNA及RNA含量)(P<0.01),且也显著提高其生长性能(如日增重及饲料转化率)(P<0.05),降低血液中肌酸激酶及乳酸脱氢酶含量(P<0.05),增

关键词： 特种经济动物   分子生物学   吉林省   国家重点实验室   遗传资源   种质资源   中国农业科学院   省部共建   EA  

摘要： 杨福合,男,1957年8月生,研究员,博士生导师,现任中国农业科学院特产研究所所长,兼吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地主任、农业部特种经济动植物及产品质量监督检验测试中心主任、国家畜禽遗传资源委员会委员、国家特种畜禽品种审定专业委员会主任委员、中国畜牧业协会副会长兼鹿业分会执行会长、

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   吉林省   培育基地   省部共建  

摘要： 杨福合,男,1957年8月生,研究员,博士生导师,现任中国农业科学院特产研究所所长,兼吉林省特种经济动物分子生物学重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地主任、农业部特种经济动植物及产品质量监督检验测试中心主任、国家畜禽遗传资源委员会委员、国家特种畜禽品种审定专业委员会主任委员、中国畜牧