关键词:
肺孢子菌
动物模型
病原检测
PCR检测
摘要:
目的建立肺孢子菌动物模型,并对肺孢子菌病原学和分子生物学检测技术进行研究。方法 SD和Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠皮下注射地塞米松,对照组皮下注射生理盐水。诱导8周后处死全部大鼠,收集其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,分别做涂片和肺印片,染色后镜检。用FTA卡采集所有大鼠的BALF进行PCR检测。对PCR产物进行测序,利用BLAST软件将测序结果与Gen Bank数据库中的鼠源性肺孢子菌进行比对,确定菌种。结果共采集肺组织标本和BALF各34份,病原学检测显示实验组总感染率为29.2%(7/24),对照组感染率为0;其中SD和Wistar大鼠实验组感染率分别为25.0%(3/12)和33.3%(4/12),差异无统计学意义(P=0.31);实验组SD大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别为25.0%(3/12)和16.7%(2/12),差异无统计学意义(P=0.34)。实验组Wistar大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别33.3%(4/12)和16.7%(2/12),差异无统计学意义(P=0.24)。用PCR方法共检测28份大鼠BALF样本,实验组阳性检出率为91.7%(26/28),对照组均为阴性。对PCR产物进行测序分析,发现其与Gen Bank已登录的大鼠源肺孢子菌(JX499145、GU133622、EF646865)的同源性均为100%。结论通过皮下注射地塞米松可以建立肺孢子菌动物模型,SD大鼠与Wistar大鼠在作为肺孢子菌动物模型的选择上无显著差别。在早期感染阶段,适宜用PCR法进行肺孢子菌检测,病原形态学检测漏检率高。