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关键词： WATER-OXIDATION PATHWAY   DNA-BREAKING ACTIVITY   DOUBLE-STRAND BREAKS   AMINO-ACID MIXTURES   HYDROGEN-PEROXIDE   MOLECULAR-OXYGEN   LIPID-PEROXIDATION   SPERMINE OXIDASE   NITRIC-OXIDE   METABOLIC SYNDROME  

摘要： Recent studies have shown that exposing antibodies or amino acids to singlet oxygen results in the formation of ozone (or an ozone-like oxidant) and hydrogen peroxide and that human neutrophils produce both singlet oxygen and ozone during bacterial killing. There is also mounting evidence that endogenous singlet oxygen production may be a common occurrence in cells through various mechanisms. Thus, the ozone-producing combination of singlet oxygen and amino acids might be a common cellular occurrence. This paper reviews the potential pathways of formation of singlet oxygen and ozone in vivo and also proposes some new pathways for singlet oxygen formation. Physiological consequences of the endogenous formation of these oxidants in human tissues are discussed, as well as examples of how dietary factors may promote or inhibit their generation and activity.

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学理论体系奠定坚实的基础,使我国特种经济动物分子生物学在整体水平上达到国际先进水平。

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学理论体系奠定坚实的基础,使我国特种经济动

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学

关键词： 白颊长臂猿   肺炎克雷伯菌   细菌鉴定   生物学特性   致病性  

摘要： 实验主要以华东某动物园一只急性死亡雌性白颊长臂猿为研究对象,通过剖检,肉眼观察死亡动物内脏各器官病理变化,包括体积大小、是否有出血点、出血斑、实质性病变等。并取心、肺、肝进行切片制作,采用苏木精-伊红染色法染色后进行光学镜检,观察急性死亡长臂猿各脏器的组织病理变化。分离菌株进行微生物学鉴定:采用VITEK-2细菌生化鉴定仪配合细菌微量生化鉴定管分析细菌的代谢反应,包括对碳源和氮源的利用,半固体培养基中的动力实验、氧化酶实验等。观察其在需氧、微需氧及厌氧条件下,2%牛血清胰蛋白大豆琼脂培养基(2%牛血清TSA)上的生长状态,鉴别/选择培养基上的菌落形态特征;利用VITEK-2 GN13药敏卡分析该菌对不同抗生素的最小抑菌浓度,观察是否出现耐药。分离菌株的遗传物质鉴定:利用PCR技术扩增菌株16Sr DNA,进行产物测序及比对,分析菌株的同源性。分离菌株的致病力测定:采用腹腔注射、皮下注射以及肌肉注射三种途径感染小鼠,记录细菌感染后小鼠的精神状态、体重变化、存亡曲线;小鼠死亡后剖检,观察不同器官的病理变化。结论:(1)解剖急性死亡白颊长臂猿尸体,从实质性器官病变及病理组织切片角度观察。心脏表面光滑,右心室附壁血栓,心肌间质充血水肿,内膜局灶增厚,内膜下心肌纤维化,伴附壁血栓形成。肺部表面灰白色,切面红褐色,局部支气管旁动脉内见血栓栓塞,肺泡壁毛细血管扩张充血,肺泡融合;肝被膜完整,肝小叶结构正常,中央静脉和肝窦扩张淤血。其他实质性器官无明显的临床病理病变,且淤血均发生在呼吸循系统,推定肺血栓栓塞导致的急性呼吸循环衰竭是导致死亡的直接原因。(2)心血中分离的肺炎克雷伯菌经VITEK-2 COMPACT系统生化鉴定为肺炎亚种,确定概率为95%;补充生化鉴定结果均符合肺炎克雷伯菌肺炎亚种的生化特性;该菌在2%牛血清TSA上划线接种,微需氧及需氧条件下细菌生长旺盛,而厌氧条件下生长相对较弱;在鉴别培养基及肠杆菌科选择培养基上能观察到特征菌落;VITEK-2 COMPACT系统配合AST-GN13药敏卡实验结果为ESBLs(-),即该菌不产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases),对氨苄青霉素耐药。(3)分离培养纯化肺炎克雷伯菌,设计PCR反应条件及程序,PCR纯化产物进行16SrDNA测序比对的结果与GeneBank上报道的肺炎克雷伯菌有高同源性,为99.3%。(4)高浓度菌液(约2.0×1010 CFU/mL)腹腔感染小鼠100%死亡,肌肉注射组与皮下注射组未见死亡。死亡小鼠剖检发现其脾脏、胸腺、肺脏都有不同程度肿大,肺脏充血,表面有出血点,肝脏颜色变深表面也有出血点。小鼠对不具有荚膜、低于3.0×108CFU/mL浓度的肺炎克雷伯菌耐受,因此在耐受期后,小鼠体重开始上升,且与生理盐水组体重变化率增幅相似。

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学理论体系奠定坚实的基础,使我国特种经济动物分子生物学在整体水平上达到国际先进水平。通过实验室建设,培养一支具有国际竞争力的创新团队,建设一个具有国际水平的特种经济动物创新基地,

关键词： 肌肉卫星细胞   肌腱干细胞   生物学特性研究   多分化潜能   肌肉损伤   肌腱损伤   细胞治疗  

摘要： 运动损伤主要包括肌肉组织部位的拉伤、扭伤和挫伤,以及肌腱和韧带损伤。这些损伤不仅会影响身体健康而且阻碍日常生活与工作,当前医学领域中干细胞治疗的出现使得治疗相关疾病被寄予厚望。本研究旨在建立骨骼肌卫星细胞与肌腱干细胞的体外扩增培养体系,并探索其细胞增殖、分化等生物学特性及其在肌肉损伤模型与肌腱损伤模型移植后体内迁移情况,得到结论如下:1.采用机械分离法与酶消化法,成功分离获得肌肉卫星细胞和肌腱干细胞,分离后的两种细胞传代培养后增殖能力强,其中肌肉卫星细胞传至27代,肌腱干细胞传至38代,此外经冻存后复苏的细胞仍具有较高的活性。2.通过RT-PCR、免疫荧光以及流式细胞仪对细胞相关特异性基因和表面标记物进行检测,结果显示肌肉卫星细胞中Desmin、Pax7、c-Met、Myf5、Myo D,肌腱干细胞中collagen I,collagen III,CD44,Nucleostemin和Tenascin-C等特异性基因及表面抗原均呈阳性表达,表明所分离的细胞分别具有肌肉卫星细胞和肌腱干细胞的特性,此外对分离的两种细胞进行生长曲线和克隆形成能力、核型分析等生物学特性鉴定,表明细胞具有较强的增值能力并且无染色体突变,以此保证本实验获取两种干细胞可用于细胞库的构建及日后相关研究的使用。3.为鉴定肌肉卫星细胞的多分化潜能特性,在体外将肌肉卫星细胞分别向成肌细胞、成脂肪细胞、和成骨细胞进行诱导,而肌腱干细胞则向成脂细胞、成骨细胞及软骨细胞进行诱导并对诱导结果进行鉴定,结果表明:肌肉卫星细胞在向成肌细胞诱导7天后形态明显发生变化,通过免疫组化对fast skeletal myosin抗体进行染色结果呈阳性,RT-PCR检测成肌相关基因Myo G与fast skeletal myosin均阳性表达;肌腱干细胞向软骨细胞诱导软骨球形态明显,阿利新蓝染色成阳性,RT-PCR相关基因Collagen II,SOX9和ACAN均表达;此外两种细胞在向成脂和成骨细胞诱导时均获得成功,利用脂肪诱导液对肌肉卫星细胞进行成脂诱导,21天后油红O染色可见到红色脂滴,RT-PCR检测到脂肪细胞特异性分子标记LPL和PPAR-γ阳性表达;肌肉卫星细胞在成骨诱导液中诱导4周后进行茜素红染色呈阳性,RT-PCR检测到成骨细胞特异性分子标记Collagen I,OPN,Run X2和ALP阳性表达;以上研究表明肌肉卫星细胞在体外培养的过程中具有多分化潜能特性。4.分别采用心脏毒素(Cytotoxin,CTX)和胶原酶构建小鼠肌肉损伤模型与肌腱损伤模型,H&E(Hematoxylin-Eosin Staining,)染色显示肌肉和肌腱组织正常结构均被破坏,血清检测发现CK均明显超出正常范围表明建模成功。对肌肉卫星细胞进行CM-Dil细胞示踪剂标记,将标记的细胞直接注射到小鼠肌肉损伤位点,荧光显微镜下可见组织中分布标记的细胞,血清检测显示干细胞移植组CK值与损伤组和生理盐水组相比有所降低,研究结果表明,对两种模型进行干细胞移植后可在三周内稳定的迁移到相应组织中对损伤可能具有一定的作用。综上所述,本实验在体外成功分离培养了肌肉卫星细胞与肌腱干细胞,并对其生物学特性和多分化潜能进行了研究,通过体外小鼠肌肉损伤模型移植,肌肉卫星细胞移植后可在三周内稳定的迁移到相应组织中,对小鼠肌肉损伤具有一定的恢复作用,并初步为以干细胞为基础的细胞疗法治疗损伤、促进组织再生修复的临床应用提供实验依据。

关键词： 多位点序列分型   沙门菌   毒力基因   血清型   耐药性   耐药基因  

摘要： 沙门菌属是肠杆菌科中的一个大属,血清型繁多,是危害人类与畜禽的一类重要病原菌。近年来,沙门菌污染畜禽产品的问题已引起养殖人员及公共卫生界的极大重视。近年来随着抗生素的使用甚至滥用,使得沙门菌的耐药性越来越严重,对养殖业构成极大的威胁。本试验先后从山东省不同地市采集不同动物源的样品,通过选择培养基、革兰氏染色和29,.分离沙门菌,并做生化试验查看其生化特性。通过玻片凝集试验,确定分离株的血清型。通过微量肉汤稀释法对分离的沙门菌进行多种药物的药敏试验,来检验其耐药性,同时检测分离菌株的2:种耐药基因的存在情况。测定沙门菌常见的四种毒力基因,了解分离沙门菌毒力基因的变异特点。通过多位点序列分型技术对分离株进行分型,了解沙门菌的基因序列型。通过鉴定总共分离获得了:;株鸡源沙门菌、89株鸭源沙门菌和=株猪源的沙门菌。不同动物源沙门菌血清型实验结果为:鸡源检出6种血清型,其中血清型为肠炎沙门菌最多,占88.5%;鼠伤寒沙门菌占1.3%;山夫登堡沙门菌占1.3%;印第安纳沙门菌占5.1%;汤卜逊沙门菌占2.6%;阿格玛沙门菌占1.3%。鸭源检出2种血清型,其中血清型为肠炎沙门菌最多,占67.9%;鼠伤寒沙门菌占32.1%。猪源共检测出3种血清型,其中血清型为鼠伤寒沙门菌最多,占65%;肠炎沙门菌占15%;德贝儿沙门菌占20%。通过MLST技术,鸡源检出7种ST型:ST11、ST19、ST26、ST128、ST14、ST17和New1,鸭源检出3种ST型:ST11、ST19和New2,猪源检出3种:ST34、ST40和ST3007,整体来看,分离菌的血清型和ST型数量比较接近,二者分型能力相近。通过药敏试验,鸡源菌株中,氨苄西林和多粘菌素的耐药率最高,达到了;=>以上,对环丙沙星和头孢噻呋的耐药率也达到了8<"=>和8:":>。鸭源菌株中,对环丙沙星和多粘菌素耐药率为2==>,恩诺沙星为;3"<>,对多西环素、庆大霉素和新霉素耐药率高于9=>。猪源菌株中,对多西环素的耐药率最高为<8>,其次为氨苄西林为;=>和氟苯尼考为48>,在统计学分析中发现,不同动物源之间的耐药率差异显著现象普遍存在。耐药基因中的*和*%在三种动物源中检测中均高于:=>,其次是四环素类的耐药基因,在鸭源菌中为4"<>,在其他两种动物源中均高于8=>,β'内酰胺类的耐药基因!)的检出率在三种动物源中均高于3=>,此外?、53@7'?、%、*和*基因在三种动物源中的检出率为零,但三种动物源耐药基因检出率差异显著的情况比较少。毒力基因检测发现四种毒力基因同源率很高,但部分存在碱基突变,猪源均未发生变异。/基因:鸡源和鸭源主要有两个位点发生变异,但在氨基酸水平上并没有发生变异。基因:仅鸡源在两个位点发生变异,氨基酸比对发现,在碱基2<<位的变异导致了氨基酸改变。!基因:仅鸡源发生了四处碱基位点变异,突变均在开放阅读框内,并没有发生氨基酸水平上的变异。/基因序列没有发现碱基变异。本实验从多个层面分析了不同动物源的沙门菌的特性,从而使得我们对山东省部分地区不同动物源沙门菌有了初步认识,有助于更好地防治该菌引起的感染,从而有针对性的做出预防对策。

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学理论体系奠定坚实的基础,使我国特种经济动物分子生物学在整体水平上达到国际先进水平。通过实验室建设,培养一支具有国际竞争力的创新团队,建设一个具有国际水平的特种经济动物创新基地,

关键词： 特种经济动物   SKLMBSEA   分子生物学   国家重点实验室   省部共建   培育基地   吉林省  

摘要： 总体定位特种经济动物分子生物学省部共建国家重点实验室紧紧围绕国家重大需求和国际动物学科发展的方向与前沿研究领域,重点开展特种经济动物优异种质资源基因组学、特种经济动物分子育种学、特种经济动物分子调控、特种经济动物组织细胞工程、特种经济动物特有的生物学特性等研究,为建立特种经济动物分子生物学