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关键词： 细胞生物学   胞外囊泡   细胞治疗   创面修复   细胞递送  

摘要： 细胞治疗包括以活细胞为基础的治疗手段和以细胞外囊泡及生物活性分子为主的细胞衍生物治疗方法。细胞治疗作为近年研究热点,是解决难愈创面修复这一临床难题的潜在可行策略。材料科学和细胞生物学的快速发展拉开了细胞治疗的新序幕,同时也提出了如何进一步优化细胞治疗并将其应用于创面修复的新命题。该文回顾了用于创面治疗的细胞类型,汇总了基于细胞治疗新技术的应用和探索,梳理了现有细胞治疗临床应用的困境,并展望了创面修复中细胞治疗的发展趋势,以期促进创新性细胞治疗体系的发展,进一步提高创面临床治疗效果。

关键词： 细胞生物学   实用方法   技术   原理   策略  

摘要： 本文综述了细胞生物学中多种实用方法与技术的应用及其在科学研究中的重要性。首先,对于细胞生物学实用方法,深入探讨了荧光显微镜技术、流式细胞术、基因编辑技术、原位杂交技术等,详细描述了细胞生物学使用方法与技术的的原理、技术步骤、应用领域以及未来发展趋势,在此基础上讨论了细胞生物学应用技术的概念与特点,包括膜电位记录、钙成像、细胞摄像、膜片钳等技术的应用,突显了这些技术在揭示细胞功能和行为方面的重要作用,分析细胞生物学实用方法与技术实际应用的策略,旨在为细胞生物学实用方法与技术的合理应用提供必要的指导。

关键词： β-葡聚糖   树突状细胞   免疫功能  

摘要： 目的研究在不同诱导条件下β-葡聚糖对小鼠骨髓树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells, BMDCs)活化和功能的影响。方法取小鼠胫骨和腓骨的骨髓在体外分别用FMS样酪氨酸激酶3配体(FMS-like tyrosine kinase 3 ligand, Flt-3L)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)和IL-4诱导成FL-DCs、GM-DCs, 经全葡聚糖颗粒(whole glucan particles, WGP)刺激后, 流式细胞术分析FL-DCs和GM-DCs表面分子CD40、CD80、MHCⅠ、MHCⅡ、CD8α、CD11b的表达;ELISA检测细胞上清液中IL-12p40、TNF-α、IL-6、IL-10的含量;实时荧光定量PCR检测各细胞因子及趋化因子受体的mRNA水平;OT-Ⅰ、OT-Ⅱ小鼠经磁珠分选试剂盒分选出CD8+、CD4+T细胞, 加入特异性抗原卵清蛋白(ovalbumin, OVA)与FL-DCs、GM-DCs共培养, 流式细胞术检测T细胞的增殖分化情况。结果经WGP刺激后, FL-DCs和GM-DCs中CD40、CD80、MHCⅠ、MHCⅡ、CD8α的表达均显著上调(P<0.05);细胞因子IL-12p40、TNF-α的分泌显著增多(P<0.05), 而IL-6、IL-10含量在FL-DCs、GM-DCs间存在差异;实时荧光定量PCR结果显示, WGP促进GM-DCs中趋化因子受体CXCR5和CCR7的表达(P<0.001和P<0.01), FL-DCs中CCR7的改变更为显著(P<0.000 1);在两种不同的培养方式中, WGP均能促进CD4+T细胞产生更多的IFN-γ和IL-17α(P<0.05)。结论 WGP可诱导BMDCs的成熟, 提高BMDCs对效应T细胞的活化能力, 且可促使不同诱导来源的BMDCs向不同的Th细胞分化。

关键词： 布加综合征   血管血友病因子   人脐静脉内皮细胞  

摘要： 目的:探讨过表达血管性血友病因子(vWF)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移、侵袭、凋亡及成管能力的影响。方法:设计构建5种过表达vWF的质粒CRISPRa载体,将HUVECs分为实验组(5组)与对照组。将5种质粒分别转染实验组细胞,Western blotting检测各组细胞vWF的表达效果,选取优势组。通过细胞增殖实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验、细胞凋亡实验、细胞成管实验等,观察过表达vWF对HUVECs增殖、迁移、侵袭、凋亡及成管能力的影响。Western blotting检测5个常见通路蛋白因子在2组细胞中的表达,探测可能相关的机制。结果:成功转染后各组HUVECs的vWF蛋白表达水平均明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中vWF-OE4组过表达量最高,故选取该引物序列进行后续实验。与对照组相比,vWF-OE组细胞增殖减慢,细胞划痕48 h迁移率降低、Transwell细胞侵袭率降低(P<0.05),细胞凋亡率、血管形成能力、HUVECs生成小管的长度均增高(P<0.05),JUN、P53蛋白含量均增高(P<0.05)。结论:过表达vWF对HUVECs增殖、迁移、侵袭行为具有显著抑制作用,促进凋亡,成管能力增强。

关键词： B细胞κ轻肽基因增强子抑制因子   核苷酸结合结构域受体家族含CARD结构域-5   核因子κB   胃癌   细胞生物学功能   临床诊断价值  

摘要： 目的:探究IKBKB基因在胃癌细胞中的表达水平与NLRC5、NF-κB的作用关系,明确其对胃癌细胞生物学功能影响。方法:采用pLenti-IKBKB-sgRNA基因敲除质粒直接对人胃癌SGC-7901细胞系进行转染,应用免疫印迹试验(western blot,WB)检测单克隆细胞株中IKBKB基因敲除的效果,以及NLRC5、NF-κB的表达水平。划痕实验和Transwell迁移实验检测单克隆细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。成瘤实验观察单克隆细胞对瘤体生长的影响。在临床胃癌组织和癌旁组织中采用免疫组化染色评估NLRC5、NF-κB、IKBKB的表达状态。明确IKBKB与NLRC5、NF-κB的相关性以及临床诊断价值。结果:敲除IKBKB基因后人胃癌SGC-7901细胞中NLRC5、NF-κB的表达水平显著降低,细胞迁移和侵袭能力减弱。细胞发生G1期阻滞,降低了SGC-79013细胞增殖能力,细胞总凋亡率显著上升。IKBKB敲除后NLRC5、NF-κB表达水平下调影响瘤体的生长发育。NLRC5、NF-κB、IKBKB在胃癌组织中表达水平高于癌旁组织,NLRC5、NF-κB与IKBKB的表达水平呈正相关。IKBKB、NLRC5、NF-κB三者联合诊断胃癌AUC为0.921(0.876~0.967)。结论:IKBKB在胃癌细胞与NLRC5、NF-κB存在相关作用关系,协同促进胃癌的发生和发展。

关键词： 玫瑰精油   皮肤成纤维细胞   衰老   增殖   迁移  

摘要： 文章旨在探究不同浓度玫瑰精油对D-gal诱导的皮肤成纤维细胞衰老的影响。设立空白对照组、D-gal组、D-gal+玫瑰精油组。用β-gal染色检测阳性细胞数目、EdU-594染色检测细胞增殖能力和划痕实验检测细胞迁移能力。β-gal染色结果显示,D-gal+玫瑰精油组与对照组(D-gal组)比较,衰老染色阳性细胞数减少(p<0.001);EdU-594染色结果显示,与对照组相比,D-gal+玫瑰精油组增殖细胞数增多(p<0.01);细胞迁移实验结果显示,D-gal+玫瑰精油组细胞迁移率增加(p<0.001)。可见,玫瑰精油可以减少D-gal模型中细胞衰老数目,提高皮肤成纤维细胞的增殖能力,增加皮肤成纤维细胞的迁移能力。

关键词： 癌症易感性基因15   miR-144-3p   富含亮氨酸的重复序列蛋白1   肝癌细胞   细胞生物学功能  

摘要： 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)癌症易感性基因15(Cancer susceptibility candidate 15,CASC15)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的分子调控机制。方法通过生物信息学方法预测目的基因表达,并分析目的基因表达与患者生存时间的关系;收集临床HCC患者肝癌组织和癌旁组织;CCK-8、Transwell和流式细胞术实验检测HCC细胞SMMC7721和Huh-7的增殖、侵袭、迁移以及凋亡;双荧光素酶实验检测miR-144-3p与CASC15和富含亮氨酸的重复序列蛋白1(Leucine rich repeat containing protein 1,LRRC1)的靶向关系;qRT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达情况;免疫荧光实验用于蛋白定位研究;回复实验验证CASC15/miR-144-3p/LRRC1对HCC进展的影响。体内实验验证CASC15对HCC进展的影响。结果TCGA数据库与qRT-PCR检测显示HCC组织和细胞中CASC15高表达、miR-144-3p低表达、LRRC1高表达(P<0.05)。增殖、侵袭、迁移的细胞功能实验结果表明在肿瘤发展中CASC15和LRRC1起到促进作用,miR-144-3p则是抑制作用,与凋亡实验结果一致(P<0.05)。细胞功能实验表明CASC15抑制miR-144-3p功能,miR-144-3p抑制LRRC1,CASC15与miR-144-3p结合,并导致LRRC1上调。回复实验结果表明CASC15通过抑制miR-144-3p促进LRRC1的表达从而促进HCC细胞增殖、侵袭和迁移并抑制细胞凋亡。结论CASC15可能通过调节miR-144-3p/LRRC1轴,从而促进HCC进展。

关键词： 中药资源学   药物基因组学   原创性研究   研究与发展   中药化学   细胞生物学   蛋白质组学   分子生物学  

摘要： 中药资源是支撑我国中医药体系的物质基础,是独特的卫生资源、潜力巨大的经济资源、原创优势的科技资源、优秀的文化资源以及重要的生态资源,是国家重要的战略资源,需要保护好、发掘好、发展好、传承好。为推动中医药传承与发展,促进中药资源学术研究与发展,《上海中医药大学学报》拟开设中药资源专栏。该专栏由陈万生教授领衔,在传统中药研究的基础上,探讨生物技术在中药资源学中的应用。本专栏将通过审慎而全面的同行评议,对生资源学、中药化学、分子生物学、细胞生物学、药物基因组学、蛋白质组学等学科或领域,征集原创性研究和前沿述评。

关键词： 神经元死亡   环鸟苷酸   神经疾病   溶酶体   细胞生物学   功能障碍   团队合作   科创中心  

摘要： 2024年1月22日,《自然·细胞生物学》(Nature Cell Biology)在线刊登了浙江大学生命科学研究院徐平龙教授、转化医学研究院沈承勇教授、科创中心李欣然研究员的合作成果“Innate immune sensing of lysosomal dysfunction drives multiple lysosomal storage disorders”(DOI:10.1038/s41556-023-01339-x)。研究聚焦环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)天然免疫机制在识别和应答溶酶体损伤中的核心功能,鉴定了神经元中存在显著激活的cGAS-STING机制及其驱动体内神经元死亡和神经疾病发生的关键功能,揭示其驱动多种溶酶体贮积症(LSD)发病的机制,并提出了一种通用的治疗LSD新策略。

关键词： 细胞生物学   铸魂育人   教学改革   案例  

摘要： 为了充分发挥课程在人才培养中的核心作用,进一步提升综合育人水平,更好地促进学生全面发展、健康成长,在“铸魂育人”的新时代背景下,课程团队通过深入探索、提炼细胞生物学知识体系中的思想价值和科学内涵,将育人要素有机地融合到课程建设中,以期实现知识传授和价值引领的人才培养目标,为创新型和应用型人才的培养提供重要参考。