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关键词： 医学研究中心   细胞生物学   科技日报   研究成果   单个细胞   纳米结构   成果发表   《细胞》  

摘要： 科技日报柏林3月16日电,近日德国分子医学研究中心(MDC)的研究人员发现,纳米结构域构成独立的信号单元是单个细胞可以同时处理成百上千个信号的原因。研究者认为该研究成果将开辟一个全新的细胞生物学研究领域。相关研究成果发表在《细胞》杂志上。

关键词： 鼻咽癌   miR-383-3p   细胞增殖   迁移   凋亡   AQP5   CREB  

摘要： 目的:探讨miR-383-3p对鼻咽癌6-10B细胞功能的影响及其可能作用的靶基因。方法:采用脂质体介导法将miR-383-3p模拟物(miR-383-3p mimic)、miR-383-3p抑制物(miR-383-3p inhibitor)以及对照模拟物(NC)转染6-10B细胞,MTT法检测各组6-10B细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI双染法检测各组6-10B细胞的凋亡情况,Transwell实验检测各组6-10B细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验确定miR-383-3p与高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)的靶向作用情况,qRT-PCR检测不同鼻咽癌细胞中miR-383-3p及各组6-10B细胞中miR-383-3p和HMGA2 mRNA表达水平,Western blot检测各组6-10B细胞中水通道蛋白5(aquaporins 5,AQP5)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)、p-CREB以及HMGA2蛋白表达水平,免疫荧光染色检测各组6-10B细胞中AQP5和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的荧光强度。结果:与NP69细胞相比,miR-383-3p在鼻咽癌细胞CNE1、CNE2、HONE1、HNE-1、C666-1、6-10B中的表达量均明显下降(P<0.05或P<0.001);与NC组相比,miR-383-3p mimic组能够显著抑制鼻咽癌6-10B细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡(P<0.05),而miR-383-3p inhibitor组6-10B细胞增殖和迁移能力明显升高,细胞凋亡水平则明显下降(P<0.05);HMGA2是miR-383-3p的靶基因,与NC组相比,miR-383-3p mimic组HMGA2 mRNA和蛋白的表达水平下降(P<0.05),而miR-383-3p inhibitor组明显升高(P<0.05);与NC组相比,miR-383-3p mimic组AQP5和p-CREB蛋白表达量明显升高(P<0.05),而miR-383-3p inhibitor组明显下降(P<0.05);与NC组相比,miR-383-3p mimic组AQP5荧光信号较强,而NF-κB荧光信号较弱,miR-383-3p inhibitor组检测结果与此相反。结论:miR-383-3p可能通过负调控HMGA2的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移,进而促进鼻咽癌细胞凋亡,该作用可能与AQP5/CREB途径的信号通路有关。

关键词： 生物材料   细胞行为   电纺丝   3D   打印材料   细胞骨架  

摘要： 细胞生物学实验是高等院校生物类相关专业的专业必修课程。有效提高教学质量,培养学生科学探究的综合能力,一直都是细胞生物学实验课程内容改革的目标。该实验内容从科研项目转化而来,实验选用电纺丝及3D打印材料为介质,通过标记细胞骨架及细胞核等方法,探讨生物材料对哺乳动物细胞行为的影响。教师采用线上线下混合式教学方法,鼓励学生在基础实验方案上添加自主实验设计。通过该实验的学习,学生不仅获取了对应的知识及技能点,而且通过自主实验设计、实施与结果分析,激发了学生探究兴趣,培养了学生提出问题、分析问题、解决问题的科学探究综合能力。该实验难易程度适中、可操作性强,适合在不同高校细胞生物学实验教学中推广。

关键词： 干细胞生物学   新的认识   科学认识   二代测序技术   血液病   临床   困惑  

摘要： 基于二代测序技术定义的克隆性造血概念为血液病临床诊治带来了许多新的认识, 也引起很多不解和困惑。本文从干细胞生物学角度来科学阐述克隆性造血及其临床问题。

关键词： 课程思政   专业课程   细胞生物学  

摘要： 针对课程思政如何在专业课程上开展和推进,以细胞生物学专业课作为研究对象,制订整体目标和实施思路,实现课程思政贯穿专业课程教育教学的全过程,方案和举措实用性强,适用于理工农医等各专业课程的推广。

关键词： 胃肿瘤   Kelch样家族成员7   细胞增殖   细胞凋亡   细胞运动  

摘要： 目的:研究沉默Kelch样家族成员7(kelch like family member 7,KLHL7)基因表达对人胃癌细胞生物学表型(细胞增殖、凋亡及迁移)的影响,及可能的作用机制。方法:采用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析数据库(The University of Alabamaat Birmingham Cancer Data Analysis Portal,UALCAN)和基因表达谱交互分析数据库(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)分析KLHL7基因在人胃癌和癌旁组织中的差异表达以及与胃癌患者临床病理特征之间的关系,并采用Human Protein Atlas和Kaplan Meier法分析KLHL7基因异常表达对胃癌患者总生存期的影响。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测KLHL7在正常胃黏膜上皮细胞与不同分化胃癌细胞中的表达水平,随后用慢病毒感染的方法将携带有的shKLHL7的慢病毒载体转入胃癌细胞HGC-27和MKN45,使KLHL7基因沉默表达,再用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测沉默效率。MTT法检测细胞增殖能力,细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞的迁移及侵袭能力,FCM法检测细胞周期及凋亡率,最后用蛋白质印迹法检测细胞周期、凋亡、上皮-间质转化及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)通路相关蛋白的表达情况。采用BALB/c裸鼠构建转入shKLHL7的胃癌MKN45细胞的移植瘤模型,观察肿瘤在体内的生长情况,并使用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法验证目的基因KLHL7的表达情况。结果:生信分析结果提示,KLHL7基因在人胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。KLHL7高表达者的总生存期明显短于低表达者(P<0.05),且KLHL7高表达与胃癌患者的分级、分期、幽门螺旋杆菌感染、临床病理组织亚型及淋巴结转移等密切相关。KLHL7在各组胃癌细胞中mRNA和蛋白的表达水平均高于正常胃黏膜上皮细胞GES-1(P均<0.05)。沉默KLHL7基因表达后,细胞增殖、侵袭和迁移能力明显降低(P<0.05),凋亡率提高(P<0.01),p21、Bax和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平升高,而周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)、CDK6、Bcl-2、波形蛋白(vimentin)、PI3K、AKT、磷酸化的PI3K和AKT表达水平下调(P均<0.05)。体内研究提示,KLHL7沉默后小鼠肿瘤体积和质量均明显降低(P均<0.01),实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测结果表明,shRNA-KLHL7可使组织内KLHL7表达明显下调(P均<0.01)。结论:沉默KLHL7基因表达可抑制人胃癌细胞的增殖、侵袭迁移能力,促进细胞凋亡并将细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制PI3KAKT信号通路的磷酸化有关。

关键词： 脂肪干细胞   外泌体   毛乳头细胞   增殖   诱导能力  

摘要： 目的研究脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos)对毛乳头细胞(DPCs)生物学活性的影响,探讨ADSC-Exos对毛发生长的作用。方法培养脂肪干细胞(ADSCs),并从细胞形态、表面标记物及分化潜能方面进行鉴定,收集P3代细胞培养上清,通过超速离心法分离提取外泌体,并对其进行电镜、粒径及表面标记物鉴定。将ADSC-Exos与DPCs共培养,采用细胞增殖试验(CCK-8)和蛋白免疫印迹检测ADSC-Exos对DPCs增殖和诱导能力的影响。结果所获取的原代ADSCs和ADSC-Exos均符合间充质干细胞及外泌体特征。与空白对照组相比,外泌体组DPCs的细胞活力明显升高(P<0.05);在蛋白水平上,外泌体组多能蛋白聚糖(Versican)和碱性磷酸酶(ALP)的相对表达量增高(均P<0.05)。结论ADSCs-Exos可促进DPC增殖,增强其毛囊诱导能力。

关键词： UHRF1   前列腺癌   增殖   凋亡  

摘要： 为了探讨泛素样含植物同源结构域和环指结构域1蛋白(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,UHRF1)对前列腺癌PC-3细胞生物学功能的影响及相关机制,我们用含有UHRF1和shRNA-UHRF1的慢病毒颗粒分别感染PC-3细胞,构建UHRF1沉默或过表达的稳转细胞株模型。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)和细胞免疫荧光实验验证感染后UHRF1表达水平和检测UHRF1对DNMT1、p16^(INK4A)的mRNA及蛋白表达水平的影响。CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术实验研究UHRF1对PC-3细胞增殖、侵袭迁移和周期凋亡的影响。结果显示,过表达UHRF1能够显著促进前列腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并抑制细胞凋亡,调控细胞处于G2/M期,并且上调DNMT1表达水平,下调p16^(INK4A)表达水平,而沉默UHRF1的表达则作用相反。总之,UHRF1可能通过抑制p16^(INK4A)的表达促进前列腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,抑制细胞凋亡,UHRF1有可能成为前列腺癌潜在的治疗靶点。

关键词： 糖异生   细胞生物学   糖酵解   代谢酶   吕志   基因表达的调控   基因表达调控   最新研究进展  

摘要： 2022年3月29日,浙江大学转化医学研究院吕志民教授团队在《细胞生物学前沿》(Trends in Cell Biology)在线发表了题为“Regulation of gene expression by glycolytic and gluconeogenic enzymes”的综述(DOI:10.1016/***.2022.02.003),总结了迄今为止发现的糖酵解及糖异生通路中代谢酶在基因表达调控中的重要功能及最新研究进展,并针对这些代谢酶的非经典功能提出了肿瘤干预治疗的新策略。

关键词： 微课   医学细胞生物学   混合式教学模式   探索与实践  

摘要： 医学细胞生物学是临床医学及相关专业的一门专业基础课,具有一定的前沿性,理论性和实践性较强。在目前的互联网和信息化时代,微课和传统授课相结合的混合式教学模式已成为医学细胞生物学教学模式改革过程中的一种趋势。笔者从教学思路、教学方案设计与实施、课堂教学方式、师生即时互动、学生综合评价等多个方面进行了教学改革的探索与实践,取得了良好的教学效果,并在实践的基础上进行了反思。