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关键词： 白血病   早幼粒细胞   急性   干扰素调节因子   生物学功能  

摘要： 目的研究急性早幼粒细胞白血病(APL)中干扰素调节因子9(IRF9)的表达特征、预后意义和生物学功能,探索IRF9作为潜在治疗靶点的临床转化意义。方法挖掘TCGA公共数据分析IRF9在APL中的表达水平及其表达高低对患者生存的影响;利用Dox诱导的慢病毒载体系统构建可诱导表达PML-RARα(PR)融合基因的U937细胞系,诱导PR融合基因早期表达并加入全反式维甲酸(ATRA)检测IRF9表达变化;构建可诱导表达IRF9的NB4细胞系,进行细胞分化和集落形成实验,初步探讨IRF9诱导表达对NB4白血病细胞生物学功能的影响。结果①TCGA数据库分析显示,在各种类型的AML中,IRF9在APL中表达水平最低且与预后不良相关。②成功构建可诱导表达PR融合基因的U937细胞系;PR表达引起IRF9蛋白水平下调,在NB4细胞系中IRF9表达缺失,ATRA处理后可表达上调。③成功构建可诱导表达IRF9的NB4细胞系,IRF9诱导表达促进NB4细胞的分化,且与较低剂量ATRA有协同促分化作用;IRF9诱导表达显著抑制了NB4细胞的集落形成能力。结论IRF9在APL中低表达且与预后不良相关,提示存在特异性调控机制;上调IRF9表达可发挥抗白血病效应,为其成为临床潜在治疗靶点奠定生物学基础。

关键词： 雨课堂   形成性评价   细胞生物学  

摘要： 在传统的终结性评价模式下,学生对于细胞生物学的学习质量并不理想。本研究以智慧教学工具雨课堂为载体,充分利用其数据采集优势,在细胞生物学教学中产生有效的形成性评价,发现这种评价方式能够激发学生学习动力,增强其自主学习能力,养成良好的学习习惯,还能够较全面的评价学生的学习质量,并促进了教师的自我反思和教学水平的提升。

关键词： 脾酪氨酸蛋白激酶抑制剂   R406   类风湿关节炎   滑膜成纤维细胞   白细胞介素6   白细胞介素8   趋化因子配体2   细胞生物学功能   小鼠  

摘要： 目的探讨R406(free base)对人类风湿关节炎关节滑膜成纤维细胞(RASFs)炎性因子分泌的抑制及生物学功能(侵袭、迁移和凋亡)的调节作用,观察R406对关节炎小鼠关节炎症的缓解作用。方法取3~7代生长的RASFs,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组分别用1、10、50、100 ng/mL R406和10 ng/mL IL-1β干预,阴性对照组加入DMSO,阳性对照组加入DMSO和10 ng/mL IL-1β干预。干预24 h,采用qRT-PCR法检测各组炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA。选择最适浓度(50 ng/mL)的R406作用于RASFs(实验组)不同时间(6、12、24、48 h),阴性对照组及阳性对照组处理方法同上,采用qRT-PCR检测各组IL-6、IL-8、CCL2 mRNA,ELISA法检测各组IL-6、IL-8、CCL2蛋白,Trans Well检测各组RASFs的侵袭能力;划痕法检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率。建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)模型鼠,将18只8周龄的DBA 1/J小鼠平均分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组诱发CIA后腹腔注射R406,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不诱发CIA;阳性对照组诱发CIA后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次。R406治疗30 d后,ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP。结果与阳性对照组比较,实验组中不同剂量R406作用后RASFs中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA表达被抑制,且在50 ng/mL时抑制效果最为显著(P均<0.01)。与阳性对照组比较,实验组中50 ng/mL R406作用于RASFs不同时间,细胞中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2蛋白的表达均被抑制,且在24 h抑制效果最显著(P均<0.01);与阳性对照组比较,实验组RASFs上清液中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2水平降低(P均<0.01)。与阳性对照组比较,实验组RASFs侵袭和迁移数均降低,凋亡率增加(P均<0.05)。与阳性对照组比较,实验组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP水平降低(P均<0.01)。结论R406可以抑制RASFs中炎性因子的分泌,调节RASFs侵袭、迁移、凋亡能力,对CIA模型鼠关节炎症具有抑制作用。

关键词： 阿霉素   人乳腺癌   人乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学活性  

摘要： 分析阿霉素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学活性的影响。方法:选取120例2015年10月-2020年10月期间NSCLC根治性放化疗患者治疗前后的血液样本,通过PCR技术检测microRNA-4429水平,按照检测结果数据分析microRNA-4429水平与预后的关系。结果:CD44分子在人乳腺癌MDA-MB-231细胞表面有高表达,CD24表达较低;人乳腺癌MDA-MB-231细胞可有效摄取DOX,且有一定的浓度依赖性,DOX药物对人乳癌MDA-MB-231细胞具有一定的增殖抑制作用,能够使得部分细胞出现凋亡状况。结论:DOX药物优化后对人乳癌MDA-MB-231细胞具有一定的靶向性,通过药物的局部积累提升了药物的治疗效果,能够促使肿瘤细胞的调往。

关键词： 医学细胞生物学   PBL教学模式   教学改革  

摘要： 在本科医学细胞生物学教学过程中实施PBL教学模式,并通过直接比较法和问卷调查法对学生学习效率、学习积极性、课程认可度、能力提升等方面进行比较、分析和总结,结果发现:相对于传统教学模式,PBL教学模式在提升教学质量和培养学生综合能力方面具有积极作用,可以更好地培养医学生的必备基本素质。要充分实现PBL教学模式的教学效果,需要学校、教师和学生多方面的共同努力。

关键词： 白血病   复发   扩增   NK细胞  

摘要： 目的比较不同扩增体系NK细胞生物学特性的差异以及治疗异基因造血干细胞移植后(allo-HSCT)白血病复发的疗效。方法分别采用CD3/CD52单抗扩增法和饲养层细胞扩增法诱导供者来源NK细胞大量扩增,检测扩增前后NK细胞表型、因子分泌、细胞毒的变化规律;选取16例allo-HSCT后复发白血病患者,8例输注CD3/CD52单抗扩增NK细胞,8例输注饲养层细胞扩增NK细胞,观察患者的治疗反应和长期生存情况。结果①与CD3/CD52单抗扩增体系相比,饲养层细胞扩增体系NK细胞纯度较高、NK细胞表面活化性受体DNAM-1及NKp30表达较高、抑制性受体CTLA-4表达较低,而两种NK细胞NKG2D/CD25/CD69/Trail/PD-1/TIM-3/TIGIT表达差异无统计学意义。②两种扩增体系NK细胞Ki-67指数均明显增加,以饲养层细胞扩增NK细胞尤为明显;饲养层细胞扩增NK细胞穿孔素及颗粒酶B表达水平均明显高于CD3/CD52单抗扩增NK细胞。③16例allo-HSCT后复发白血病患者NK细胞输注过程中均未观察到明显不良反应。NK细胞输注后中位随访时间为2554(917~2583)d,CD3/CD52单抗扩增组中3例患者无白血病存活,5例死亡;饲养层细胞扩增组中6例患者长期存活,2例死亡。5例患者在NK细胞输注前存在移植物抗宿主病,NK细胞输注后移植物抗宿主病未加重甚至缓解。结论CD3/CD52单抗扩增与饲养层细胞扩增体系NK细胞的生物学特性具有明显差异;NK细胞输注对allo-HSCT后复发白血病患者的疗效仍需要进一步验证。

关键词： 丹参酮Ⅱ_(A)   丹酚酸B   脂质体   人皮肤成纤维细胞   增生性瘢痕  

摘要： 目的制备丹参酮Ⅱ_(A)(tanshinoneⅡ_(A),TSA)和丹酚酸B(salvianolic acid B,SAB)共载脂质体(TSA-SAB脂质体),并考察其对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)增殖的抑制作用。方法薄膜分散-pH梯度法制备出TSASAB脂质体,对其形态、粒径分布、ζ电位、包封率、初步稳定性、体外释药行为和透皮性能等进行表征;CCK-8法、细胞划痕法和Transwell小室法分别考察TSA-SAB脂质体对HSF细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;Western blotting法考察其对基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和I型胶原(type I collagen,COL-I)蛋白表达水平的影响。结果TSA-SAB脂质体粒径为(189.50±1.57)nm,ζ电位为(-18.73±1.41)m V,粒子分散系数为0.246±0.030,TSA和SAB包封率分别为(87.93±0.97)%和(91.20±0.47)%,稳定性良好,表现出持续缓慢的释药行为和良好的透皮性能,且能抑制HSF细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.01),同时显著增加MMP2的合成,降低COL-I的表达(P<0.01)。结论所制备的TSA-SAB脂质体粒径分布均匀,稳定性良好,包封率高,可延缓释放速率,提高药物的透皮性,对HSF细胞的增殖、迁移和侵袭均有较好的抑制作用,同时能提高MMP2的表达,抑制COL-I的过度生成,表明TSA-SAB脂质体可能对增生性瘢痕有防治作用。

关键词： 间质干细胞   脂肪组织   细胞衍生微粒   外泌体   血管再生诱导因子  

摘要： 目的探讨不同浓度人脂肪间充质干细胞(hADMSCs)来源类外泌体纳米囊泡(NVs)和外泌体(EXOs)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生物学功能的影响。方法 (1)通过水动力抽脂方式, 从2019年6月至2020年8月就诊于福建医科大学附属协和医院的10例女性大腿获取脂肪组织(年龄18~65岁), 通过酶解分离提取第4代hADMSCs, 对其进行成脂、成骨诱导分化, 流式细胞仪鉴定其表面蛋白标志物。(2)制备hADMSCs-NVs和hADMSCs-EXOs并电镜观察其形态, 以粒径分析仪分析其表面蛋白标志物, 通过纳米颗粒跟踪仪分析颗粒大小, 通过蛋白定量和纳米颗粒跟踪仪分别检测1×10;个hADMSCs产生的NVs和EXOs总蛋白含量和颗粒数。(3)设置对照组(加入等量基础培养基)、40、60、80 μg/ml NVs组和20、40、60 μg/ml EXOs组, 分别通过CCK-8增殖实验、细胞划痕试验、血管形成实验检测各组HUVECs增殖、迁移、血管再生能力。采用Graphpad Prism 7.0进行统计分析, 计量资料以±s表示, 多组间比较应用重复测量方差分析, 组间两两比较应用Tukey检验, P<0.05表示差异有统计学意义。结果 (1)光学显微镜下观察到第4代hADMSCs形态呈细长纺锤状;成脂诱导21 d后, 油红O染色可见细胞内透明的脂滴被染成红色;成骨诱导14 d后, 碱性磷酸酶钙钴法染色可见大量棕黑色着色区;hADMSCs表面蛋白标志物CD90、CD29为阳性。(2)透射电镜下可见hADMSCs-NVs和EXOs结构相似, 都呈盘状囊泡;NVs和EXOs表面蛋白标志物CD9、CD81、IgG表达量相似;NVs和EXOs两者的粒径大小大致相同, 分别为(72.00±21.51)nm和(81.27±22.37)nm;1×106个hADMSCs产生的NVs总蛋白含量为(140.7±5.1) μg, 是EXOs的[(1.3±0.3) μg] 100倍左右;NVs颗粒数[(644.5±17.1)×108个/ml]是EXOs[(7.1±0.1)×108个/ml]的90倍左右。(3)CCK-8增殖实验中, 培养12、24、48 h各组HUVECs生长趋势较为一致, 吸光度值比较差异有统计学意义(P<0.01);培养48 h, 60 μg/ml NVs、40 μg/ml EXOs组吸光度值均大于对照组(均P<0.01), 而两实验组之间差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕后8、24 h, 各组划痕宽度改变不完全相同, 差异有统计学意义(P<0.01);划痕后24 h, 60 μg/ml NVs、40 μg/ml EXOs组划痕宽度改变均大于对照组(均P<0.01), 而两实验组之间差异无统计学意义(P>0.05)。血管形成实验中, 各组血管分支点数量与血管长度不完全相同, 差异有统计学意义(P<0.01);60 μg/ml NVs、40 μg/ml EXOs组HUVECs形成的毛细血管分支点数量均多于对照组(均P<0.01), 而两实验组之间差异无统计学意义(P>0.05);60 μg/ml NVs、40μg/ml EXOs组毛细血管长度均长于对照组(均P<0.01), 而两实验组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hADMSCs-NVs的形态、大小与EXOs相似, 而总蛋白量却是EXOs的100倍左右;hADMSCs-NVs和EXOs对HUVECs生物学功能的作用相近, 两者最适宜的浓度分别为60 μg/ml和40 μg/ml。

关键词： 学习通   混合式教学   教学设计  

摘要： 探讨线上线下混合式教学模式在《医学细胞生物学》课程中的教学实践效果。方法:选择2020级临床教改班作为研究对象,基于学习通“一平三端”教学平台,通过网络建课完善线上教学资源,将课堂教学与线上教学有机融合,通过学生反馈及与采用传统课堂教学模式的班级期末成绩比较,综合评价教学效果。结果:采用混合式教学的教改班学生反馈及期末平均分、及格率均优于传统教学班。结论:线上线下混合式教学模式可以提高《医学细胞生物学》课程教学质量,提高学生课堂的参与度和满意度,增加师生互动,为进一步探索教学改革方法提供依据。

关键词： 多发性骨髓瘤   微RNA-19a   Hedgehog信号通路   SMO蛋白  

摘要： 目的探索miRNA-19a对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡和转移的影响,及对SMO蛋白和Hedgehog信号通路的影响。方法人骨髓瘤细胞系U266B1、LP-1、RPMI 8226和NCI-H929为研究模型,首先检测4种细胞中SMO蛋白的背景表达,然后使用U266B1细胞作为模型,设计了miRNA-19a inhibitor,以此建立miRNA-19a敲低组、对照质粒组和空载组。探究miRNA-19a敲减后细胞中SMO蛋白含量以及细胞增殖、凋亡和转移的变化。采用MTT法检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell试验检测细胞侵袭能力。结果SMO蛋白在U266B1、LP-1、RPMI 8226和NCI-H929细胞系中表达量分别为0.925±0.057、0.889±0.067、0.904±0.075、0.507±0.048,其中以NCI-H929细胞系中表达量较低(P<0.05)。MiRNA-19a敲低组、对照质粒组和空载组miRNA-19a含量分别为0.325±0.058、1.158±0.128、1.172±0.131,miRNA-19a敲低组miRNA-19a含量显著降低(P<0.05)。对照质粒组、miRNA-19a敲低组和空载组SMO蛋白表达量分别为0.787±0.104、0.354±0.068、0.807±0.106,miRNA-19a敲低组SMO蛋白含量明显降低(P<0.05)。MTT实验显示,miRNA-19a敲低组细胞增殖OD值在24~72 h内明显低于空载组和对照质粒组(均P<0.05)。凋亡实验显示,miRNA-19a敲低组细胞凋亡率明显高于空载组和对照质粒组(均P<0.05)。Transwell实验显示,miRNA-19a敲低组侵袭细胞数明显低于其他2组(均P<0.05)。结论miRNA-19a/SMO蛋白可能是骨髓瘤细胞系U266B1中控制细胞恶性增长的关键信号,可以作为多发性骨髓瘤治疗的潜在靶点。