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关键词： 分子细胞生物学   IFCC   生化  

摘要： 详情请登录中国生物化学与分子生物学会网站http://***/或者是登录培训班网站:http://***/ifcc2012/查询。

关键词： 眼科学   激光   细胞生物学   分子生物学  

摘要： 眼科的激光应用，主要指“眼底病”的激光治疗，尤其是Ⅲ、Ⅳ期的DR的激光治疗。其作用机制从微循环障碍的角度，提出一个细胞生物学与分子生物学的假说。

关键词： 成骨细胞   牙周膜成纤维细胞   增殖   碱性磷酸酶活性  

摘要： 目的观察成骨细胞（osteoblast cells,OBs）对人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblast cells,HPLFs）生物学特性的影响,为进一步探讨正畸牙齿移动的生物学机制奠定基础。方法建立人OBs与HPLFs共培养系统,通过细胞计数及生化检测法观察成骨细胞对人牙周膜成纤维细胞增殖和分化的影响。结果 3 d和5 d时,共培养组HPLFs细胞计数分别为3.5×10~4个/ml及7.5×10~4个/ml,均明显低于对照组HPLFs细胞计数,且差异有统计学意义（P〈0.05）。HPLFs碱性磷酸酶（ALP）活性比较中,transwell共培养组HPLFs ALP活性高于对照组。在3 d时,差异有统计学意义（P〈0.05）,5 d及7 d时差异也有统计学意义（P〈0.01）。结论人OBs可能抑制HPLFs的增殖,促进HPLFs ALP活性。

关键词： Rab蛋白   脂滴合成   分子机制   细胞生物学功能  

摘要： Rab40c是一种新型Rab蛋白。目前哺乳动物小分子GTPaseRab40c的性质和功能还未被详细研究。本文拟探讨Rab40c在细胞中的定位及其细胞生物学功能。在本文中，我们首先明确了Rab40c的亚细胞定位。细胞免疫荧光实验结果显示过表达的Rab40c主要分布在脂滴表面，而不是高尔基体，内体或溶酶体。而且，过表达的Rab40c在细胞饥饿状态下与内质网-高尔基体中间室标志物ERGIC53也有共定位现象。有趣的是，Rab40c的分布是一个动态的过程。随着脂滴生成和成熟，Rab40c逐渐招募到脂滴上。接着，我们进一步探索了Rab40c对脂滴的影响。研究结果发现过表达Rab40c可诱导脂滴聚集增大且细胞内甘油三酯含量升高;敲除细胞中的Rab40c可温和的引起脂滴变小;随着前脂肪细胞3T3-L1诱导分化成脂肪细胞，Rab40c的蛋白表达量呈增加趋势。由此看出，Rab40c参与脂滴的生成。最后，我们分析了Rab40c调节脂滴的分子机制。研究结果显示Rab40c诱导脂滴聚集增大不依赖于GTPase活性，而是依赖于Rab40c特有的结构域SOCSbox。GST-pulldown实验结果发现，Rab40c通过SOCSbox不仅可与脂滴相关蛋白Tip47相互作用，而且其自身可形成同源二聚体调节脂滴的合成。\n 我们的研究结果揭示了Rab40c是一种与脂滴有关的新型Rab蛋白，它在调节脂滴合成的过程中起到了重要的作用。我们的工作为更深入的研究其生物学功能和分子机制奠定了基础，也为脂滴代谢障碍相关疾病防治的研究提供了理论依据。

关键词： 干细胞技术   细胞生物学   春季会议   杭州   学分   学会   中国   论坛  

摘要： 为进一步推动我国的干细胞技术与临床应用的发展,加强我国干细胞研究同行间的了解、交流与合作,第四届杭州干细胞论坛暨中国细胞生物学学会干细胞生物学分会2012年春季会议将于2012年4月11日～13日在美丽的西湖之畔——杭州隆重召开。将有来自全国的干细胞基础和临床研究的专家报告交流最新的干细胞领域的进展。

关键词： 幼儿腹泻   轮状病毒   灭活疫苗   细胞生物学  

摘要： 轮状病毒(Rotavirus，RV)感染是引起5岁以内婴幼儿腹泻的主要病因之一，每年全球大约有53万人因感染RV死亡，而其中的85%发生在发展中国家。目前针对RV感染性腹泻仍无特效药治疗，RV感染已经成为严重的全球公共卫生问题，给世界各国带来沉重的疾病负担和经济负担。开发疫苗预防婴幼儿RV腹泻被认为是最好的防御措施。世界卫生组织(World Health Organization，WHO)全球疫苗及免疫联盟(The Global Alliance for Vaccines and Immunization，GAVI)以及比尔盖茨基金会等机构正在世界范围内积极促进不同形式RV疫苗的发展。目前国内外上市的RV疫苗均为口服减毒活疫苗，减毒活疫苗在安全性方面尚存在一些潜在的风险，因此，研究和开发RV灭活疫苗(Inactivated rotavirusvaccine，IRV)将是预防RV感染的一项重要策略和有效补充。\n 本研究目的在于将实验室的规模培养扩大到中试规模，探索其过程中的条件，并对中试规模获得的疫苗进行初步的免疫原性评价。本实验利用转瓶培养技术和细胞微载体培养技术探索规模化培养RV的工艺，用上述方法制备了Wa和SA11株RV，经纯化、灭活、佐剂吸附等工艺，制备成试验性灭活疫苗；采用两株试验性IRV分别间隔2周经肌肉途径两次免疫Wistar大鼠和恒河猴，应用ELISA法与微量中和试验方法检测大鼠和恒河猴血清中抗RV特异性抗体效价和中和抗体效价，流式细胞术分析恒河猴血液T淋巴细胞亚群变化情况。实验结果表明，通过转瓶培养和生物反应器发酵制备RV，每批次可制备约10～40L的RV病毒收获液，收获的RV制备得到的Wa株和SA11株试验性IRV抗原含量分别为10240EU/ml和5120 EU/ml，达到了中试规模制备的目的和要求。病毒免疫原性试验证明，经2次肌肉注射免疫后，两株试验性IRV诱导大鼠产生的血清IgG抗体效价分别为(43407.71±1654.51)和(41520.61±2047.61)，诱导恒河猴产生的血清IgG抗体效价分别为(13654.45±3125.27)和(10350.68±997.83)；免疫后产生的中和抗体在体外中和实验中，可以中和同型感染性G1型RV和异型感染性G3型RV，显示一定的交叉保护作用。细胞免疫检测发现两株试验性IRV免疫恒河猴后均能刺激其CD4+T淋巴细胞增加，CD8+T淋巴细胞无明显变化。结论：运用转瓶系统和生物反应器微载体培养系统可以实现规模化制备RV；两株试验性IRV能够诱导实验Wistar大鼠和恒河猴产生良好的免疫反应及型间交叉识别作用，为进一步研究轮状病毒规模化培养条件及疫苗研制做出有益探索。

关键词： history   adipocytes   insulin action   3T3-L1 cells   glucose transport   fatty acids   lipolysis   catecholamines   preadipocytes   HUMAN ADIPOSE-TISSUE   RESPONSIVE GLUCOSE-TRANSPORTER   PLURIPOTENT STEM-CELLS   ADENOSINE 3,5-MONOPHOSPHATE LEVELS   DEPENDENT PROTEIN-KINASE   PROSTAGLANDIN-E2 RECEPTOR-BINDING   INSULIN-STIMULATED TRANSLOCATION   MITOTIC CLONAL EXPANSION   PERFRINGENS ALPHA-TOXIN   ISOLATED RAT ADIPOCYTES  

摘要： Lafontan M. Historical perspectives in fat cell biology: the fat cell as a model for the investigation of hormonal and metabolic pathways. Am J Physiol Cell Physiol 302: C327-C359, 2012. First published September 7, 2011; doi:10.1152/ajpcell.00168.2011.-For many years, there was little interest in the biochemistry or physiology of adipose tissue. It is now well recognized that adipocytes play an important dynamic role in metabolic regulation. They are able to sense metabolic states via their ability to perceive a large number of nervous and hormonal signals. They are also able to produce hormones, called adipokines, that affect nutrient intake, metabolism and energy expenditure. The report by Rodbell in 1964 that intact fat cells can be obtained by collagenase digestion of adipose tissue revolutionized studies on the hormonal regulation and metabolism of the fat cell. In the context of the advent of systems biology in the field of cell biology, the present seems an appropriate time to look back at the global contribution of the fat cell to cell biology knowledge. This review focuses on the very early approaches that used the fat cell as a tool to discover and understand various cellular mechanisms. Attention essentially focuses on the early investigations revealing the major contribution of mature fat cells and also fat cells originating from adipose cell lines to the discovery of major events related to hormone action (hormone receptors and transduction pathways involved in hormonal signaling) and mechanisms involved in metabolite processing (hexose uptake and uptake, storage, and efflux of fatty acids). Dormant preadipocytes exist in the stroma-vascular fraction of the adipose tissue of rodents and humans; cell culture systems have proven to be valuable models for the study of the processes involved in the formation of new fat cells. Finally, more recent insights into adipocyte secretion, a completely new role with major metabolic impact, are also briefly summariz

关键词： 牙周病   牙周膜细胞   神经生长因子   基因转染   蛋白免疫印记   免疫荧光  

摘要： 目的 探讨人牙周膜成纤维细胞（periodontal ligament cells，PDLC）经神经生长因子（nerve growth factor， NGF）基因转染后对其生物学性状的影响进行分析，为其能够成为牙周组织再生的种子细胞奠定基础。 方法 本文通过脂质体转染法采用pcDNA3.1载体将神经生长因子转入牙周膜细胞中，并通过免疫荧光法及免疫印记实验（Western blot）证明其在细胞中的表达。然后对通过MTT、ALP方法对其进行生物学性状的分析，统计学分析采用SPSS13.0软件包进行方差分析。 结果 1.通过免疫荧光观察转染NGF的PDLC的胞浆中呈深红色，未转染的胞浆呈浅红色。 2.免疫印记法对表达产物的鉴定转染细胞，转染空质粒的细胞和未转染细胞均在13KD出现一条特异性条带，未转染和转染空质粒的细胞条带窄色浅，转染NGF组颜色深条带宽。 ***显示，前3天细胞无明显增殖变化，从第4天开始直至第7天转染NGF的PDLCs组与另两组细胞比较增殖明显（p<0.01），而另两组无明显变化（p>0.01），差异无统计学意义。 4. ALP含量显示转染NGF组PDLC与其余两组相比有增高趋势。 结论 牙周膜成纤维细胞经NGF因子基因转染后可促进细胞碱性磷酸酶活性增强，且MTT检测其细胞增殖能力明显提高。本研究将NGF基因转染体外培养PDLC，有望获得功能增强的种子细胞，为探索基因治疗和组织工程相结合在牙周组织缺损修复中的应用提供理论依据。

关键词： 激素   股骨头坏死   动物模型   鼠   骨髓间充质干细胞  

摘要： 研究背景：股骨头坏死是骨科常见的疾病。临床上常见的股骨头坏死的原因主要分为：创伤性和非创伤性股骨头坏死。非创伤性股骨头坏死的常见原因有使用激素、酗酒、血红蛋白病、减压病等,目前,激素性股骨头坏死占非创伤性股骨头坏死的首位。在临床实践中,系统性红斑狼疮、白塞病、肾病综合征、妊娠并发症等疾病在治疗中应用激素,他们共同的特点是患者有不同程度的血管炎表现,这类患者在使用激素治疗后容易产生股骨头坏死。目前,部分骨科医师尝试使用患者自体骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死,主要是将多能的骨髓间充质干细胞向成骨细胞和血管内皮细胞分化,其治疗的基础是生物学特性正常的骨髓间充质干细胞。而以往的实验侧重于研究股骨头坏死模型的影像学表现、病理变化及血液的变化,而对于骨髓间充质干细胞生物学的研究较少且不全面,患者自体干细胞的生物学特性及其细胞外基质的成分及比例是否发生改变尚不明确,其自体骨髓间充质干细胞是否适合用于治疗股骨头坏死还不明确。 方法：(1)利用牛血清和激素建立股骨头坏死模型,将20只250g-280g健康SD大鼠随即分为实验组、对照组。实验组动物腹腔注射牛血清(10ml/kg)2次,间隔1周,于最后一次血清注射两周后连续3d肌肉注射甲基强的松龙(40ml/kg);对照组动物腹腔注射0.9%氯化钠注射液(10ml/kg)两次,间隔1周,于最后一次注射2周后连续3d肌肉注射0.9%氯化钠注射液(40ml/kg)。(2)于最后一次肌肉注射2周后,将实验动物拉颈处死,取出股骨头,固定、石蜡包埋、切片行苏木精-伊红染色,于光镜下观察骨结构、细胞核变化。(3)骨髓间充质干细胞生物学特性的检测：①检测骨髓间充质干细胞的增殖率。②检测的骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化能力。 结果：(1)与对照组相比,实验组软骨下区几乎为脂肪组织所代替,骨小梁稀疏,排列紊乱,脂肪细胞明显增多,大量脂肪细胞堆积,体积增大;部分标本可见骨小梁开始萎缩、变细。(2)细胞增值率检测显示,两组在第7天时吸光度有统计学差异;行成骨定向诱导后,ALP染色结果显示,具有成骨细胞特异性的碱性磷酸酶含量，实验组少于对照组，茜素红染色结果显示，钙结节的数量，实验组少于对照组;成脂定向诱导后，行油红O染色，实验组的成脂细胞明显少于对照组的成脂细胞。 结论：（1）联合使用异种血清和糖皮质激素可以建立激素性股骨头坏死的SD大鼠模型;（2）实验组骨髓间充质干细胞具备干细胞的生物学特性，但相对于对照组其增殖能力减弱，成骨、成脂潜能减弱。

ISBN: (纸本)9787030343048