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关键词： 人参皂苷Rg1   内皮祖细胞   高糖环境   生物学功能   生长因子   实验研究  

摘要： 目的:探讨人参皂苷Rg1对高糖诱导损伤的内皮祖细胞(EPCs)生物学功能和分泌血管生成相关因子的影响。方法:体外分离和培养人脐带血EPCs,通过观察细胞形态、双荧光染色法对培养的EPCs进行鉴定。将鉴定成功的EPCs用30 mmol/L的葡萄糖预处理120 h后,分别在不同浓度梯度人参皂苷Rg1(0 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L)条件下干预培养,确定人参皂苷Rg1促高糖受损EPCs增殖的最佳浓度。将高糖诱导损伤的EPCs随机分为实验组(最佳浓度人参皂苷Rg1干预)和模型组[磷酸缓冲盐溶液(PBS)干预],同时设置正常EPCs对照组(PBS干预)。采用细胞计数试剂(CCK-8)、黏附能力测定试验、Matrigel体外成管试验、划痕实验及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测EPCs增殖、黏附、成管、迁移能力及EPCs分泌血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、血管生成素-1(Ang-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的水平。结果:人参皂苷Rg1促高糖受损EPCs增殖的最佳浓度为40 mg/L;与正常组比较,高糖受损EPCs增殖、黏附及成管能力明显降低(P<0.01);采用人参皂苷Rg1干预后,高糖受损EPCs增殖、黏附、成管及迁移能力明显增强(P<0.01)。ELISA检测发现,与正常组比较,模型组EPCs分泌VEGF、SDF-1α、Ang-1明显减少,而MMP-2分泌增加,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组在40 mg/L人参皂苷Rg1干预后,EPCs分泌VEGF、SDF-1α、Ang-1明显增加,而MMP-2分泌减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1处理能改善高糖受损EPCs的生物学功能及促进EPCs分泌血管生成相关生长因子,具有促血管新生的潜能。

关键词： 云学堂   细胞生物学   混合式教学  

摘要： 基于医学院校细胞生物学课程特点和学情,将传统课堂教学与云学堂辅助教学相结合,在2020级学生(实验组)中进行实践,2019级学生(对照组)进行传统课堂教学。课程结束后,对两组期末考试成绩进行统计学分析,实验组优于对照组。问卷调查结果显示,实验组对混合式教学在促进自主学习、激发学习潜能、提升能力和拓宽视野等方面表示认可。云学堂结合传统课堂的混合式教学可以提高学生学习主动性,有利于提升医学院校细胞生物学教学质量。

关键词： "互联网+"   细胞生物学实验教学   教学模式   实践能力  

摘要： 细胞生物学实验是细胞生物学教学的重要环节,对于学生的专业素养和实践能力有着重要的促进作用.但传统实验教学存在实验机会不足、教学内容单一等问题.随着互联网和教育技术的发展,互联网与教育的融合,即"互联网+教育",为细胞生物学实验教学的改革带来了新的机会.文章探讨了"互联网+"背景下,多种互联网教育手段联合运用,促进细胞生物学实验教学的效果与参与度,同时增强学生的自我学习和实践能力.

关键词： 基质金属蛋白酶14   口腔鳞状细胞癌   单克隆抗体   细胞生物学功能  

摘要： [目的]探究MMP14单克隆抗体对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响。[方法]构建MMP14敲低(Kd-TCa8113)、过表达(Kd-TCa8113)细胞株,与野生型TCa8113(Wt-TCa8113)对比,考察MMP14对TCa8113细胞增殖、凋亡的影响。用不同浓度的MMP14单克隆抗体与TCa8113共培养,以探讨MMP14单克隆抗体对TCa8113细胞增殖、凋亡的影响。[结果]以Wt-TCa8113为对照组,Kd-TCa8113组、Kd-TCa8113组的细胞培养48 h的增殖率分别为74.55%、114.79%,P均<0.05。流式细胞术结果显示,Wt-TCa8113、Kd-TCa8113和Oe-TCa8113培养48 h后的细胞凋亡率分别为3.47%±0.36%、33.68%±7.33%和1.60%±0.22%,P均<0.05。用50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL浓度的抗体处理TCa8113细胞24 h后,以PBS处理组为对照,细胞增殖率分别为93.52%、90.75%和87.61%,P均<0.05。流式细胞术结果显示,PBS组和上述抗体处理组的细胞凋亡率分别为3.47%±0.36%、11.72%±2.03%、15.52%±3.05%和21.59%±4.49%,抗体处理组的细胞凋亡率均较PBS组高,P均<0.05。[结论]MMP14表达能显著促进TCa8113细胞的增殖和抗凋亡能力。MMP14单克隆抗体能显著抑制TCa8113细胞的增殖和抗凋亡能力。

关键词： 课程群   细胞生物学   混合式课程   改革与实践  

摘要： 细胞是生命体结构和生命活动的基本单位。《细胞生物学基础》课程是连接动物科学专业公共基础课、专业基础课和专业课的重要桥梁。通过本课程的学习,在教学过程中联系前序和后续课程的相关内容,使学生进一步掌握细胞的生物学特性,并系统全面地理解专业课程中动物生命活动的基本单位—一细胞如何发挥生物学功能及其机制。以“专业课程群”的理念建设本课程,服务于动物科学专业本科生的专业课学习,提高学生的综合理论水平和分析能力。

关键词： 细胞生物学   细胞死亡   线上线下混合式教学   慕课   教学设计  

摘要： 在近年细胞生物学线上线下混合式教学(online plus offline blending teaching,OPOBT)中,部分师生存在抵触情绪、使用不当等现象,影响了教学质量,结合传统教学范式、前人成果和教学实践,以“细胞死亡”教学内容设计为例,总结提高线上线下混合式教学质量的路径:理性认识和接受线上线下混合式教学;在传统教学范式指引下,开展对学生和教学内容学情分析,制定相应的培养计划,合理重构教学内容;深化和细化教学内容,设计和优化教学模式;持续发展过程性、多元化评价体系,才能有效加强师生互动、激发学生学习兴趣、培养学生创业创新思维与能力。

关键词： Circ-ZNF609   miR-224-5p   食管癌   增殖   凋亡  

摘要： 目的探讨Circ-ZNF609对食管癌细胞生物学特性影响及作用机制。方法体外培养正常食管内皮细胞NEC与食管癌细胞系Eca-109、KYSE30、KYSE-450,实验分组:NC(空白)组、si-NC(转染si-NC)组、si-Circ-ZNF609(转染si-Circ-ZNF609)组、miR-NC(转染miR-NC)组、miR-224-5p(转染miR-224-5p)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-NC(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-NC)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-224-5p(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-224-5p)组;采用实时荧光(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测Circ-ZNF609、miR-224-5p表达量;采用Western印迹检测细胞周期素蛋白(Cyclin)D1、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、β-catenin蛋白表达;采用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞活力、细胞周期和凋亡率;双荧光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。结果与正常食管内皮细胞NEC比较,食管癌细胞Eca-109、KYSE30、KYSE-450中Circ-ZNF609表达水平明显升高,miR-224-5p表达水平明显降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-Circ-ZNF609组细胞活力与S期细胞比例明显降低(P<0.05),G2/M期细胞明显比例升高(P<0.05),CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低,凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与miR-NC组比较,miR-224-5p组细胞活力与S期细胞比例明显降低,G2/M期细胞比例明显升高,CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低,凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白产生明显增加(P<0.05);Circ-ZNF609可靶向调控miR-224-5p;抑制miR-224-5p表达可逆转Circ-ZNF609沉默对食管癌细胞生物学行为的作用。结论干扰Circ-ZNF609能够通过促进miR-224-5p表达而调控食管癌细胞生物学特性,此影响可能涉及Wnt/β-catenin信号通路的失活。

关键词： 尿酸   椎间盘退变   人类髓核细胞   自噬   凋亡  

摘要： 目的 探讨不同浓度尿酸对人类髓核细胞(HNPC)生物学功能的影响。方法 体外不同浓度尿酸条件下培养HNPC,采用CCK-8法检测不同浓度尿酸对HNPC的抑制率。分别采用不同浓度(0、100、200、400μmol/L)尿酸培养HNPC 1周或2周,TUNEL荧光评估HNPC凋亡水平,qRT-PCR及免疫组织化学染色检测HNPC细胞外基质Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达,Western blot法检测凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的表达。结果 随着尿酸浓度的增加,HNPC活力呈递减趋势。培养1周后,与尿酸0μmol/L比较,尿酸400μmol/L HNPC中凋亡细胞比例和切割型Caspase-3、Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ比值表达增高(P<0.05),而p62蛋白、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);培养2周后,与尿酸0μmol/L比较,尿酸200μmol/L、尿酸400μmol/L上述指标改变均较显著(P<0.05)。结论 高浓度尿酸可以促进HNPC凋亡以及自噬,减少HNPC细胞外基质表达,进而加重椎间盘退变。

关键词： 肝癌   恩替卡韦   氯喹   细胞活力   凋亡   侵袭   自噬  

摘要： 目的探究恩替卡韦联合氯喹对肝癌HepG2细胞生物学功能的影响。方法肝癌HepG2细胞分别用恩替卡韦(40μmol/L)、氯喹(10μmol/L)或两者联合处理,同时设置空白对照组。采用CCK-8法检测细胞的活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,MDC法检测细胞自噬情况。结果与空白对照组比较,单独使用恩替卡韦和氯喹均能抑制肝癌HepG2细胞活力和侵袭能力,且两者联合的抑制效果更明显(均P<0.05);恩替卡韦和氯喹均能提高HepG2细胞总体凋亡率,且两者联合作用的效果更明显(均P<0.001)。恩替卡韦和氯喹单独处理后HepG2细胞内自噬小体均减少,两者联合处理后HepG2细胞内自噬小体减少的数量更明显。结论恩替卡韦和氯喹均能抑制肝癌HepG2细胞活力和侵袭能力,促进细胞凋亡及降低细胞自噬水平,两者联合时对生物学功能的影响更显著。

关键词： 自然杀伤细胞   白细胞介素   生物学活性  

摘要： 自然杀伤细胞(natural killer, NK)可以自主杀伤靶细胞,在固有免疫中可以起到抵抗病毒感染和肿瘤细胞的作用。NK细胞的发育及其生物学活性受到多种细胞激素调节与控制,尤其是白细胞介素家族细胞因子,并且通过调节不同的信号通路而在各个阶段发挥重要作用。然而,调节NK细胞发育或生物学活性的各种细胞因子的具体作用仍不明确。本文将描述不同白细胞介素的单独和不同组合来扩增NK细胞的现有方案,从而全面了解不同白细胞介素调控NK细胞的生物学活性作用,将有助于提高NK细胞在肿瘤免疫治疗的疗效。