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关键词： 肝细胞癌   角蛋白23   上皮-间质转化   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的探讨角蛋白23(Keratin 23,KRT23)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法应用免疫组织化学法检测88例HCC患者癌组织和癌旁正常组织中KRT23蛋白表达,并分析KRT23蛋白表达水平与HCC患者临床病理特征的相关性。体外培养人正常肝细胞系(L02)和HCC细胞系(Huh-7、HepG2、Bel-7402和MHCC97-H),qRT-PCR和Western blotting检测细胞中KRT23 mRNA和蛋白表达。取MHCC97-H细胞和HepG2细胞,构建KRT23敲低/过表达细胞系。CCK-8法检测细胞增殖活力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blotting检测细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。结果在HCC组织/细胞中KRT23蛋白均呈高表达,且KRT23蛋白表达水平与HCC的肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)。敲低KRT23可降低HCC细胞增殖活力,抑制细胞迁移、侵袭和N-cadherin、Vimentin表达,升高E-cadherin表达(P均<0.05);KRT23过表达可促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭,降低E-cadherin表达,升高N-cadherin、Vimentin表达(P均<0.05)。结论KRT23在HCC中高表达,敲低KRT23可能通过抑制EMT,抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词： 学习通   五星教学法   医学细胞生物学   混合式教学  

摘要： 探索分析基于超星学习通平台并利用五星教学法的混合式教学模式的教学应用效果。方法 以临床医学专业2个班级(临床医学1班和临床医学2班)、临床药学专业2个班级(临床药学1班和临床药学2班)的201人为研究对象。将4个班级按专业分成2个组,每个组设置对照班级和教改班级。对照组采用传统模式进行教学;教改组借助于超星学习通平台、利用五星教学法的混合教学模式进行授课。教学结束后利用成绩分析法,分别比较2个组的对照班级和教改班级的期末综合成绩,评价教学效果。结果 对1组和2组的期末总成绩分析,各组的教改班级的期末总成绩明显优于对照班级,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 基于超星学习通的五星教学模式有助于提高教学质量,为进一步的教学改革奠定了基础。

关键词： 细胞生物学与微生物学   课程改革   食品科学与工程  

摘要： 作为食品科学与工程专业的核心必修课程,细胞生物学与微生物学课程在专业建设中具有举足轻重的地位.文章针对武汉轻工大学该课程传统教学过程中存在的种种问题,从教学内容、教学方法和考核机制等方面对该课程进行了深入思考,提出了具有可操作性的教学内容调整、教学方式改革和考核机制建立措施,以使细胞生物学与微生物学更符合食品学科的培养要求,并为探索适合高等院校现代化教学模式提供思路.

关键词： C-C趋化因子配体5   喉癌细胞   细胞增殖   细胞迁移   细胞凋亡  

摘要： 目的研究C-C趋化因子配体5(C-C chemokine ligand 5,CCL5)在头颈鳞状细胞癌中的表达,并探讨CCL5对喉癌细胞生物学特性的影响。方法基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库查找CCL5在头颈鳞状细胞癌中的表达情况。将喉癌细胞TU177转染siRNA(siRNA组),并设对照(NC)组,CCK8法、细胞划痕试验、流式细胞术分别检测各组细胞增殖、迁移、细胞周期及细胞凋亡情况;RT-PCR、Western blot法检测CCL5敲降效率及多药耐药蛋白2(multidrug resistance protein 2,MRP2)、bcl-2相关x蛋白(bcl-2-associated x protein,Bax)mRNA转录及蛋白表达水平。结果CCL5在头颈鳞状细胞癌的表达高于正常组织(P<0.05)。与NC组相比,siRNA组siRNA具有较高的敲降效率(t分别为12.898和22.656,P均<0.01);siRNA敲降CCL5可抑制喉癌细胞增殖、迁移,促进喉癌细胞晚期凋亡及凋亡蛋白Bax的表达(t=2.600~11.667,P均<0.05)。结论CCL5在头颈鳞状细胞癌中高表达,siRNA干扰CCL5通过上调Bax表达抑制喉癌细胞TU177增殖、迁移,促进凋亡,为CCL5可能作为治疗喉癌的新靶点奠定了基础。

关键词： 医学细胞生物学   诺贝尔生理医学奖   科学素养  

摘要： 诺贝尔生理医学奖蕴含着医学领域中科学家们对当今医学发展的重大贡献,这些研究成果都有着十分深远的社会意义。教师在医学细胞生物学的教学中应以学生自主学习为中心,深入拓展与教材中细胞结构、功能和生命活动等章节核心知识点相关的诺贝尔生理医学奖的获奖项目的科学研究过程。以此来拓宽学生基础和专业知识的深度和广度,坚定学生的专业信心、激发学生的创新思维,培养学生的临床科研潜能等科学素养,为我国未来医疗事业的高速发展和健康中国的目标战略储备具有高水平、国际化科学素养的医学人才。

关键词： 诺贝尔奖得主   记忆痕迹   治学之道   成长之路   神经科学   认知心理学   细胞生物学   誉满全球  

摘要： 人们每天所见所闻的生活场景和片段,总能在脑海里留下痕迹,那是因为我们拥有记忆。记忆联结着过去和现在,也奠定了我们生存和交流的基础,但大脑如何产生记忆仍是悬而未解之谜。诺贝尔生理学或医学奖获得者埃里克·坎德尔的《追寻记忆的痕迹》一书,以自传的形式为读者答疑解惑。在这部逾550页的皇皇巨著中,坎德尔结合自己的成长和从事科研的心路历程,全面回顾了20世纪以来关于记忆的分子和细胞机制研究的历史,并回溯了新心智科学的开创历程。作者追述了儿时经历引起他对记忆的强烈兴趣,这一兴趣首先体现在对历史和精神分析的爱好,然后转到脑生物学领域,跨越认知心理学、神经科学、细胞生物学等多个学科,最终从细胞和分子层面上破译了人类记忆密码,从而荣获2000年诺贝尔奖。为了满足人们对追寻记忆痕迹的好奇和渴求,全面普及心智科学的相关知识,坎德尔把个人成长之路融入科学发展的历程之中。本书无疑是一位科学巨擘历经半个多世纪的心路历程,通过阅读他传奇的人生探索之旅,可以从中领略这位人中骐骥的治学之道和大家风范。身为誉满全球的不世之才,他不仅学术研究的成果斐然,而且对前辈和同行的尊重与谦和,对年轻一代的提携和鼓励,对故土维也纳的眷念,以及身为犹太人所特有的民族自豪感均跃然纸上。该书的独到之处是将几个不同维度的历史精妙地交织在一起,将社会史与科学史相结合,使生活史与事业史并行不悖。其优美生动的文笔,洋溢着灵性与智慧,令笔者钦佩之情油然而生。掩卷遐思,这本诺贝尔奖得主的科研经历和人生传奇,必将会使有识之士开卷获益。

关键词： Dsup   人胚胎干细胞   CRISPR/Cas9   细胞增殖   凋亡  

摘要： 目的通过CRISPR/Cas9技术将水熊虫Dsup基因定点敲入胚胎干细胞(hESC-H9)的AAVS1位点,构建Dsup基因过表达的稳定细胞株,研究Dsup表达对hESC-H9生物学性质的影响。方法构建CRISPR/Cas9 AAVS1位点敲入系统,采用PCR技术扩增Dsup序列,并将其插入pAAVS1-Donor-GFP-Puro,将构建的pAAVS1-Dsup-GFP-Puro与pAAVS1-CRISPR-Cas9载体共同转染hESC-H9,通过CRISPR/Cas9技术介导的同源重组使Dsup基因插入hESC-H9的AAVS1位点,经嘌呤霉素筛选后利用流式分选技术分选GFP、TRA-1-60、SSEA-4等3种荧光标记阳性的细胞群,获得稳定敲入Dsup基因并保持干性的细胞。将获得的hESC-H9-Dsup传至第9代,对Dsup mRNA表达水平、GFP、细胞表面干性标志物(TRA-1-60、SSEA-4)以及干性基因(OCT4、SOX2、NANOG)进行检测,并研究hESC-H9-Dsup的增殖、凋亡以及辐射耐受情况,以探索Dsup基因对hESC-H9生物学活性的影响。结果成功构建pAAVS1-Dsup-GFPPuro重组供体质粒,与pAAVS1-CRISPR-Cas9质粒共同转染hESC-H9后通过药物筛选获得了在AAVS1位点敲入的hESC-H9-Dsup。经实时定量PCR检测,Dsup mRNA在hESC-H9-Dsup中成功表达,且其表达对hESC-H9表面干性标志物TRA-1-60、SSEA-4以及干性基因OCT4、SOX2、NANOG表达未见明显影响。hESC-H9-Dsup增殖速度稍高于hES-H9-Control/WT。hESC-H9-Dsup与hESC-H9-Control/WT凋亡无显著差异(P>0.05),但hESC-H9-Dsup的辐射耐受能力显著高于hESC-H9-Control(P<0.001)。结论成功构建了hESC-H9-Dsup,Dsup基因表达未对其生物学性质产生明显影响,且表现出明显的辐射耐受能力,为后续研究Dsup基因对人类细胞的影响及探讨可能的应用价值奠定了基础。

关键词： 脉络膜新生血管   N6-甲基腺苷(m_(6)A)甲基化修饰   甲基转移酶3(METTL3)  

摘要： 目的:探索甲基转移酶3(METTL3)介导的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰在脉络膜新生血管发病中对血管内皮细胞生物学活性的调控作用及机制。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为:对照组(正常培养)、低密度脂蛋白(LDL)组、荧光标记LDL(Dil-LDL)组、12.5μg/mL、25μg/mL氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、12.5μg/mL、25μg/mL荧光标记ox-LDL(Dil-ox-LDL)组、DMSO组、STM2457(METTL3抑制剂)组、DAPT组;将体外培养的猴视网膜-脉络膜内皮细胞(RF/6A)分为:对照组、DMSO组、12.5μg/mL ox-LDL组、DAPT组。荧光显微镜观察细胞内吞脂蛋白水平,dot blot检测m6A甲基化水平,Western blot检测METTL3及血管形成相关蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测METTL3及血管形成相关标志物的mRNA表达水平,免疫荧光检测METTL3表达水平及定位,transwell实验检测细胞迁移能力,体外成管实验检测细胞血管形成能力。结果:与对照组相比,Dil-LDL组、12.5μg/mL、25μg/mL Dil-ox-LDL组细胞内荧光标记的脂蛋白含量显著升高,12.5μg/mL、25μg/mL ox-LDL组m6A甲基化水平显著升高(均P<0.05),METTL3蛋白表达水平显著升高(均P<0.01),细胞迁移及血管形成能力显著上升(均P<0.01),12.5μg/mL ox-LDL组METTL3 mRNA表达水平显著上调(P<0.05);与DMSO组相比,STM2457组m6A甲基化水平显著降低(P<0.05),METTL3的蛋白及mRNA表达水平无显著差异(均P>0.05),血管内皮生长因子(VEGF)等血管形成相关标志物表达水平显著下降(均P<0.05),细胞迁移及血管形成能力显著下降(均P<0.01),NICD表达水平显著下降(P<0.05);与DMSO组相比,DAPT组NICD、VEGF表达水平显著下降(均P<0.05),HUVEC及RF/6A细胞迁移及血管形成能力显著下降(均P<0.01)。结论:METTL3介导的m6A甲基化修饰在脉络膜新生血管发病中可经Notch通路促进血管内皮细胞的血管形成。

关键词： 夏枯草   甲状腺乳头状癌   微小RNA-146b-3p   增殖   侵袭   迁移  

摘要： 目的探索夏枯草通过调控MicroRNA-146b-3p对BRAF^(V600E)基因突变型甲状腺乳头状癌细胞(B-CPAP细胞)增殖、侵袭及迁移生物学特性的影响。方法将夏枯草作用于B-CPAP细胞并设置对照组(转染miRNA抑制剂等),通过qRT-PCR技术检测夏枯草对B-CPAP细胞MicroRNA-146b-3p表达水平的影响;再分别采用CCK-8、Transwell及细胞划痕实验,检测夏枯草通过影响MicroRNA-146b-3p的表达水平对B-CPAP细胞增殖、侵袭以及迁移能力的影响。结果B-CPAP细胞microRNA-146b-3p的表达水平约为正常甲状腺细胞的4倍;1.0 mg/mL的夏枯草溶液使B-CPAP细胞microRNA-146b-3p表达水平降低约50%,通过降低microRNA-146b-3p的表达水平,使B-CPAP细胞的增殖、侵袭和迁移力分别降低约38%、80%和75%。结论夏枯草可通过下调MicroRNA-146b-3p的表达水平,抑制B-CPAP细胞的增殖,并降低其侵袭和迁移能力。