关键词:
山茱萸提取物
环烯醚萜苷
成熟脂肪细胞
氧消耗速率
质子漏
摘要:
目的:观察山茱萸环烯醚萜苷类提取物对小鼠胚胎成纤维细胞(3T3-L1)成熟脂肪细胞有氧呼吸氧消耗速率及相关基因表达的影响,分析可能分子机制。方法:以3T3-L1脂肪细胞为研究对象,Seahorse细胞外流量分析方法测定0.04,0.2,1 g·L^(-1)质量浓度山茱萸提取物干预2 d后对脂肪细胞氧消耗速率的影响,另设空白组。逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测干预2 d后脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体-γ辅激活子-1α(PGC-1α),沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1),腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),线粒体脱偶连蛋白1抗体(UCP-1),PR结构域的蛋白16(PRDM16)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)mRNA表达水平。结果:与空白组比较,0.2,1 g·L^(-1)山茱萸提取物干预成熟脂肪细胞2 d后可增加ATP生成、基础呼吸和最大呼吸能力,1 g·L^(-1)提取物可使储备呼吸能力增强,0.04 g·L^(-1)提取物则使质子漏氧消耗速率明显升高;各质量浓度提取物干预2 d不同程度明显上调PGC-1α,AMPK,SIRT1 mRNA水平,明显下调PPARγmRNA表达,均具有明显统计学差异(P<0.05,P<0.01),对UCP-1,PRDM16基因表达没有明显影响。结论:山茱萸环烯醚萜总苷对成熟脂肪细胞有氧呼吸具有促进作用,增加ATP生成,细胞不具备米色化特征,其作用可能与AMPK,SIRT1,PGC-1α,PPARγ多个因子的调节相关。