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关键词： 吴茱萸碱   斑马鱼   肝损伤   骨质疏松症   作用机制  

摘要： 目的：基于斑马鱼模型研究吴茱萸碱（EVO）的肝损伤和治疗骨质疏松症的活性，并利用网络药理学和实时荧光定量聚合酶链式（Real-time PCR）探究EVO治疗骨质疏松症的作用机制。方法：随机选取受精后3天（3dpf）的斑马鱼暴露于不同浓度EVO溶液96 h，在暴露终点统计不同浓度处理组中斑马鱼的死亡率，绘制“量-毒”曲线，并计算10%致死浓度(LC10)。结合肝脏转基因斑马鱼[CZ16 (***（fabp 10a：ds Red；ela31：EGFP）)]的肝脏表型、吖啶橙染色和病理组织切片等确认EVO的肝损伤。在此基础上，利用泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松症模型，以头骨发育情况、头骨茜素红染色面积与累积光密度值为指标评价安全剂量EVO的抗骨质疏松症活性。基于网络药理学预测EVO治疗骨质疏松症的作用机制，并通过Real-time PCR技术进行验证。结果：EVO对7dpf斑马鱼的LC10为0.4 mg·L-1；与对照组相比，亚致死浓度(10=0.36 mg·L-1、LC10/2=0.18 mg·L-1)给药处理会引起斑马鱼肝脏荧光面积显著减小（P<0.05，P<0.01），肝细胞凋亡数量增多，肝脏组织排列紊乱松散、空泡明显，且0.36 mg·L-1组尤为明显。与对照组相比，在安全剂量条件下，0.08、0.02 mg·L- 1EVO对肝脏没有明显影响。与对照组相比，泼尼松龙给药后，斑马鱼头骨矿化面积和累积光密度值显著减少（P<0.01）；与模型组相比，EVO 0.08、0.02 mg·L-1处理组的斑马鱼头骨矿化面积、头骨累积光密度值较模型组均显著增加（P<0.01）。网络药理学预测显示EVO可能通过调节SRC、STAT3、CXCL8、ERBB2等关键靶点，调控糖尿病并发症中的脂质与动脉粥样硬化、TRP通道的炎性介质调节等相关信号通路。Real-time PCR实验结果显示EVO可以调控上述靶点的同时，也能够调控成骨细胞与破骨细胞相关基因。结论：EVO过高剂量会导致斑马鱼的肝损伤产生肝损伤，而在安全剂量条件下，EVO能能够调节相关靶点发挥抗骨质疏松症活性，为EVO的临床安全用药提供了参考，也为骨质疏松症的新药开发提供了思路。

关键词： 吴茱萸   现代药理作用   制剂设计   临床外用   研究进展  

摘要： 吴茱萸为江西道地药材“三子一壳”之一，历史悠久，应用广泛。笔者通过查阅历代本草著作梳理吴茱萸功效的历史沿革，在此基础上，以吴茱萸的现代研究为切入点，分别从现代药理作用、制剂设计、临床外用研究等方面进行文献分析。根据其研究现状，分析存在的问题。如吴茱萸现代药理作用研究聚焦于抗肿瘤、抗炎、保肝、抗阿尔茨海默症等，然目前的研究均以相应细胞模型作为研究对象，缺乏基于临床需求导向的真实世界研究；吴茱萸作为穴位贴敷之要药，常外用疗顽疾，可实现对多种神经系统疾病、心血管系统疾病和消化系统疾病的“内病外治”；但目前临床外用研究报道多而散，多集中于一些病例报道，缺乏深入的机制探索，且尚未形成规范的治疗体系，缺乏对吴茱萸外用人用经验的规范化收集整理；针对其所含主要药效成分如吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素等水溶性差、溶出慢和生物利用度低等问题，通过合理制剂设计如纳米制剂、磷脂复合物和包合物等，改善其生物利用度，有望将其开发成有效治疗肿瘤及炎症疾病的候选药物，但研究局限于以新制剂与原药之间的生物利用度变化及制剂的质量评价研究，缺乏对相关疾病治疗效果的评价，制约了其新药创制过程。本文将近年来吴茱萸现代药理作用、相关剂型设计与临床外用进行系统文献梳理，以期为吴茱萸的深入系统研究及外用制剂开发奠定基础。

关键词： 黄连吴茱萸药对   配比   传统汤剂   配方颗粒   药效比较  

摘要： 目的：比较不同比例的黄连-吴茱萸药对，其传统汤剂和配方颗粒之间的药效差异。方法：分别为不同比例黄连-吴茱萸药对的典型药效指标设计了不同的对比实验。左金丸组（黄连：吴茱萸=6:1）选用无水乙醇致大鼠胃溃疡实验测定抑制大鼠胃溃疡和胃酸分泌的药效强度，分析血液中的超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA）指标；甘露散组（黄连：吴茱萸=2:1）选用干酵母致热测大鼠肛温实验测定解热药效的强度；茱萸丸组（黄连：吴茱萸=1:1）选用小鼠小肠推进实验测定止泻药效的强度；反左金丸组（黄连：吴茱萸=1:6）选用小鼠醋酸扭体实验测定镇痛药效的强度。结果：左金丸组中两种剂型均能有效抑制大鼠胃溃疡，但不能抑制胃酸分泌，二者之间无显著性差异；甘露散组中两种剂型均能有效抑制大鼠发热，配方颗粒组与传统汤剂组相比有显著性；茱萸丸组中两种剂型均能减轻小鼠腹泻症状，传统汤剂组与配方颗粒组相比有显著性；反左金丸组中两种剂型均能减轻小鼠痛感，但二者之间无显著性差异。结论：左金丸用于治疗胃溃疡时，传统汤剂与配方颗粒药效相当；甘露散用于治疗发热时，配方颗粒药效优于传统汤剂；茱萸丸用于治疗泻下时，传统汤剂药效优于配方颗粒；反左金丸用于镇痛时，传统汤剂与配方颗粒药效相当。

关键词： 吴茱萸碱   cAMP/PKA/CREB信号通路   特应性皮炎   炎性反应  

摘要： 目的探讨吴茱萸碱(Evo)调节环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路对特应性皮炎(AD)模型大鼠的治疗作用。方法通过多次2,4-二硝基氯苯(DNCB)涂抹建立AD大鼠模型,随机分为AD组、Evo低剂量(Evo-L,5 mg/kg)组、Evo高剂量(Evo-H,10 mg/kg)组、Evo-H+H-89(5 mg/kg)组、地塞米松(0.1 mg/kg)组,并以正常大鼠为对照组,随后对各组大鼠皮损程度进行评分;腹部取血,检测血清中白细胞介素(IL)-4、cAMP、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;收集皮损组织,检测皮损组织病理学变化、肥大细胞数量、组织中PKA/CREB相关蛋白表达以及IL-4、TNF-αmRNA表达。结果与对照组相比,AD组大鼠血清中cAMP水平、皮损组织中p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达降低,皮损程度评分、IL-4、TNF-α水平、表皮厚度、肥大细胞数、皮损组织中IL-4、TNF-αmRNA表达增加(P<0.05);与AD组相比,Evo-L组、Evo-H组、地塞米松组大鼠血清中cAMP水平、皮损组织中p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达增加,皮损程度评分、IL-4、TNF-α水平、表皮厚度、肥大细胞数、皮损组织中IL-4、TNF-αmRNA表达降低(P<0.05);与Evo-H组相比,与Evo-H+H-89组大鼠血清中cAMP水平、皮损组织中p-PKA/PKA、p-CREB/CREB表达降低,皮损程度评分、IL-4、TNF-α水平、表皮厚度、肥大细胞数、皮损组织中IL-4、TNF-αmRNA表达增加(P<0.05)。结论Evo调节cAMP/PKA/CREB信号通路抑制AD模型大鼠的炎性反应及病理损伤。

关键词： 三星堆祭祀区   考古遗址   干缩开裂   病害发育   发展演化  

摘要： 针对黏性土干缩开裂发育进程问题，以三星堆祭祀区考古遗址地表干缩开裂病害为对象，通过病害发育及赋存环境现场原位长时序监测，分析病害发育后期干缩裂隙发展演化特征，探讨病害发育与赋存环境的关联性、裂隙尺寸变化的作用方式和裂隙灌浆方法治理病害的可行性。结果表明，裂隙形态和尺寸变化主要表现为部分主干裂隙不断扩展及少量次级裂隙间歇性延伸或萌生，主干裂隙宽度和深度总体不断增大并趋于相对稳定，其尺寸越大，增大越明显。在主控环境因素地下土壤含水率时空变化驱动下，不同深度土体经历不同收缩阶段，加之裂块自身应力调整，抑制尺寸较小裂隙发育，导致裂隙尺寸变化呈现出时空分异性。采用裂隙灌浆治理病害从方法层面基本可行，关键在于选择裂隙发育相对稳定时间。

关键词： 山茱萸   药理作用   药效机制   研究进展   综述  

摘要： 山茱萸是山茱萸科山茱萸属植物，为国药大宗品种之一，中医理论认为其功擅补益肝肾、涩精固脱。目前从山茱萸中已提取鉴定出包括环烯醚萜苷类、鞣质类、三萜类、黄酮类等200余种活性成分。本文从山茱萸的药效成分和分子信号通路等方面切入，对山茱萸的现代药理作用及机制研究进展进行归纳和总结。实验研究表明，山茱萸提取物及其活性成分具有抗衰老、抗氧化、保护神经系统、保护心血管系统、保肝护肾、调节免疫、抗肿瘤、调节糖脂代谢、抗骨质疏松、抑菌、抗炎等多种药理作用，但其临床研究仍在进行中。本文提出展望，旨在为山茱萸的进一步研究以及临床应用提供参考。

关键词： 山茱萸   鞣质   提取纯化   含量测定   生物活性  

摘要： 山茱萸是我国使用量最大的四十种主要中药材之一，山茱萸鞣质具有抗氧化、抗炎、调节脂代谢、降血糖、抗阿尔茨海默病和帕金森病、免疫抑制作用等多种生物活性，已成为近几年来有关山茱萸基础研究及产品开发的热点。本文综述了近二十年来，山茱萸鞣质的提取、分离纯化和含量测定方法及生物活性的研究报道。结果表明，山茱萸鞣质的提取方法多用水煎法、浸渍法、回流提取法、超声波提取法等；鞣质的分离纯化有柱色谱法、溶剂萃取法、高速逆流色谱法等，含量测定方法主要为分光光度法和高效液相色谱法；生物活性及作用机制研究多停留在离体水平。本综述可为山茱萸鞣质的深入研究和临床应用及相关产品开发提供参考。

关键词： 吴茱萸碱   NF-κB   膝骨关节炎   巨噬细胞极化  

摘要： 目的探索吴茱萸碱(EV)调节核转录因子-κB(NF-κB)通路对膝骨关节炎(OA)大鼠巨噬细胞极化的影响。方法取SD大鼠采用关节腔内注射碘乙酸钠(MIA)法建立膝骨OA模型,随机分为模型组、EV低剂量(6.9 mg/kg)组、EV高剂量(13.8 mg/kg)组、EV高剂量(13.8 mg/kg)+佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)(2μg/kg)组,每组10只,另取10只大鼠关节腔内注射等量生理盐水设为对照组,以EV和PMA分组干预后检测各组大鼠关节压痛阈值、关节肿胀率、关节活动度与步态评分;番红O-固绿、HE染色分别检测各组大鼠软骨与滑膜组织病理形态;流式细胞术检测各组大鼠关节滑膜组织巨噬细胞极化情况;ELISA法检测各组大鼠血清与关节液中促炎因子[白细胞介素(IL)-6、IL-1、IL-1β]水平;免疫印迹法检测大鼠关节软骨与滑膜组织NF-κB通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠软骨与滑膜组织形态发生明显病理损伤变化,关节压痛阈值、关节活动度明显降低(均P<0.05),关节肿胀率、滑膜厚度、步态评分、软骨病理评分、滑膜病理评分、滑膜组织M1型巨噬细胞占比与M1/M2比值、血清与关节液中IL-6、IL-1、IL-1β水平、软骨与滑膜组织p-核因子κB抑制因子α(p-IκB-α)/IκB-α、p-NF-κB p65/NF-κB p65明显升高(均P<0.05);与模型组比较,EV低剂量组、EV高剂量组大鼠软骨与滑膜组织形态病理损伤均减轻,关节活动度、滑膜组织M2型巨噬细胞占比均升高(均P<0.05),关节肿胀率、滑膜厚度、步态评分、软骨病理评分、滑膜病理评分、滑膜组织M1型巨噬细胞占比与M1/M2比值、血清与关节液中IL-6、IL-1、IL-1β水平、软骨与滑膜组织p-IκB-α/IκB-α、p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(均P<0.05),高剂量EV的作用更强;PMA可减弱EV对OA大鼠上述各指标的作用。结论EV可通过阻止NF-κB信号通路激活而促使M2型巨噬细胞极化并抑制M1型巨噬细胞极化,进而减轻膝骨OA大鼠炎症,改善其关节疼痛、肿胀、活动受限等症状。

关键词： 黄芪-山茱萸   足细胞   凋亡   IL-6   IL-1β   nephrin   podocin   desmin   WT-1   JAK2/STAT3通路   体外实验  

摘要： 目的:探究黄芪-山茱萸对高糖诱导肾足细胞损伤的保护作用及机制。方法:CCK8法检测黄芪-山茱萸(0、175、350、700、1400、2800 mg/L)对足细胞(MPC-5)活性的影响。30 mmol/L葡萄糖诱导MPC-5细胞损伤,350、700、1400 mg/L黄芪-山茱萸进行干预;ELISA测定MPC-5细胞IL-6、IL-1β水平,流式细胞术测定细胞凋亡,免疫荧光染色测定MPC-5肾病蛋白(nephrin)、足细胞素(podocin)表达,qRT-PCR测定MPC-5细胞nephrin、podocin、结蛋白(desmin)、Wilm瘤基因1(WT-1)基因表达,Western blot测定细胞Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路磷酸化表达。结果:2800 mg/L黄芪-山茱萸可显著抑制MPC-5细胞活性(P<0.01)。MPC-5细胞经高糖诱导后,IL-6、IL-1β水平升高,凋亡增加,nephrin、podocin、WT-1表达降低,desmin表达升高,JAK2/STAT3信号通路磷酸化表达增加(P<0.01)。350、700、1400 mg/L黄芪-山茱萸可抑制高糖诱导MPC-5细胞IL-6、IL-1β水平升高和凋亡,增强nephrin、podocin、WT-1表达,降低desmin表达,抑制JAK2/STAT3信号通路磷酸化表达(P<0.05)。结论:黄芪-山茱萸可减轻高糖诱导足细胞炎症和凋亡损伤,其机制与抑制JAK2/STAT3通路磷酸化有关。