关键词： 生物钟   昼夜节律   近视   眼轴   脉络膜  

摘要： 随着社会的发展,近视的发病率逐年上升,近视人群逐年增加,已经成为一个重大的公共卫生问题,因此对近视的发病机制和防控措施的研究迫在眉睫。近年来对生物钟在近视发展中起到的作用逐渐引起学者们的兴趣,现本文从生物钟在近视发展中对眼轴、视网膜、脉络膜的影响,当代社会与生物钟紊乱角度做一简单的综述,以期为近视发病机制以及防控措施的研究提供新的思路。

关键词： 糖尿病视网膜病变   昼夜节律   生物钟基因  

摘要： 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病患者最常见的微血管并发症,已成为全球工作年龄人群视力障碍的主要原因之一。DR的发生是多种机制共同作用的结果,越来越多的研究表明昼夜节律及生物钟基因与DR的发病密切相关。昼夜节律是受生物钟基因调控,以24h为周期,与外界明暗变化相一致的生理过程,生物钟调控机体的各种生理活动。昼夜节律紊乱通过影响糖尿病患者的血糖水平和眼部的生理稳态等诱导DR的发生,生物钟基因可能通过调控DR的氧化应激反应、炎症反应、视网膜自噬节律、线粒体功能障碍以及内皮祖细胞功能等各方面参与DR的发病。本文介绍了昼夜节律的产生及调控机制,以及视网膜内在昼夜节律生物钟,深入探讨了昼夜节律系统以及生物钟基因在DR发生发展过程中的影响,旨在为DR的预防及治疗提供参考。

关键词： 昼夜节律   肝脏   时钟基因   肝俞   机制研究  

摘要： 目的 观察电针肝俞对昼夜节律紊乱小鼠外周时钟基因的影响,分析各实验条件下,不同时间点Clock、Bmal1基因的分布规律,为外周生物钟基因时间分布提供参考,并探讨电针治疗睡眠节律紊乱的潜在机制。方法 将72只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分成空白组、模型组、肝俞组和非经非穴组,每组18只。空白组常规饲养;其余3组采取光暗交替法L(光)∶D(暗)=2 h∶2 h造模法持续5 d,模型组只捆绑不针刺;肝俞组针刺肝俞穴;非经非穴组选取非经非穴部位进行针刺。电针干预5 d后,于第6天02∶00开始,每组每4 h取材1次,共取材6次。采用PCR法以及Western blot法检测各组小鼠肝脏内的Clock和Bmal1基因mRNA的表达水平和蛋白表达含量,同时用余弦函数计算出各组基因的节律性。结果 与模型组比较,肝俞组中Clock与Bmal1基因表达恢复时间节律(P<0.05)。与模型组比较,非经非穴组内Clock与Bmal1基因表达无时序性(P>0.05);肝俞组Clock、Bmal1的蛋白表达量较模型组明显降低且恢复节律性(P<0.05)。结论 小鼠肝脏中Clock和Bmal1时钟基因呈时序性变化,电针肝俞穴可改善小鼠睡眠,其机制可能与调节时钟基因Clock和Bmal1,降低两种基因及蛋白表达,恢复正常睡眠节律有关。

关键词： 天王补心丹加减方   睡眠剥夺   昼夜节律基因   氧化应激   糖脂代谢   炎症反应   大鼠  

摘要： 目的探讨天王补心丹加减方(BXDJJ)改善大鼠睡眠剥夺损伤的作用及机制。方法(1)将24只SD雄性大鼠随机分为地西泮组(3 mg·kg^(-1))和BXDJJ低、中、高剂量组(4.8、9.6、19.2 g·kg^(-1)),以24 h基线睡眠作为对照,进行单次灌胃给药,从脑电水平考察各组药物的镇静催眠作用。(2)另取32只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、地西泮组(3 mg·kg^(-1))和BXDJJ组(9.6 g·kg^(-1)),灌胃给药,每日1次,连续7 d。复制多平台水环境睡眠剥夺大鼠模型,每天睡眠剥夺20 h,连续7 d。实验过程中观察大鼠一般状态,于睡眠剥夺第1、4、7天检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(H_(2)O_(2))、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)及血糖水平。睡眠剥夺第7天,进行大鼠前肢抓力测试和24 h自发性活动监测;采用ELISA法测定血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)水平;采用生化反应试剂盒检测前额叶皮层及下丘脑组织中SOD、MDA、H_(2)O_(2)水平;Western Blot法检测下丘脑组织中昼夜节律基因BMAL1、PER2的蛋白表达水平。结果(1)与基线比较,BXDJJ中、高剂量组大鼠的总睡眠时间百分比明显增加(P<0.05),BXDJJ具有镇静催眠作用,选择BXDJJ中剂量(9.6 g·kg^(-1))进行后续实验。(2)与正常对照组比较,模型组大鼠前肢抓力明显降低(P<0.05),在2∶00时的自发性活动总路程显著减少(P<0.01),暗周期活动度明显降低(P<0.05);第1天的血清SOD活力显著下降(P<0.01),H_(2)O_(2)与MDA含量明显增加(P<0.05,P<0.01),第4天的血清H_(2)O_(2)和MDA含量均明显增加(P<0.05,P<0.01),第7天的血清H_(2)O_(2)含量显著增加(P<0.01);皮层H_(2)O_(2)和MDA水平均明显上升(P<0.05,P<0.01),下丘脑中SOD活力明显下降(P<0.05),MDA水平显著上升(P<0.01);第1、4天的血清NEFA、TC水平均显著升高(P<0.01),第4天的血糖水平显著升高(P<0.01);血清中IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.01),IL-10水平明显降低(P<0.05);下丘脑组织中BMAL1蛋白表达显著下调(P<0.01),PER2蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,BXDJJ组大鼠前肢抓力明显升高(P<0.05),在2∶00时的自发性活动总路程明显增加(P<0.05);第1天的血清SOD活力明显升高(P<0.05),H_(2)O_(2)和MDA含量均明显减少(P<0.05,P<0.01),第4天的血清H_(2)O_(2)和MDA含量均明显减少(P<0.05,P<0.01);皮层H_(2)O_(2)和MDA水平明显下降(P<0.05),下丘脑中SOD活力明显升高(P<0.05),MDA水平明显下降(P<0.05);第1、4天的血清NEFA、TC水平显著降低(P<0.05,P<0.01),第4天的血糖水平显著下降(P<0.01);血清中IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05),IL-10水平明显升高(P<0.05);下丘脑组织中BMAL1蛋白表达明显上调(P<0.05),PER2蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论BXDJJ以镇静催眠作用为基础,可能通过调节昼夜节律基因BMAL1、PER2的表达,从而改善睡眠剥夺导致的大鼠昼夜节律异常、氧化应激、糖脂代谢紊乱及炎症反应。

关键词： 帕金森病   血压昼夜节律   血压变异性   动脉粥样硬化   相关性  

摘要： 目的:探讨帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血压昼夜节律、血压变异性与动脉粥样硬化的关系。方法:连续收集2020年3月至2022年6月,于张家口市第一医院就诊的192例PD患者,对患者进行24h动态血压监测(ambulatory blood pressure monitoring,ABPM),记录24h、日间、夜间平均血压均值(收缩压、舒张压、脉压均值),根据ABPM结果分为正常昼夜节律组(n=58)和异常昼夜节律组(n=134)。所有入选患者记录人口学资料、病史、体检,生化指标,记录入组次日患者全天、日间、夜间各时段对应的血压标准差(收缩压、舒张压标准差),动态动脉硬化指数、完善颈动脉彩超,记录颈动脉内膜中层厚度(carotid intimamedia thickness,CIMT)、颈动脉斑块数量及性质、踝肱指数(ankle-brachial index,ABI)。采用Pearson相关性分析评估血压和动脉粥样硬化的相关性。结果:两组相比,异常昼夜节律组患者更多合并高血压、直立性低血压(orthostatic hypotension,OH),均为P<0.05。异常昼夜节律组全天收缩压标准差、晚间收缩压标准差及晚间舒张压标准差明显高于正常昼夜节律组患者(均为P<0.05)。异常昼夜节律组患者CIMT、动态动脉硬化指数、易损斑块发生率均明显增大,ABI值明显降低,斑块面积明显增加,差异有统计学意义(均为P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,夜间收缩压(r=-0.374,P=0.014)、全天收缩压标准差(r=-0.330,P=0.018)、全天舒张压标准差(r=-0.312,P=0.025)、IMT(r=-0.153,P=0.008)、动态动脉硬化指数(r=-0.4110,P=0.025)、斑块数量(r=-0.263,P=0.040)和斑块面积(r=-0.219,P=0.037)均与ABI均呈负相关。结论:PD患者血压昼夜节律异常发生率高,夜间高血压广泛存在,血压变异性、血压昼夜节律异常与动脉粥样硬化关系密切。

关键词： 卵巢浆液性癌   Bmal1   p53   Vimentin   预后  

摘要： 目的 探讨节律基因Bmal1在卵巢癌发生、发展的作用。方法 收集2020年9月至2022年2月经山西医科大学第一医院病理确诊的卵巢浆液性癌病例,分为节律异常组和节律正常组,各30例。检测Bmal1、p53(突变型)、Vimentin在卵巢浆液性癌中的表达,采用实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测两组患者肿瘤组织中Bmal1 mRNA和蛋白的表达,用免疫组织化学法(immunohistochemistry, IHC)检测患者肿瘤组织中p53(突变型)蛋白、Vimentin蛋白的表达,并运用Image-ProPlus软件分析表达强度。运用χ2检验分析节律和临床病理特征的关系。运用Spearman相关性分析Bmal1蛋白和p53(突变型)蛋白、Bmal1蛋白和Vimentin蛋白的表达相关性。结果 节律异常组患者肿瘤组织中Bmal1 mRNA和蛋白的表达低于节律正常组(P<0.000 1),p53(突变型)MOD值和Vimentin MOD值高于节律正常组(P<0.001)。节律异常组高级别卵巢浆液性癌(high grade serous ovarian carcinoma, HGSOC)所占比例、Ⅲ+Ⅳ期者所占比例、有淋巴结转移者所占比例均高于节律正常组(P<0.05);两组<55岁人数所占比例差异无统计学意义。Bmal1 mRNA和蛋白在HGSOC、Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移患者中表达分别低于在低级别卵巢浆液性癌(low grade serous ovarian carcinoma, LGSOC)、Ⅰ+Ⅱ期、无淋巴结转移患者中表达(P<0.001);Bmal1 mRNA和蛋白在<55岁和≥55岁患者中表达量差异无统计学意义。Spearman相关性分析显示:Bmal1蛋白和p53(突变型)蛋白表达呈负相关;Bmal1蛋白和Vimentin蛋白表达呈负相关。结论 生物钟节律可以影响Bmal1的表达,Bmal1与卵巢癌患者预后相关。

关键词： 浙江大学医学院   肝细胞癌   昼夜节律   生物节律   医学研究院   基因调控   一带一路  

摘要： 2023年1月3日,浙江大学医学院附属第四医院“/一带一路”国际医学院/国际健康医学研究院曲萌研究员团队和美国南加州大学Steve ***教授合作在《美国国家科学院院刊》(PNAS)在线发表了题为“Circadian regulator BMAL1::CLOCK promotes cell proliferation in hepatocellular carcinoma by controlling apoptosis and cell cycle”的研究论文(DOI:10.1073/pnas.2214829120),报道了生物节律核心转录因子复合体BMAL1::CLOCK对肝细胞癌的促进作用。

关键词： 缺血性卒中   动脉粥样硬化   杓型血压  

摘要： 目的调查血压昼夜节律变化与颅内动脉粥样硬化斑块负荷及易损性的相关性。方法回顾性分析一个颅内动脉粥样硬化卒中影像队列中的267例卒中患者的临床及影像特征,根据24 h动态血压将其分为杓型血压组、非杓型血压组和反杓型血压组,通过高分辨磁共振血管壁成像及图像分析获得颅内动脉Willis环近端血管壁斑块特征,包括最大管壁厚度、斑块内出血、中重度狭窄(狭窄程度≥50%)、多发斑块(斑块数量≥3个)等指标。比较3组基线特征及颅内动脉粥样硬化斑块特征,校正混杂因素后,采用logistic回归分析血压昼夜节律变化模式与颅内动脉粥样硬化斑块特征的关系。结果杓型血压组、非杓型血压组和反杓型血压组分别有36、119及112例。(1)反杓型血压组年龄更大(反杓型血压组∶非杓型血压组∶杓型血压组=67.3∶64.6∶61.9岁,P=0.042),合并糖尿病比例更高(反杓型血压组∶非杓型血压组∶杓型血压组=46.4%∶41.2%∶22.2%,P=0.037);血压指标中,反杓型血压组24 h平均收缩压更高(反杓型血压组∶非杓型血压组∶杓型血压组=144∶139∶136 mmHg,P=0.025)。(2)杓型血压组、非杓型血压组和反杓型血压组的平均最大管壁厚度分别为2.39 mm、2.48 mm和2.52 mm(P=0.554),斑块内出血比例分别为33.3%(12/36)、36.1%(43/119)和37.5%(42/112)(P=0.901);3组中重度狭窄及多发斑块比例差异亦无统计学意义(中重度狭窄比例在杓型血压组、非杓型血压组和反杓型血压组分别为22.2%、32.8%和37.5%,P=0.236;多发斑块比例在3组分别为63.9%、73.9%和75.0%,P=0.407)。(3)多因素logistic回归分析结果显示:年龄(OR 1.053,95%CI 1.027~1.080,P<0.001)和糖尿病(OR 2.194,95%CI 1.186~4.057,P=0.012)与颅内动脉多发斑块独立相关。未发现血压昼夜节律变化模式与颅内动脉多发斑块、中重度狭窄以及斑块内出血存在相关性(均P>0.05)。结论增龄和糖尿病是颅内动脉多发斑块的独立危险因素,血压昼夜节律变化与颅内动脉粥样硬化斑块易损性之间的关系还有待进一步研究。

关键词： 国际期刊   促进作用   浙江大学   昼夜节律   生物节律   肝细胞癌   医学研究院   一带一路  

摘要： 2023年1月3日,浙江大学国际健康医学研究院、“一带一路”国际医学院、医学院附属第四医院曲萌课题组和美国南加州大学Steve A. Kay课题组合作在国际期刊《PNAS》上发表了一篇研究,首次报道了生物节律核心转录因子复合体BMAL1::CLOCK对肝细胞癌的促进作用。

关键词： 非小细胞肺癌   肺腺癌(LUAD)   昼夜节律基因   预后  

摘要： 目的:非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是全球最常见的恶性肿瘤之一。肺癌是导致癌症死亡的首要原因,占所有癌症死亡的18.4%,在全球所有类型的癌症中发病率最高(11.6%)。肺腺癌(Lung adenocarcinoma,LUAD)是非小细胞肺癌的主要亚型,预后较差,且其发病率逐年上升。近年来,昼夜节律相关基因(circadian rhythm-related genes,CRRGs)被证实与肿瘤的发生发展相关,许多研究表明,昼夜节律相关基因(CRRGs)调节细胞增殖、恶性肿瘤细胞凋亡以及神经内分泌和免疫功能。昼夜节律的破坏在肿瘤发生中起关键作用,并促进肿瘤特征的建立。此外,肿瘤的发生直接损害昼夜节律。但CRRGs与肺腺癌的关系尚不明确。由于CRRGs与肿瘤的相关性,我们有理由相信CRRGs将成为肺腺癌预后的重要指标,并指导肺腺癌预后的治疗。方法:基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库,探究肺腺癌在不同CR组中的生物学功能和免疫细胞浸润情况,并利用主成分分析(principal component analysis,PCA)量化CRRGs。为此我们通过单因素分析,多因素分析,主成分分析等方式建立了预后模型,建立肺腺癌预后评分系统(CRscore),将数据库中所有患者按照评分分为高低评分组,并对高低评分组进行比较,分别比较了临床特征(包括年龄、性别、生存状态和肺腺癌分期),肿瘤突变负荷(TMB),免疫检查点,以及对化疗药物的敏感性,最后通过利用免疫印迹分析(western blot)和实时荧光定量PCR(q RT-PCR)来验证评分系统的科学性。探讨CRRGs与肺腺癌预后的关系。并通过CRscore来初步指导临床对于不同患者的药物治疗。结果:患者被分为3类(A、B和C)。3类患者的生物学特征(如生存、免疫细胞浸润和基因富集)存在显著差异(P<0.001)。然后,我们建立了CRscore的实用性,它可能可以预测肺腺癌的预后。得到了一些结论:高肿瘤突变负荷(TMB)并且CRscore高的患者生存时间更长。可以推测,将CRscore与肿瘤突变负荷(TMB)联合可以提高肿瘤突变负荷(TMB)预测肺腺癌患者免疫治疗效果的敏感性。单因素分析和多因素分析均显示,年龄、分期和CRscore是本研究的独立预后因素,免疫检查点蛋白在CRscore高的患者中表达低,在CRscore低的患者中表达高。CRscore高的患者对顺铂、吉西他滨、紫杉醇和长春瑞滨敏感(P<;0.05),CRscore低的患者对甲氨蝶呤敏感(P<0.05)。这些结果表明,CRscore工具是免疫治疗预后和临床疗效的可靠生物学指标。CRscore高的患者较CRscore低的患者预后更好,对化疗更敏感。结论:昼夜节律相关基因(CRRGs)可用于评估肺腺癌患者的预后。使用CRscore工具量化肺腺癌患者的昼夜节律相关基因可能有助于指导未来的个性化肿瘤免疫治疗策略。因此,CRscore可能是肺腺癌的预后评估工具。