关键词： CD4+T细胞   调节性T细胞   FOXP3   前列腺素E2   白三烯B4  

摘要： 目的:初始CD4T细胞接受抗原刺激后,首先分化为Th0细胞,在不同的细胞因子作用下,可分化为Th1、Th2、Th17及Treg（regulatory T cells, Treg）细胞,发挥不同的生物学作用。Treg细胞具有免疫抑制作用,主要功能是维持免疫耐受和免疫稳态,并与类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）密切相关。Treg细胞是由CD4T细胞在TGF-β的作用下分化而来,而叉状/翼状螺旋转录因子（forkhead/wingedhelix transcription factor, FOXP3）是检测CD4T细胞向Treg细胞分化程度的特异性转录因子。 前列腺素E2（Prostaglandin E2, PGE2）和白三烯B4（leukotriene B4, LTB4）均为花生四烯酸的代谢产物,是RA病程中的重要炎症介质。目前,临床上多用非甾体类抗炎药治疗RA,其作用机制正是通过抑制环氧化酶进而抑制PGE2的生成。有研究表明,应用LTB4受体阻断剂可以治疗RA。本室以往研究证实,PGE2通过前列腺素受体EP2和EP4抑制Th0细胞向Treg细胞分化,参与机体的免疫调节。LTB4可抑制Th0分化为Treg细胞,且抑制胶原诱导的关节炎（collagen induced arthritis,CIA）小鼠Th0细胞分化为Treg细胞,参与机体免疫调节。那么,PGE2和LTB4是否可以调节人CD4T细胞向Treg细胞的分化,目前尚无文献报道,因此本课题以人外周血CD4T细胞为研究对象,观察PGE2和LTB4对Treg细胞分化的影响,进而确定PGE2和LTB4是否通过调节Treg细胞的分化,参与人体的免疫调节,以期进一步揭示二者在RA中的免疫调节作用。 方法: 1 PGE2对Treg细胞分化的调节 （1）免疫磁珠法分选人外周血CD4T细胞,流式细胞术检测分选细胞的纯度;收集分选后的细胞,接种于anti-CD3预先包被的24孔板,加入anti-CD28和TGF-β1,诱导CD4T细胞向Treg细胞分化,于不同时间收集细胞,观察FOXP3 mRNA的时间依从性表达;收集分选后的细胞,接种于anti-CD3预先包板的24孔板,加入anti-CD28、TGF-β1和IL-2,7d后收集细胞,流式细胞术检测CD+CD25FOXP3细胞数量。 （2）不同浓度PGE2对Treg细胞分化的影响。PGE2对Treg细胞FOXP3 mRNA表达的影响:分为四组,对照组和PGE2（0.1μM、1μM、10μM）组,孵育36h,收集细胞,观察FOXP3 mRNA的表达情况;不同时间10μM PGE2对Treg细胞分化的影响:分为对照组和PGE2 10μM组,于不同时间收集细胞,观察FOXP3 mRNA的表达情况;PGE2对CD+CD25 FOXP3细胞数量的影响:分为四组,对照组和PGE2 （0.1μM、1μM、10μM）组,培养7d,收集细胞,流式细胞术观察CD4CD25FOXP3细胞的数量。 2 LTB4对Treg细胞分化的调节 LTB4对Treg细胞FOXP3 mRNA表达的影响:分为四组,对照组和LTB4 （0.01μM、0.1μM、1μM）组,孵育36h,收集细胞,观察FOXP3 mRNA的表达情况;LTB4对CD+CD25FOXP3细胞数量的影响:分为四组,对照组和LTB4 （0.01μM、0.1μM、1μM）组,培养7d,流式细胞术检测CD4 CD25FOXP3细胞的数量。 应用SPSS13.0软件进行统计学分析,数据用均数±标准差（x±s）表示,各组均数的比较行单因素方差分析（one-way ANOVA）,用最小显著差法（least significant difference, LSD）作两两比较,P<0.05为有显著性差异。 结果: 1 PGE2对Treg细胞分化的调节 （1）经磁珠分选后,流式细胞仪检测CD4T细胞的纯度达97%以上;在anti-CD3和anti-CD28,TGF-β1作用下Treg细胞关键转录因子FOXP3 mRNA在36h达表达高峰;在anti-CD3和anti-CD28存在的条件下,TGF-β1和IL-2作用7d后,可使（72.9533±17.2270）%的细胞同时表达CD4、CD25和FOXP3,证明体外成功诱导CD4T细胞分化为Treg细胞。 （2）不同浓度的PGE2在CD4T细胞诱导分化为Treg细胞36h时均对FOXP3 mRNA的表达有抑制作用,且呈剂量依赖性,PGE2（0.1μM、1μM、10μM）组（0.8544±0.0745、0.6972±0.1047、0.2220±0.0377）

关键词： 英国诺丁汉大学   寄生虫感染   人体免疫系统   B细胞   调节性   影子   验证   多发性硬化  

摘要： 据2010年6月7日《参考消息》援引美国趣味科学网站6月2日报道，人罹患多发性硬化症（MS）后，免疫系统会像对待“外来”细胞一样攻击人体自身的细胞。最近的几项实验显示，感染寄生虫能缓解MS病人的炎症反应并降低复发率。据此，英国诺丁汉大学的克里斯·康斯坦丁内斯库及其同事计划让32名MS病人感染钩虫。

关键词： 调节性T细胞   供体特异性输血   可诱导共刺激分子   心脏移植耐受  

摘要： 目的 观察阻断ICOS/B7h信号的供体特异性输血（DST）对异基因小鼠心脏移植术后体内CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的影响.方法 按陈氏方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验分3组,异基因组及同基因组：供心分别来源于BALB/C和C57BL/6小鼠,受体均为C57BL/6小鼠,未予治疗.治疗组：移植当天给予受体鼠（C57BL/6）尾静脉注射5×106 ICOS-Fc靶定的供体（BALB/C）脾B淋巴细胞,d0～6连续给予受体鼠尾静脉注射ICOS-Fc 200 μg/d.术后统计各组移植物的存活时间,通过流式细胞术检测受体鼠外周血中CD4＋CD25＋Treg的亚群比例,利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测移植物中FOXP3的mRNA表达,在混合淋巴细胞反应中检测CD4＋CD25＋Treg对CD4＋CD25-效应T细胞（Teff）的增殖抑制效率.结果 与异基因组比较,治疗组心脏移植物存活时间明显延长[（84.38±29.14）d比（7.00±0.76）d,P＜0.01].各组中,治疗组受体外周血中CD4＋CD25＋Treg亚群比例显著上调[（15.60±5.69）%,P＜0.01].与其他两组比较,治疗组心脏移植物中FOXP3 mRNA表达显著上调.以正常鼠为对照,耐受鼠脾脏中获取的CD4＋CD25＋Treg能够更高效地抑制CD4＋CD25-Teff在混合淋巴细胞培养中的增殖效应.结论 通过阻断ICOS/B7h信号的DST可以诱导异基因小鼠心脏移植耐受,CD4＋CD25＋Treg在耐受的形成与维持中均起着重要作用.

关键词： RETINOIC-ACID   DIFFERENTIATION   HOMEOSTASIS   RESPONSES   DISEASE   FOXP3   PD-1  

摘要： Oral tolerance is a key feature of intestinal immunity, generating systemic tolerance to fed antigens. However, the molecular mechanism mediating oral tolerance remains unclear. In this study, we examined the role of the B7 family members of costimulatory molecules in the establishment of oral tolerance. Deficiencies of B7-H1 and B7-DC abrogated the oral tolerance, accompanied by enhanced antigen-specific CD4(+) T-cell response and IgG(1) production. Mesenteric lymph node (MLN) dendritic cells (DCs) displayed higher levels of B7-H1 and B7-DC than systemic DCs, whereas they showed similar levels of CD80, CD86, and B7-H2. MLN DCs enhanced the antigenspecific generation of CD4(+)Foxp3(+) inducible regulatory T cells (iT(regs)) from CD4(+)Foxp3(+) T cells rather than CD4(+) effector T cells (T-eff) relative to systemic DCs, owing to the dominant expression of B7-H1 and B7-DC. Furthermore, the antigen-specific conversion of CD4(+)Foxp3(+) T cells into CD4(+)Foxp3(+) iT(regs) occurred in MLNs greater than in peripheral organs during oral tolerance under steady-state conditions, and such conversion required B7-H1 and B7-DC more than other B7 family members, whereas it was severely impaired under inflammatory conditions. In conclusion, our findings suggest that B7-H1 and B7-DC expressed on MLN DCs are essential for establishing oral tolerance through the de novo generation of antigen-specific CD4(+)Foxp3(+) iT(regs). (Blood. 2010;116(13):2266-2276)

关键词： HLA-B27   调节性T细胞   流式细胞术  

摘要： 目的了解CD4+CD25+调节性T细胞在HLA-B27阳性患者外周血中的表达水平及其对患者细胞免疫和体液免疫的影响。方法用流式细胞仪采用直接免疫荧光法测定37例HLA-B27阳性患者和20例健康对照者外周血淋巴细胞表面CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+及CD4+CD25+细胞的表达情况。用颗粒增强散射免疫比浊法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果 (1)HLA-B27阳性患者CD3+、CD3+CD4+、CD19+细胞较正常对照组显著增高(P<0.05),CD3+CD8+细胞较正常对照组显著降低(P<0.05);(2)HLA-B27阳性患者CD4+CD25+调节性T细胞较对照组显著降低(P<0.01);(3)HLA-B27阳性患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平均较对照组显著增高(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞数量明显减少,对CD4+和CD8+T细胞活化和增殖的抑制能力下降,是HLA-B27阳性患者体内细胞免疫和体液免疫亢进的原因之一。

关键词： B淋巴细胞   调节性   生物学   皮肤疾病  

摘要： 调节性B细胞是一类具有免疫调节功能的B细胞亚群，目前已经在小鼠体内得到证实。该细胞亚群的起源与表型目前分歧较大。调节性B细胞主要通过细胞间直接接触和分泌IL-10、转化生长因子-β等方式下调免疫反应。现已发现这种B细胞亚群与SLE、接触性超敏反应等皮肤病相关，还参与多种疾病或生物学过程。对调节性B细胞的发现、起源、功能及作用机制、与疾病的关系、研究前景和挑战进行概述。

关键词： BONE-MARROW-TRANSPLANTATION   IFN-GAMMA   ACTIVATION   CYTOKINE   DIFFERENTIATION   RECEPTOR   INTERLEUKIN-2   TRANSCRIPTION   HOMEOSTASIS   SURVIVAL  

摘要： Overexpression of a constitutively active form of Stat5b (Stat5b-CA) increases regulatory T cells (Tregs). We show that Stat5b-CA transgenic (TG) CD4(+) T cells had a markedly reduced graft-versus-host disease (GVHD) capacity versus wildtype (WT) T cells. Stat5b-CA TG versus WT CD4(+) T cells had a higher proportion of Tregs, which were superior in suppressing alloresponses mediated by CD4(+)CD25(-) effector T cells (Teffs). By day 5 after transplantation, Stat5b-CA TG Tregs had expanded approximately 3-fold more than WT Tregs. Purified Stat5b-CA TG Tregs added to WT CD4(+)CD25(-) Teffs were superior on a per-cell basis for inhibiting GVHD versus WT Tregs. Surprisingly, rigorously Treg-depleted Stat5b-CA TG versus WT CD4(+)CD25(-) Teffs caused less GVHD lethality associated with diminished Teff proinflammatory and increased Th2 anti-inflammatory cytokine responses. Reduced GVHD by Stat5b-CA TG versus WT Teffs could not be explained by conversion into Tregs in day 10 posttransplantation spleen or small intestine. In addition, Stat5b-CA TG Teffs retained a graft-versus-leukemia response. These results indicate a major role for Stat5 in Treg expansion and potency along with a lesser but significant role in Teff activation and suggest a strategy of pharmacologic Stat5b up-regulation as a means of decreasing GVHD while retaining a graft-versus-leukemia effect. (Blood. 2010; 116(3): 466-474)

关键词： B细胞   调节性   免疫耐受   自身抗体   免疫功能   抗原递呈   细胞因子   细胞亚群  

摘要： B细胞的典型特征是可产生包括自身抗体的各种抗体. 然而,B细胞还有其他的免疫功能,例如产生各种细胞因子和次级抗原递呈[1]. 与T细胞一样,B细胞中也有致病性和调节性的细胞亚群. 研究发现抗CD45RB抗体可诱导稳定的免疫耐受模型,在诱导免疫耐受时需有宿主B淋巴细胞的参与[2]. 最近研究表明,体内确实存在能产生白细胞介素10(IL-10)或转化生长因子β1(TGF-β1)等细胞因子的调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs). Bregs通过产生抑制性细胞因子或分泌抑制性抗体影响其他免疫细胞,在免疫耐受中发挥作用[1]. 本文将对Bregs在免疫耐受中的作用机制做一综述

关键词： 调节性B细胞   自身免疫病   IL-10  

摘要： 以往认为，B淋巴细胞在自身免疫病中作为致病性淋巴细胞发挥作用。近年却发现，在自身免疫病小鼠模型中，采用B细胞清除疗法会加重疾病进程，提示B细胞具有免疫调节功能。调节性B细胞（Breg）是新近发现的一群新的B细胞亚群，它存在于B细胞多个亚型中。Breg通过刺激其表面分子，诱导释放调节性细胞因子如IL-10发挥调节作用。在不同自身免疫性疾病中，各种免疫细胞都可以成为Breg作用的靶细胞，表明Breg在自身免疫病复杂网络中的强大调节作用。

关键词： IMMUNOLOGICAL SELF-TOLERANCE   BONE-MARROW-TRANSPLANTATION   DIFFERENTIAL EXPRESSION   AUTOIMMUNE-DISEASES   TGF-BETA   MICE   LYMPHOCYTES   PERFORIN   MECHANISMS   RESPONSES  

摘要： Regulatory T (T-reg) cells can suppress a wide variety of immune responses, including antitumor and alloimmune responses. The mechanisms by which T-reg cells mediate their suppressive effects depend on the context of their activation. We previously reported that granzyme B is important for T-reg cell-mediated suppression of antitumor immune responses. We therefore hypothesized that granzyme B may likewise be important for suppression of graft-versus-host disease (GVHD). We found that allogeneic mismatch induces the expression of granzyme B in mixed lymphocyte reactions and in a model of graft-versus-host disease (GVHD). However, wild-type and granzyme B-deficient T-reg cells were equally able to suppress effector T (T-eff) cell proliferation driven by multiple stimuli, including allogeneic antigen-presenting cells. Surprisingly, adoptive transfer of granzyme B-deficient T-reg cells prevented GVHD lethality, suppressed serum cytokine production in vivo, and prevented target organ damage. These data contrast strikingly with our previous study, which demonstrated that granzyme B plays a nonredundant role in T-reg cell-mediated suppression of antitumor responses. Taken together, these findings suggest that targeting specific T-reg cell-suppressive mechanisms, such as granzyme B, may be therapeutically beneficial for segregating GVHD and graft-versus-tumor immune responses. (Blood. 2010;115:1669-1677)