关键词： 免疫性血小板减少症   调节性   细胞水平   外周血   胶原诱导性关节炎   系统性红斑狼疮   自身免疫性疾病   B细胞亚群  

摘要： 调节悱B细胞（regulatory B cell，Breg细胞）是近年术发现的一类具有免疫调节功能的B细胞亚群。研究发现，Breg细胞存系统性红斑狼疮（SLE）、胶原诱导性关节炎、炎症性肠病等自身免疫性疾病的发病中起重要作用。

关键词： 调节性B细胞   IL-10   LPS   CD4+CD25-T细胞   调节性T细胞  

摘要： 目的：评估小鼠不同组织中B10细胞的比例，分离B10细胞并鉴定其生物学功能，探讨其对效应性T细胞（ CD4＋CD25-T）及调节性T细胞（ Treg）的免疫调节机制。方法采用流式细胞仪检测小鼠不同组织来源B10细胞的表达以及脂多糖（ lipopolysaccharide ，LPS）对B10激活的影响；采用流式细胞分选术（ FACS）和免疫磁珠分选术（ MACS）分选B10细胞、CD4＋CD25-T 细胞和Treg；利用混合淋巴细胞培养实验观察B10对CFSE标记的CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞增殖的调节作用及机制。结果（1）脾脏CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞表达为（3．95±0．79）％，与外周血、肠系膜淋巴结和外周淋巴结相比较表达最高，组间差异有统计学意义（P＜0．05）；脾脏CD19＋IL-10＋B细胞表达为（2．02±0．16）％，与外周血、肠系膜淋巴结和外周淋巴结相比较表达最高（P＜0．05），且IL-10主要由CD1dhighCD5＋B细胞亚群分泌（P＜0．01）；（2） LPS联合乙酸佛波醇（PMA）、莫能菌素（monen-sin）和离子霉素（ionomycin）能活化B10细胞分泌IL-10。延长LPS的作用时间（48 h）能促进CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞高表达及IL-10分泌增加（P＜0．01）；（3） CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞在体外可抑制CD4＋CD25-T细胞增殖（P＜0．01）、促进CD4＋T细胞分泌IL-10（P＜0．01），同时可促进Treg增殖（P＜0．01）。结论 B10细胞在小鼠脾脏高表达，通过Toll样受体（TLR）信号通路被激活。活化的B10细胞具有免疫抑制性，可抑制CD4＋CD25-T细胞增殖，促进Treg增殖，其可能免疫调节机制是IL-10的释放增加。因此B10细胞有望为治疗多种自身免疫性疾病提供一种全新的治疗方法。

关键词： 调节性T细胞   免疫相关性疾病   B细胞   抑制性细胞因子   白细胞介素-10   转化生长因子-β   自身免疫性疾病   FoxP3  

摘要： 近些年来，人们发现B细胞除具有产生各种抗体、发挥体液调节作用之外，还存在一种类似于调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）的、可以调节免疫应答的细胞亚群--调节性 B 细胞（ regulatory B cell， Breg ）。最近研究表明，与 Treg 的亚型（ Tr1、Tr3、T FoxP3＋）相对应， Breg 亦具有 Br1、Br3、B FoxP3＋亚型［1］。 Breg通过产生抑制性细胞因子（白细胞介素-10， IL-10；转化生长因子-β， TGF-β）或分泌抑制性抗体影响其他免疫细胞，在免疫调节中发挥作用［2］。 Breg与免疫耐受、自身免疫性疾病、过敏性疾病、肿瘤、感染等具有重要关系，本文将对Breg与免疫相关性疾病的关系做一综述。

关键词： T-CELLS   SUPPRESSOR-CELLS   INDUCTION   EXPRESSION   TOLERANCE   STAT3   INFLAMMATION   METABOLITES   FACILITATE   CARCINOMA  

摘要： We reported previously that tumor-evoked regulatory B cells (tBregs) play an essential role in breast cancer lung metastasis by inducing TGF-beta-dependent conversion of metastasis-promoting Foxp3(+) regulatory T cells (Tregs). In this article, we show that resveratrol (RSV), a plant-derived polyphenol, at low and noncytotoxic doses for immune cells, can efficiently inhibit lung metastasis in mice. The mechanism of this process is that RSV inactivates Stat3, preventing the generation and function of tBregs, including expression of TGF-beta. As a result, it frees antitumor effector immune responses by disabling tBreg-induced conversion of Foxp3(+) Tregs. We propose that low doses of RSV may also benefit humans by controlling cancer escape-promoting tBregs/Tregs without nonspecific inactivation of effector immune cells.

关键词： B10   白介素-10   自身免疫   肿瘤  

摘要： 背景B细胞主要特征为产生抗体和细胞因子，并且具有抗原提呈功能。调节性B细胞作为B细胞的一个重要的特殊功能性亚群，在小鼠自身免疫和炎症模型中起发病和调节作用。目的探讨有关调节性B细胞作用机制的最新研究进展。内容描述调节性B细胞特点和在自身免疫性疾病和肿瘤中的作用。趋向目前仍不能确定调节性B细胞具体的表型，在每一种的病理情况下，调节性B细胞可能存在不同的复杂的细胞网络，控制其调节的活性可能是治疗自身免疫性疾病和肿瘤的一种新方法。

关键词： 调节性B细胞   川崎病   共刺激分子   IL-10   调节性T细胞  

摘要： 目的：探讨调节性B细胞（ Breg）在川崎病（ KD）免疫发病机制中的作用。方法急性期KD患儿28例，正常同年龄对照组28例，KD患儿分别于静脉丙种球蛋白（ IVIG）治疗前后直接取血备检。采用流式细胞术分别检测外周血CD19＋CD24 hi CD38 hi Breg、CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（ Treg）比例及Breg细胞表面共刺激分子CD80、CD86、PD-L1的表达；酶联免疫吸附实验检测培养上清中IL-10蛋白浓度；实时荧光定量PCR （real-time PCR）检测外周血B细胞中IL-10，CD4＋T细胞中Foxp3、CTLA-4和GITR mRNA的表达。结果（1）急性期KD患儿外周血CD19＋CD24hiCD38hi Breg细胞比例及B细胞IL-10表达均明显低于同年龄对照组（P＜0．05），经IVIG治疗后显著上升（P＜0．05）；经体外LPS刺激培养48 h后，急性期KD患儿B细胞培养上清中IL-10浓度仍明显低于同年龄正常对照组[（31．06±8．26） pg/ml vs （46．32±13．91） pg/ml， P＜0．05]；（2）急性期KD患儿CD19＋CD24hiCD38hi Breg细胞表面共刺激分子CD80、CD86、PD-L1表达明显下调（P＜0．05），经IVIG治疗后，CD80和CD86表达虽有所增加，但仍低于同年龄对照组（P＜0．05），PD-L1表达无明显改变（P＞0．05）；（3）急性期KD患儿外周血CD4＋CD25＋Treg细胞比例及相关分子Foxp3、CTLA-4和GITR基因转录水平明显低于正常对照组（P＜0．05），其中CD4＋CD25＋Treg细胞比例与CD19＋CD24hiCD38hi Breg细胞比例呈正相关关系（r＝0．62，P＜0．05），经IVIG治疗后显著上升（P＜0．05）。结论 Breg细胞数量及功能异常可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要原因之一。

关键词： 脓毒症   高迁移率族蛋白质类   免疫耐受   调节性T细胞  

摘要： 目的观察不同剂量黄芪甲苷（astragaloside IV，ASTIV）对高迁移率族蛋白B1（high mobility groupbox-1protein，HMGBl）介导小鼠调节性T细胞（regulatory T cells，Treg）免疫功能的拮抗效应并探讨其药物作用机制。方法采用清洁级BALB／c小鼠，处死后分离脾脏CD4^＋CD25^＋Treg，在72孔板上按随机数字表法将Treg分为4组进行培养（每组18孔）：（1）正常对照组：单纯Treg；（2）HMGBl组：HMGBl（1μg／m1）＋Treg；（3）HMGBl＋AST IV治疗I组：HMGBl（1μg／m1）＋ASTIV（50μg／m1）＋Treg；（4）HMGBl＋ASTIV治疗Ⅱ组：HMGBl（1μg／m1）＋ASTIV（100μg／m1）＋Treg。以上4组再各分为3个亚组（每组6孔），分别于HMGBl刺激后24，48，72h收集Treg。采用流式细胞仪及荧光定量PCR法检测Treg胞内叉头翼状螺旋转录因子p3（Foxp3）蛋白和基因表达水平，ELISA法检测Treg细胞孵育上清液中IL-10及TGF-B分泌水平。结果HMGBl刺激Treg后，Foxp3蛋白及基因表达水平在24-72h均较对照组有所下降（P〈0．01），其中以作用72h下调尤为明显，细胞培养上清中IL-10及TGF-B水平呈现与Foxp3相同的变化趋势；而ASTIV治疗组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后24～72h均较HMGBl组明显升高（P〈0．05），且HMGBl＋ASTIV治疗Ⅱ组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后24-72h明显高于HMGBl＋ASTIV治疗I组（P〈0．05），细胞培养上清中IL-10及TGF-B水平亦呈现与Foxp3相同的变化趋势。结论不同剂量ASTIV在体外均可拮抗HMGBl对小鼠Treg免疫功能的影响，呈剂量依赖性，提示其对HMGBl介导的促炎效应具有显著抑制作用。

关键词： 日本血吸虫   SEA   B10细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)与成虫抗原(SWAP)是否能够诱导小鼠调节性B细胞的产生。方法SEA、SWAP和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和磁珠分选后的脾脏CD19+B细胞,72h后用流式细胞术分别检测CD19+IL-10+细胞比例,和细胞表面CD80、CD86及CD40的表达,用ELISA法检测培养上清中IL-10的水平。体内实验用SEA、SWAP、PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠,1次/周,共3次,末次免疫后7d取小鼠脾脏,流式细胞术检测CD19+IL-10+细胞比例,用ELISA法检测培养上清中IL-10的水平。结果 LPS与SEA体外均能显著诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞,两者无显著差异,而SWAP组不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞;SEA与LPS能够诱导脾脏CD19+B细胞表面高表达CD80、CD86和CD40,而SWAP不能诱导脾脏CD19+B细胞活化;SEA与LPS诱导脾脏CD19+B细胞分化为IL-10+细胞的比例也显著升高,同时能刺激脾脏CD19+B细胞分泌高水平的IL-10,两者无显著差异;而SWAP不能诱导小鼠脾脏CD19+B细胞分化为IL-10+细胞并分泌IL-10。SEA体内免疫小鼠后,小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞比例显著升高,并且能够分泌高水平的IL-10,而SWAP和PBS免疫组均不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+IL-10+细胞并分泌IL-10。结论 SEA体外体内均能诱导小鼠产生分泌IL-10的B10细胞,并且在体外不依赖于脾脏其他免疫细胞的参与,而SWAP体外体内均不能诱导B10细胞的产生。

关键词： cytokines   B10 cells   IL-10   B10 CELLS   LYMPHOCYTE DEPLETION   T-CELLS   INTERLEUKIN-10   MICE   CYTOKINE   IL-10   ACTIVATION   INITIATION   ARTHRITIS  

摘要： Psoriasis is an inflammatory cutaneous disorder characterized by marked epidermal thickening and Th1 and Th17 cell infiltration. At present, the contribution of B cells to the pathogenesis of psoriasis is unclear. In mice, topical application of imiquimod induces inflamed skin lesions and serves as an experimental animal model for human psoriasis. In this study, we showed that imiquimod-induced skin inflammation was more severe in CD19(-/-) than WT mice. These inflammatory responses were negatively regulated by a unique IL-10-producing CD1d(hi)CD5(+) regulatory B cell subset (B10 cells) that was absent in CD19(-/-) mice and represented only 1-2% of splenic B220(+) cells in WT mice. Splenic B10 cells entered the circulation and migrated to draining LNs during imiquimod-induced skin inflammation, thereby suppressing IFN-gamma and IL-17 production. Furthermore, adoptive transfer of these B10 cells from WT mice reduced inflammation in CD19(-/-) mice. The present findings provide direct evidence that B10 cells regulate imiquimod-induced skin inflammation and offer insights into regulatory B cell-based therapies for the treatment of psoriasis.

关键词： MEDIATED SUPPRESSION   IN-VIVO   DEATH   LUCIFERASE   ALLOGRAFTS   TOLERANCE   REJECTION   RESPONSES   PERFORIN   SURVIVAL  

摘要： Regulatory T cells (Tregs) play a pivotal role in the maintenance of immune tolerance and hold great promise as cell therapy for a variety of immune-mediated diseases. However, the cellular mechanisms that regulate Treg maintenance and homeostasis have yet to be fully explored. Although Tregs express granzyme-B (GrB) to suppress effector T cells via direct killing, the mechanisms by which they protect themselves from GrB-mediated self-inflicted damage are unknown. To our knowledge, we show for the first time that both induced Tregs and natural Tregs (nTregs) increase their intracellular expression of GrB and its endogenous inhibitor, serine protease inhibitor 6 (Spi6) upon activation. Subcellular fractionation and measurement of GrB activity in the cytoplasm of Tregs show that activated Spi6(-/-) Tregs had significantly higher cytoplasmic GrB activity. We observed an increase in GrB-mediated apoptosis in Spi6(-/-) nTregs and impaired suppression of alloreactive T cells in vitro. Spi6(-/-) Tregs were rescued from apoptosis by the addition of a GrB inhibitor (Z-AAD-CMK) in vitro. Furthermore, adoptive transfer experiments showed that Spi6(-/-) nTregs were less effective than wild type nTregs in suppressing graft-versus-host disease because of their impaired survival, as shown in our in vivo bioluminescence imaging. Finally, Spi6-deficient recipients rejected MHC class II-mismatch heart allografts at a much faster rate and showed a higher rate of apoptosis among Tregs, as compared with wild type recipients. To our knowledge, our data demonstrate, for the first time, a novel role for Spi6 in Treg homeostasis by protecting activated Tregs from GrB-mediated injury. These data could have significant clinical implications for Treg-based therapy in immune-mediated diseases.