关键词： granulomatosis with polyangiitis (GPA)   follicular helper T (TFH)   regulatory T (Treg) cells   B cell depletion   SYSTEMIC-LUPUS-ERYTHEMATOSUS   ANCA-ASSOCIATED VASCULITIS   WEGENERS-GRANULOMATOSIS   RITUXIMAB   EXPRESSION   CYCLOPHOSPHAMIDE   AUTOIMMUNITY   PROTEINASE-3   SUPPRESSION   MATURATION  

摘要： Methods. The frequencies of circulating T follicular helper cells (cTFHs) and regulatory T cells (Tregs) from 36 GPA patients including 11 rituximab-treated patients and 10 healthy controls were studied by flow cytometry. The functional capacity of Tregs was assessed by in vitro co-culture assays. Results. We observed an increased frequency of cTFHs and a reduced frequency of antigen-experienced Tregs in peripheral blood from GPA patients on conventional therapies but not in those treated with rituximab compared with healthy controls. Furthermore, the ratio of cTFHs to Tregs was significantly higher in GPA patients on conventional therapies than in GPA patients treated with rituximab who were clinically improved or controls. Whereas Tregs were numerically reduced in GPA patients on conventional therapy, the suppressive capacity of Tregs on a per cell basis was not significantly altered in these individuals. Conclusion. Our study illustrated increased cTFHs with decreased antigen-experienced Tregs in GPA patients on conventional therapies, but in B cell-depleted patients the levels of cTFHs and Tregs were similar to healthy controls. The negative correlation between cTFHs and Tregs implies the balance between T cell subsets and its B cell dependence impact on disease activity in GPA.

关键词： 急性B淋巴细胞白血病   调节性T细胞   Foxp3   ICOS   CD28  

摘要： 目的：探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞（ Treg）亚群改变及其在B-ALL免疫逃逸机制中的作用。方法急性期B-ALL患儿42例，正常同年龄对照组28例，分别于化疗前直接取血备检。采用流式细胞检测外周血CD4＋CD25 high Foxp3＋、CD4＋CD25high ICOS＋Foxp3＋、CD4＋CD25high ICOS-Foxp3＋细胞比例及IL-10、TGF-β、IL-35、TGF-βRII、ICOS、CD28蛋白表达水平；荧光定量PCR （ real-time PCR）检测CD4＋T细胞Smad3/4、TIEG1、Itch等mRNA表达；ELISA检测血浆中TGF-β浓度。结果（1）急性B-ALL患儿CD4＋CD25high Foxp3＋Treg细胞比例显著升高（P＜0．05），其中ICOS＋Foxp3＋和ICOS-Foxp3＋细胞比例均明显高于对照组（P＜0．05）， ICOS＋Foxp3＋/ICOS -Foxp3＋比值低于对照组（0．73±0．21 vs 1．87±0．59，P＜0．05）；（2）急性期B-ALL患儿ICOS＋Foxp3＋细胞转录因子Foxp3及抑制性细胞因子IL-10、IL-35和TGF-β表达水平显著上调（P＜0．05），ICOS-Foxp3＋细胞Foxp3表达略有增加，但差异无统计学意义（P＞0．05），其mTGF-β表达明显高于对照组（ P＜0．05）；（3）急性B-ALL患儿血浆TGF-β浓度明显高于对照组[（25.83±12．65） ng/ml vs （8．59±5．73） ng/ml， P＜0．05]，CD4＋T细胞表面TGF-βRII及下游信号分子Smad3/4、TIEG1、Itch表达水平显著上调（P＜0．05），CD4＋CD25highFoxp3＋Treg细胞表面ICOS、CD28表达亦明显增高（P＜0．05）。结论 TGF-β、ICOS、CD28信号过度活化可能是导致急性B-ALL患儿CD4＋CD25highFoxp3＋Treg细胞异常及其亚群比例失调的重要因素。

关键词： 特应性皮炎   调节性B细胞   Th22细胞   Th17细胞   细胞因子  

摘要： 目的研究特应性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)患儿外周血中调节性B细胞(Breg)的变化,分析其与Th22、Th17的关系,并探讨在AD患儿免疫学机制中的作用。方法选择28例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测调节性B细胞与Th22、Th17的变化,用ELISA测定培养上清中IL-10、IL-22及IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较。结果 AD患儿PBMC中CD19+IL-10+调节性B细胞数量低于健康对照组[(1.15±0.31)%vs(2.36.±0.82)%,P<0.05],Th22、Th17细胞的数量均高于健康对照组,培养液上清中细胞因子IL-10的水平也低于健康对照组,IL-22与IL-17水平高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。结论 AD患儿外周血调节性B细胞与以及相关的细胞因子IL-10的的下调,以及Th22、Th17细胞上调,可能共同参与了AD的免疫学机制,它们免疫紊乱的调节可为AD的临床治疗提供了新思路。

关键词： 胃癌   协同刺激分子   叉状头   翅膀状螺旋转录因子  

摘要： 目的 探讨协同刺激分子B7-H1、B7-H4和转录因子叉状头/翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）在胃癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学染色法检测B7-H1、B7-H4和Foxp3在100例胃癌组织及癌旁组织中的表达,分析B7-H1、B7-H4和Foxp3的表达与临床病理参数的关系.结果 B7-H1、B7-H4在胃癌组织中高表达,阳性表达率分别为65.0％和71.0％,其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,差异有统计学意义（P＜0.05）.Foxp3＋调节性T细胞（Treg）在胃癌组织中高表达,并与淋巴结转移有关,差异有统计学意义（P＜0.05）.B7-H1、B7-H4的表达水平和Foxp3＋ Treg细胞数量呈正相关,相关系数分别为：r=0.437,P＜0.05;r=0.456,P＜0.05.B7-H1、B7-H4及Foxp3高表达患者的预后差于低表达者（P＜0.05）.结论 B7-H1、B7-H4和Foxp3＋ Treg细胞在胃癌组织中高表达,并与胃癌患者淋巴结转移和预后有关.

关键词： 调节性B细胞   慢性乙型肝炎   调节性T细胞   IL—10  

摘要： 目的:分析慢性乙型肝炎患者外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)与CD4+CD25high调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的比例及两者的相互作用。方法:收集急性乙肝(acute hepatitis B,AHB)患者28例,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者31例和健康体检者(健康组)25例。分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经CpG ODN 2006和佛波酯体外作用后,流式细胞术分析Breg、Treg的表达及其相关性,ELISA检测培养上清IL-10水平。通过免疫磁珠剔除CD4+CD25+T细胞后分析Breg与Treg表达频率间的相关性。结果:CpG ODN 2006和佛波酯作用后CHB组Breg和Treg百分率较AHB组和健康组均明显升高(Breg:P值分别为0.003和0.001;Treg:P值分别为<0.001,0.005),AHB组和健康组间两类细胞表达频率差异无统计学意义(Breg:P=0.796;Treg:P=0.227);Spearman相关性分析显示CHB组Breg与Treg表达百分比存在正相关关系(r=0.50,P=0.004),而AHB组和健康组无此相关性(r=-0.15,P=0.462;r=0.09,P=0.669)。CHB组IL-10表达高于AHB组和健康组(Z值分别为-6.596、-6.373,P均<0.001),AHB组和健康组间差异无统计学意义(Z=-0.952,P=0.341)。Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系(r=3.303,P=0.005)。CHB组患者Breg和IL-10的表达在剔除CD4+CD25+T细胞前后间的差异无统计学意义。结论:Breg和Treg在CHB患者中表达频率升高,Breg可能通过IL-10的分泌参与慢性乙肝的免疫调节,且该作用不依赖于Treg。

关键词： 白血病,B细胞,急性   调节性T淋巴细胞   白细胞介素2   白细胞介素6   转化生长因子-β  

摘要： 目的 探讨儿童急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）调节性T淋巴细胞变化及调节机制.方法 B-ALL患儿18例,健康同年龄对照组15例,分别于化疗前直接取血备检.采用荧光实时定量PCR（real-time PCR）检测CD4＋T淋巴细胞Foxp3、CTLA4、GITR、LAG3、IL-2Rβ/γ、IL-6Rα/β、Smad3/4、RUNXl/3等mRNA表达;流式微球阵列术检测血浆中IL-6、TGF-β的蛋白水平;流式细胞术检测外周血CD4＋ CD25high Foxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）的比例及CD4＋T淋巴细胞IL-2Rα、TGF-βRII、pSTAT3、pSTAT5蛋白表达水平.结果 1.B-ALL患儿外周血CD4＋ CD25high Foxp3＋ Treg细胞比例及转录因子Foxp3表达显著升高（P＜0.05）,其抑制功能相关分子CTLA4、GITR、LAG3表达水平亦明显高于对照组（P ＜0.05）;2.B-ALL患儿CD4＋T淋巴细胞IL-2Rα/β及下游信号分子pSTAT5表达升高（P＜0.05）,且pSTAT5表达与CD4＋ CD25high Foxp3＋细胞比例呈正相关（r=0.17,P＜0.05）,IL-2Rγ表达无统计学差异（P ＞0.05）;3.B-ALL患儿外周血TGF-β水平、CD4＋T淋巴细胞TGF-βRⅠ/Ⅱ及下游信号分子Smad3/4表达显著上调（P＜0.05）,但RUNX1/3表达水平低于对照组（P＜0.05）,其中Smad3、RUNX1表达与CD4＋ CD25high Foxp3＋细胞比例均呈正相关（r=0.87、0.60,P＜0.05）.B-ALL患儿外周血IL-6水平明显增高（P＜0.05）,但IL-6Rα/β表达无统计学差异（P＞0.05）,下游pSTAT3表达显著降低（P＜0.05）,且与CD4＋ CD25high Foxp3＋细胞比例呈负相关（r=-0.39,P＜0.05）.结论 儿童B-ALL调节性T淋巴细胞异常可能与IL-2/pSTAT5、TGF-β/Smad信号过度活化及pSTAT3表达不足有关.

关键词： 肝炎,乙型,慢性   B淋巴细胞,调节性   T淋巴细胞,调节性   白细胞介素10   抗原,CDl9  

摘要： 目的分析慢性乙型肝炎患者外周血中IL-10＋CDl9＋调节性B淋巴细胞（Breg）的表达及其免疫调节机制。方法病例对照研究。收集2011年6月-2012年10月常熟市第二人民医院住院患者，急性乙型肝炎（AHB）患者28例，慢性乙型肝炎（CHB）患者31例和健康对照25名。分离外周血单个核细胞（PBMC），经含CpG序列的寡脱氧核苷酸CpGODN2006和佛波醇酯（PMA）体外作用后，流式细胞术分析IL-10＋CD19＋Breg、CD4＋CD25high调节性T淋巴细胞（Treg）的表达及其相关性，ELISA分析培养上清IL-10水平。Mann—WhitneyU检验分析两组问差异，Spearman相关分析两组连续变量问的相关性。结果CHB组外周血Breg[1．28％（1．05％～2．20％）]高于AHB组[0．87％（0．55％一1．22％）]和HCs组[0．89％（0．51％-1．37％）]（P值分别为0．001和0．006），AHB和HCs组间差异无统计学意义（P=0．669）。CpGODN2006和PMA作用后CHB组Bregl14．30％（10．70％-16．70％）]较AHB组[10．30％（7．05％～13．30％）]和HCs组[10．40％（6．85％～12．60％）]显著升高（P值分别为0．003和0．001）；CHB组Treg[5．80％（4．20％～9．10％）]较AHB组[4．05％（2．53％～5．40％）]和14Cs组[4．50％（2．55％～5．50％）]也显著增高（P值分别为〈0．001和0．005）。AHB和HCs组间差异均无统计学意义（Breg：P=0．796；Treg：P=0．227）。Spenrman相关性分析发现CHB组Breg与Treg存在正相关关系（r=0．50，P=0．004），而AHB和HCs组无此相关性（r=-0．15，P=0．462；r=0．09，P=0．669）。CHB组IL-10表达高于AHB和HCs组（P〈0．001）。AHB和HCs组间差异无统计学意义（P=0．341），Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系（r=0．409，P=0．005）。结论B淋巴细胞Breg和调节性T淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者中表达升高，Breg可能通过IL—10的分泌在HBV慢性感染过程中发挥免疫调节作用。（中华检验医学杂志．2014。37：100—104）

关键词： B淋巴细胞   调节性   白介素10   转化生长因子β1   多发性硬化  

摘要： 调节性B细胞(Bregs)主要来源于边缘区B细胞和B1细胞,炎症微环境是其分化/激活所必需的。Bregs通过产生白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)等抑制性细胞因子和通过与T细胞等其他免疫细胞的相互作用来介导免疫耐受。在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)/多发性硬化(MS)中,Bregs通过产生IL-10及抑制病理性Th1/Th17细胞的应答,增强Th2细胞的负性调节作用来控制疾病的启动和减轻疾病的严重性。

关键词： 慢性移植物抗宿主病   异基因造血干细胞移植术   发病机制   调节性B细胞  

摘要： 目的：检测异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）术后慢性移植物抗宿主病（cGVHD）患者调节性B细胞（Bregs）、调节性T细胞（Tregs）及相关细胞因子的水平，初步探讨其在cGVHD发病机制中的作用。\n 方法：观察26例allo-HSCT患者是否伴有cGVHD的临床表现，并采集其外周血，采用流式细胞术检测外周血中Bregs（CD19+CD24hiCD38hiB细胞）及Tregs（CD4+CD25+Foxp3+T细胞）的比例；采用ELISA检测血浆中炎症抑制因子白介素-10（IL-10）及纤维生成相关因子-β1（TGF-β1）的水平。实验数据采用均数±标准差表示，进行计量资料t检验。\n 结果：（1）26例allo-HSCT患者中12例发生cGVHD，14例无cGVHD；（2）allo-HSCT术后发生cGVHD的患者与未发生cGVHD的患者比较，Bregs水平显著降低(P=0.028)；发生cGVHD的患者与未发生cGVHD的患者比较，Tregs水平显著降低(P=0.026)；Bregs与Tregs水平之间具有正相关性(r=0.55,P=0.042)；（3）发生cGVHD的患者与未发生cGVHD的患者比较，IL-10水平显著下降(P=0.044)；TGF-β1水平无显著差异(P=0.765)；（4）cGVHD组Bregs与IL-10水平之间具有正相关性(r=0.903,P=0)，non-cGVHD组Bregs与IL-10水平之间也具有正相关性(r=0.764,P=0.001)。\n 结论：allo-HSCT术后发生cGVHD的患者外周血不仅Tregs水平显著降低，Bregs水平亦显著降低，与Bregs免疫抑制活性相关的细胞因子IL-10水平显著下降。除Tregs外，Bregs可能亦参与cGVHD的发病机制，Bregs可能通过IL-10在抑制、减轻cGVHD过程中起到重要作用，为临床cGVHD的预防、早期诊断及治疗提供了初步的临床实验依据。