关键词： 高迁移率族蛋白B1   调节性T细胞   黄芪甲苷   免疫抑制   脓毒症  

摘要： 目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）对CD4＋CD25-T细胞免疫功能的影响及黄芪甲苷（AST Ⅳ）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠，活杀后分离脾脏的CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25-T细胞，将CD4＋CD25-T细胞在48孔板上随机分为4组（每组12孔）培养，对照组：单纯CD4＋CD25- T细胞；Treg实验组：CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养；HMGB1＋Treg组：按CD25＋∶CD25-比例为1∶10加入100μl经HMGB1（1μg/ml）刺激72 h的Treg与CD4＋CD25-T细胞进行共培养；HMGB1＋AST IV＋Treg组： CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl经HMGB1（1μg/ml）、AST IV（100μg/ml）刺激72 h的CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养。以上4组均于培养后72 h重新分离收集CD4＋CD25-T细胞及其上清液，采用噻唑蓝（MTT）法检测脾脏CD4＋CD25-T细胞增殖活性；ELISA法检测CD4＋CD25-T细胞活化核因子（NFAT）活性、孵育上清液IL-2表达。结果将CD4＋CD25＋Treg加入CD4＋CD25-T细胞培养后，CD4＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（0.166±0.039），P＜0.01，NFAT活性（0.156±0.035）、IL-2水平（2.38±0.58）pg/ml均较对照组下降（P＜0.01）。加入经HMGB1刺激的Treg后，CD4＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度逆转（0.477±0.097），P＜0.01。与CD4＋CD25＋Treg组比较，HMGB1＋Treg组NFAT活性（0.409±0.094）、IL-2（4.55±0.96）pg/ml均升高（P＜0.01）。与HMGB1＋Treg组比较，HMGB1＋AST Ⅳ＋Treg组CD4＋CD25-T细胞增殖受抑制程度加重（0.287±0.052）、NFAT活性（0.261±0.046）、IL-2水平（2.73±0.62）pg/ml降低（P＜0.01）。结论 HMGB1在体外可抑制小鼠Treg免疫功能发挥，而ASTⅣ可拮抗HMGB1对Treg免疫功能的抑制作用，表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。

关键词： VERSUS-HOST-DISEASE   CHRONIC GRAFT   B10 CELLS   T-CELLS   IL-10   TRANSPLANTATION   MICE   INTERLEUKIN-10   AUTOIMMUNITY   SUPPRESSION  

摘要： A subset of regulatory B cells (Bregs) in mice negatively regulate T-cell immune responses through the secretion of regulatory cytokines such as IL-10 and direct cell-cell contact and have been linked to experimental models of autoimmunity, inflammation, and cancer. However, the regulatory function of Bregs in human disease is much less clear. Here we demonstrate that B cells with immunoregulatory properties are enriched within both the CD19(+) IgM(+) CD27(+) memory and CD19(+) CD24(hi) CD38(hi) transitional B-cell subsets in healthy human donors. Both subsets suppressed the proliferation and interferon-gamma production of CD3/CD28-stimulated autologousCD4(+) T cells in a dose-dependent-manner, and both relied on IL-10 secretion as well as cell-cell contact, likely mediated through CD80 and CD86, to support their full suppressive function. Moreover, after allogeneic stem cell transplantation, Bregs from patients with chronic graft-versus-host disease (cGVHD) were less frequent and less likely to produce IL-10 than were Bregs from healthy donors and patients without cGVHD. These findings suggest that Bregs may be involved in the pathogenesis of cGVHD and support future investigation of regulatory B cell-based therapy in the treatment of this disease.

关键词： 关节炎,类风湿   B淋巴细胞   细胞因子类  

摘要： 类风湿关节炎(RA)是以对称性多关节炎为主要临床表现的系统性自身免疫性疾病。其发病机制尚不明确。调节性细胞对于RA免疫平衡和自身稳定的维持有重要作用。具有负性调节功能的B细胞(Breg)可通过产生白细胞介素10(IL-10)或转化生长因子β(TGF-β)等抑制性细胞因子介导免疫耐受,抑制RA炎性反应,尤其对活动期RA有显著免疫抑制作用。本文主要讨论Breg在RA中的作用及其可能机制。

关键词： regulatory B cells   esophageal cancer   interleukin-10   transforming growth factor-beta   forkhead/winged-helix protein   TGF-BETA   B10 CELLS   T-CELLS   AUTOIMMUNITY   RESPONSES   IMMUNITY   SUBSET   CD19   ACTIVATION   APOPTOSIS  

摘要： Current treatments for esophageal cancer (EC) rely on tumor eradication by surgery or chemoradiotherapy. However, such treatments do not account for the assessment and adjustment of the immune status of the patients. Regulatory B cells (Bregs) have been confirmed as a negative regulatory subtype in B-cell populations. However, to the best of our knowledge, there have been no direct studies on Bregs in patients with EC. The present study enrolled sixty patients with EC and sixty healthy donors to detect the presence of Bregs in peripheral blood and to determine their clinical significance. The percentage of peripheral Bregs was measured using flow cytometry with fluorescence-labeled antibodies against cluster of differentiation (CD) 5, CD19, interleukin (IL)-10, forkhead box protein 3 (Foxp3) and transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) prior to and following radical surgery. The level of circulating Bregs in patients with EC was observed to be significantly higher than that in the healthy donors. However, this level was observed to decrease following surgery. The percentage of circulating TGF-beta-producing Bregs and Foxp3-expressing Bregs in patients with EC also decreased following surgery. By contrast, the percentage of peripheral IL-10-producing Bregs (B10s) significantly increased in patients with advanced EC following surgery. These findings suggest that Bregs have a negative immunoregulatory role in the development and progression of EC. Furthermore, postoperative combination therapies against Bregs, particularly B10s, may improve the outcome of patients with EC following resection.

关键词： 树突状细胞   体外光化学方法   调节性B细胞   白细胞介素-10  

摘要： 目的探讨未成熟树突状细胞(imDC)吞噬经补骨脂素长波紫外线(PUVA)处理的小鼠脾B淋巴细胞(PUVA-SP)后,将B淋巴细胞诱导为高分泌白细胞介素(IL)-10(IL-10+)的调节性B细胞的可行性。方法培养小鼠骨髓来源DC,小鼠脾淋巴细胞经PUVA光源照射得到PUVA-SP,在体外将PUVA-SP与骨髓来源的imDC共同培养,后者吞噬PUVA-SP后形成PUVA-SP DC。应用CD19磁珠分选小鼠脾脏B淋巴细胞,将不同的DC与B淋巴细胞共同培养48 h。采用酶链免疫吸附试验(ELISA)检测B淋巴细胞、imDC、imDC+B淋巴细胞、PUVA-SP DC、PUVA-SP DC+B淋巴细胞的培养上清液中干扰素(IFN)-γ、转化生长因子(TGF)-β、IL-12p70、IL-10等细胞因子的含量。流式细胞仪分析B淋巴细胞、imDC+B淋巴细胞、mDC+B淋巴细胞、PUVA-SP DC+B淋巴细胞共培养后IL-10+调节性B细胞数量。结果与其他4组细胞培养液比较,PUVA-SP DC+B淋巴细胞上清液中的IL-10含量明显升高(均为P<0.05)。与其他各组相比,PUVA-SP DC+B淋巴细胞中IL-10+调节性B细胞数量明显增多。结论 PUVA-SP DC可以诱导脾脏B淋巴细胞分化为IL-10+调节性B细胞。

关键词： 核因子-κB   T淋巴细胞,调节   移植物抗宿主病  

摘要： 异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）的疗效,主要受移植物抗宿主病（GVHD）限制.近年研究表明,调节性T淋巴细胞（Treg）能有效预防与治疗GVHD.随着现代免疫学的进展,核因子（NF）-κB作为多效转录因子,对Treg增殖与活化均具有重要作用,从而影响GVHD的防治.笔者拟就近年关于NF-κB通过Treg在GVHD防治中的研究进展进行综述.

关键词： Graves病   地塞米松   甲状腺局部注射   调节性T细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的观察Graves病(Graves disease,GD)患者外周血免疫调节细胞在体外对地塞米松(DEX)、硫唑嘌呤(AZA)及环磷酰胺(CTX)等免疫抑制剂的反应及其体内在甲状腺局部注射DEX后的变化,探讨DEX等免疫抑制剂在甲状腺局部注射治疗GD过程中对免疫调节系统的作用。方法 1)用DEX、AZA及CTX等免疫抑制剂处理GD患者外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞(Th)、调节性B细胞(Breg)、树突状细胞(DC)等免疫细胞亚群变化。2)21例抗甲状腺药物治疗维持期的GD患者,甲状腺局部注射DEX,治疗前后分别检测外周血Treg、Th、Breg、DC等免疫细胞亚群变化。结果 1)免疫抑制剂处理后,各组Treg水平均减少(P<0.05),DEX组Th2细胞减少(P<0.05),CTX组Th1细胞增加(P<0.05);DEX组Breg增多(P<0.05),其余2组无明显统计学差异;各组DC细胞中,mDC均明显升高伴pDC下降,DEX、CTX组(P<0.05),AZA组(P<0.01),DEX组成熟型CD83+及HLA-DR+DC均下降(P<0.05),其余2组无明显统计学差异。2)甲状腺局部注射DEX后,与注射前相比,GD患者外周血中Treg细胞增多(P<0.05),Th2细胞减少(P<0.05),Th1细胞无明显变化(P>0.05);Breg比例升高(P<0.05);DC亚群中,mDC升高伴pDC下降(P<0.05),成熟型CD83+及HLA-DR+DC比例均下降(P<0.05)。结论 DEX能有效调节GD患者外周血Treg、Breg及DC等调节性细胞及其亚群水平,重建Th1/Th2平衡,可作为甲状腺局部注射免疫抑制剂治疗GD的首选用药。

关键词： 白细胞介素-10   调节性T细胞   自身免疫性疾病   B细胞   免疫调节作用   分泌抗体   机体免疫状态   细胞因子  

摘要： 正常机体免疫状态下，B淋巴细胞主要通过抗原提呈和分泌抗体及细胞因子发挥免疫调节作用。与调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）相似，B细胞中新的细胞亚群——调节性B细胞（regulatory B cell，Breg）同样发挥着双向免疫调节的作用。按照分泌不同的细胞因子分类，可将Breg分为分泌白细胞介素（interleukin，IL）-10的Breg（IL-10-producing Breg，B10细胞），分泌转化因子（transformational growth factor，TGF）-β1的Breg（TGF-13-producing Breg），Foxp3相关Breg（Foxp3-expressing Breg），共同完成抑制细胞免疫及炎症反应，加快炎症修复的作用。

关键词： 调节性B细胞   白细胞介素-10   自身免疫性疾病   免疫耐受  

摘要： 自身免疫性疾病是指机体对自身成分产生免疫应答所致的一种疾病状态,这种自身免疫反应会影响相应器官的功能.在大多数自身免疫性疾病中,B淋巴细胞（简称B细胞）能产生自身抗体,因此一般被认为是自身免疫性疾病的”罪魁祸首”.最近大量研究发现,一类特殊的B细胞亚群即调节性B细胞（Bregs）能下调免疫反应,很好地维持免疫稳态,它们的丢失或缺乏会导致更加严重的自身免疫性疾病,且这种免疫调节功能主要通过自身分泌白细胞介素-10（IL-10）来实现.Bregs的起源、与其分化和功能相关的分子及其在自身免疫性疾病的作用将被进一步讨论.

关键词： 紫癜,血小板减少性,特发性   细胞因子类   酶联免疫吸附测定  

摘要： 目的研究慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患儿外周血调节性B细胞数量与相关细胞因子的变化,分析它们之间的相关性,研究这些细胞的分化在CITP发病机制中的作用。方法选择30例CITP患儿,外周血单个核细胞被分离,Breg细胞以及Th1、Th22、Th17的比例变化通过流式细胞术检测;并体外培养PBMC细胞,上述培养液中IL-10水平以及IFN-γ、IL-17、IL-22运用ELISA法检测,与同期选择的健康组比较。结果与健康组比较,CITP患儿外周血中Th1、Th17、Th22细胞亚群的比例均升高(18.4±4.7vs 10.82±4.4;2.42±1.02vs 1.23±0.42;0.79±0.24vs 0.26±0.11,%),调节性B细胞(Breg)的比例降低(0.83±0.21vs 1.89±0.12,%),差异均有统计学意义(P<0.05),Breg细胞分别与Th效应细胞亚群的变化呈负相关(P<0.05),细胞因子IL-10水平与IFN-γ、IL-17、IL-22水平也呈负相关(P<0.05)。结论调节性B细胞比例下调可能参与CITP患儿效应T细胞免疫紊乱机制,为CITP患儿的免疫调节治疗提供了新思分路。