关键词： 桥本甲状腺炎   调节性B淋巴细胞   抑制性T细胞  

摘要： 目的探讨桥本甲状腺炎（HT）患者外周血调节性B淋巴细胞（regulatoryBcell，Bregs）、抑制性T细胞（suppressor T ***）的比例变化。方法人组18～60岁桥本甲状腺炎患者61例，性别年龄相匹配的健康组38名。应用流式细胞技术检测外周血CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞、CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞、CDl9＋白细胞介素．10＋B细胞及CD8＋CD28-T细胞比例变化。结果与对照组相比，HT组CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞亚群显著升高（P〈0．05）。随着甲状腺过氧化物酶抗体的升高，CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞显著降低（P〈0．05）；随着甲状腺球蛋白抗体（TGAb）的升高CD8＋CD28-T细胞显著降低（P〈0．05）。三碘甲状腺原氨酸（TT4）与CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞则呈显著正相关；甲状腺素（TT4）与CD8＋CD28-T细胞呈显著负相关，与CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞则呈显著正相关（P〈0．05）。Logistic回归分析发现，TGAb和游离甲状腺素（n）是CD8＋CD28-T细胞在淋巴细胞中比例降低的独立危险因素（P〈0．05）；促甲状腺素（TSH）是CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞比例降低的独立危险因素，FT4是CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞比例升高的独立危险因素（P〈0．05）。结论HT患者外周血Ts显著降低，不同表型的Bregs比例变化则不同，甲状腺自身抗体和甲状腺功能均与HT的免疫改变相关。

关键词： 心肌炎   肠道病毒属   炎症   CD19+   CDld^hi   CD5+B细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的观察病毒性心肌炎小鼠不同时间点调节性B淋巴细胞(Breg)亚群的变化,探讨其在病毒性心肌炎发病中的作用。方法将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3),对照组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。依据注射后的时间,实验组和对照组均设1周和2周时间点亚组。应用苏木素伊红染色后观察心肌病理改变并计算心肌病理积分,采用RT-PCR法检测心肌组织中CVB3 mRNA的表达水平,采用流式细胞术检测小鼠脾脏Breg细胞亚群占CD19+细胞的比例。结果实验组心肌炎症水平及CVB3 mRNA表达水平均明显高于对照组;实验组1周亚组心肌组织病理积分低于2周亚组,但实验组1周亚组心肌CVB3 mRNA表达水平却高于2周亚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠脾Breg细胞比例均高于对照组,且实验组1周亚组小鼠脾Breg细胞比例高于2周亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论病毒性心肌炎小鼠中调节性B细胞表达增高,其可能参与病毒性心肌炎的发病过程。

关键词： 白细胞介素35   调节性B淋巴细胞   川崎病   调节性T淋巴细胞   免疫调节  

摘要： 目的探讨白细胞介素（IL）-35＋调节性B淋巴细胞（IL-35＋Breg）在川崎病（KD）免疫发病机制中的作用。方法急性期KD患儿32例，同年龄体检健康儿童28例为健康对照组。KD患儿分别于治疗前、治疗后取血备检。采用流式细胞术检测外周血IL-35＋Breg、调节性T淋巴细胞（Treg）比例及程序性死亡因子配体1（PD—LI）、CD16q、程序性死亡因子1（PD-1）、CD43、IL-12p35、EB病毒诱导基因3（IL-27EBl3）、IL-12受体B2（IL-12Rβ2）、IL-27受体α（IL-27Rα）、磷酸化信号转导和转录活化因子1（pSTATI）、磷酸化信号转导和转录活化因子3（pSTAT3）蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD19-细胞Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2（SHP-2）、磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）、vav1鸟嘌呤核苷酸交换因子（Vav）mRNA表达；酶联免疫吸附法检测血浆中IL-35、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、IL-12水平。结果1．急性期KD患儿外周血IL-35＋Breg细胞比例较健康对照组显著降低[（5．79±2．60）％比（12．65±5．34）％；F=19．23，P〈0．05]，其胞内IL-12p35、IL-27EBI3、IL-10表达水平明显低于健康对照组（F=9．70、14．30、7．08，P均〈0．05），经静脉注射丙种球蛋白（IVIG）治疗后显著上调[IL-35＋Breg：（10．52±4．95）％；P〈0．05]。2．急性期KD患儿Treg比例及其胞内IL-12p35、IL-27EBl3表达水平明显低于健康对照组[Treg：（4．12±1．51）％比（8．06±3．32）％；F=19．70、17．69、38．22，P均〈0．05]，其中Treg与IL-35＋Breg细胞比例呈正相关（r：0．69，P〈0．05），血浆IL-35水平及CD19＋B淋巴细胞IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达水平均显著降低（F=8．09、7．54、7．69、5．89、12．59，P均〈0．05），经IVIG治疗后明显增高[Treg：（7．39±2．85）％；P均〈0．05]。3．急性期KD患儿CD14＋细胞过表达PD—L1、CD169（F=24．94、16．53，P均〈0．05），CD19＋细胞表面相关配体PD-1、CD43及其下游分子SHP-2、PTEN、Vav表达显著降低（F=6．43、5．57、19．52、10．37、11．37，P均〈0．05），血浆TNF-α、IL-12水平明显高于健康对照组（F=34．71、19．51，P均〈0．05），经IVIG治疗后均明显恢复（P均〈0．05）。结论IL-35＋Breg细胞数量及功能异常可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要因素之-。

关键词： WAS综合征   肺出血   自身免疫性疾病   调节性B细胞  

摘要： 目的探讨1例湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征（Wiskott-Aldrich syndrome,WAS）伴肺出血患儿临床分子特点。方法对1例疑似WAS的男性患儿,采用流式细胞技术检测WAS蛋白表达,PCR结合测序方法进行WAS基因分析,同时检测患儿调节性B细胞（B10）比例,并对其进行随访。结果患儿出生后即有眼眶及耳道周围湿疹,1月龄发现血小板减少（80×10^9/L）,伴有反复呼吸道和消化道感染。8月龄入我院免疫科治疗。入院时血小板计数5×10^9/L,伴中度贫血,Coom’S实验阳性。骨髓检查未见产板巨核细胞。实验室检测患儿WAS蛋白为阴性,WAS基因分析显示第2内含子有剪切位点突变（c.274-2A〉C）。患儿调节性B细胞比例明显低于正常对照。住院第2天,患儿颜面部出现紫癜样皮疹,四肢、双足背出现明显肿胀,并逐渐加重,伴有反复便血和尿血。第11天无明显诱因突发心率下降至80~100次/分、呼吸不规则,伴咯血,抢救中自气管插管内吸出100 ml鲜血,最终抢救无效死亡。结论通过临床表现、蛋白检测和基因分析,确诊1例WAS患儿,发现1个WAS基因新型剪切位点突变。对早发自身免疫性疾病的WAS患儿,需警惕内脏出血的可能,包括肺出血,并及早预防。

关键词： 细胞分化   B细胞   自身免疫病   多功能干细胞   免疫调节   免疫反应   细胞因子   体液免疫   抗原提呈细胞   自身免疫性疾病  

摘要： B淋巴细胞来源于骨髓的多功能干细胞。既往认为其主要通过产生抗体、呈递抗原、分泌细胞因子及活化T细胞等执行机体体液免疫,正向推动免疫反应。2006年,Mizoguchi等正式提出了＂调节性B细胞（regulatory B cells,Bregs）＂这一概念,Bregs通过产生负向细胞因子（如IL-10、IL-35和TGF-β）参与免疫调节。

关键词： forkhead box P3(+) regulatory T cell   Mycobacterium tuberculosis   special secretory protein   INTERLEUKIN-12 PRODUCTION   RESPONSES   IMMUNITY   GAMMA   BCG  

摘要： The expansion of CD4(+) CD25(+) forkhead box (FOX)P3(+) regulatory T (T-reg) cells has been observed in patients with Mycobacterium (M.) tuberculosis; however, the mechanism of expansion remains to be elucidated. The aim of the present study was to examine the role of the early secreted antigenic target 6(ESAT-6) and antigen 85 complex B (Ag85B) from M. tuberculosis on T-reg cell expansion. To investigate the sensitivity of peripheral blood cultures to the M. tuberculosis ESAT-6 and Ag85B antigens, the proportion of circulating CD4(+) CD25(+) FOXP3(+) T-reg cells was determined using flow cytometry and the levels of FOXP3 mRNA were determined using reverse transcription quantitative polymerase chain reaction. The mRNA levels of FOXP3 and the proportion of circulating CD4(+) CD25(+) FOXP3(+) T-reg cells were increased in multiplicitous drug-resistant tuberculosis patients compared with those in healthy controls and patients with latent tuberculosis (TB) infection (LTBI) (P<0.001). The mycobacterial antigens ESAT-6 and Ag85B increased the expansion of the CD4(+) CD25(+) FOXP3(+) T-reg cells and the mRNA levels of FOXP3 in healthy controls and LTBI patients compared with the effect of Bacillus Calmette-Guerin (P<0.05). Additionally, the mRNA levels of FOXP3 were elevated in the LTBI patients following stimulations with the mycobacterial antigens (P=0.012). Therefore, the M. tuberculosis antigens ESAT-6 and Ag85B induced CD4(+) CD25(+) FOXP3(+) T-reg-cell expansion, particularly in patients with LTBI. These findings indicated that CD4(+) CD25(+) FOXP3(+) T-reg cells may have a primary role in the failure of the host immune system to eradicate M. tuberculosis.

关键词： 视神经脊髓炎   调节性B细胞   多发性硬化   水通道蛋白4抗体  

摘要： 目的检测视神经脊髓炎(NMO)患者外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞的比例,探讨CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞能否作为NMO和多发性硬化(MS)鉴别诊断的生物标志物。方法采用流式细胞术检测44例NMO患者,38例MS患者和30例健康正常人外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞的比例。采用间接免疫荧光法检测NMO患者水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)的表达情况。结果 NMO患者外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞占CD19+B细胞及淋巴细胞的比例较MS患者和健康正常人明显减低,而MS患者与健康正常人比较,差异无统计学意义。AQP4-Ab阳性NMO患者较AQP4-Ab阴性NMO患者CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞占CD19+B细胞及淋巴细胞的比例明显减低。结论外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞数量是NMO和MS鉴别诊断的一种生物标志物。

关键词： 调节性B细胞   类风湿性关节炎   IL-10  

摘要： 研究发现某些B细胞能够通过产生调节性的细胞因子(如IL-10、TGF-β)或者直接与病原性的T细胞相互作用抑制免疫反应,这类B细胞亚群被定义为regulatory B(Breg)cells。类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎为特征的、伴随骨和软骨结构进行性破坏、最终导致关节破坏和畸形的慢性炎症疾病。已证实Breg在关节炎小鼠模型(collageninduced arthritis,CIA)以及类风湿性关节炎患者中发挥了免疫抑制作用。本文主要总结了近年来国内外有关Breg在RA疾病方面的研究进展,阐述其在RA中可能的作用机制,为RA疾病的预防、治疗提供新思路。

关键词： DIFFERENTIAL EXPRESSION   CUTTING EDGE   CLEAVAGE   DISRUPTION   INDUCTION   PATHWAY   DISEASE   PLASMA   BETA   FAIL  

摘要： In autoimmune patients, regulatory T cells (Tregs) are increasingly found to be unable to suppress patient-derived T cells, an outcome referred to as Treg resistance. In this study, we show that CD4 T cells from patients with multiple sclerosis resist suppression by patient-derived or healthy donor-derived ex vivo Tregs. Importantly, we report that granzyme B (GzmB) contributes to this Treg resistance via a novel, apoptosis-independent mechanism. We show that memory CD4(+)CD127(lo)FOXP3(+) Treg subsets do not express GzmB, whereas activated, nonregulatory CD4 T cells isolated from patients with multiple sclerosis express higher levels of GzmB than do cells from healthy donors. In contrast to the intracellular GzmB that mediates apoptosis, GzmB can be found in extracellular fluids where it is hypothesized to regulate other cellular processes. In this study, we show that providing extracellular GzmB strongly inhibits Treg suppression, without altering Treg viability. However, when GzmB and GzmB-specific inhibitor are both provided to the cocultures, Treg suppression occurs. Thus, these data suggest that a novel activity of extracellular GzmB is to regulate Treg suppression. Additionally, we find that the suppression-abrogating cytokine IL-6 augments GzmB expression by human CD4 T cells, and it inhibits Treg suppression via this nonapoptotic GzmB-mediated mechanism. Lastly, in examining the mechanism whereby GzmB inhibits Treg function, we show that extracellular GzmB reduces Treg expression of CD39 and programmed death ligand 1. Collectively, these data indicate that extracellular GzmB plays an unexpected, nonapoptotic role in regulating Treg suppression and suggest that inactivation of specifically the extracellular activity of GzmB may be an efficacious therapeutic in autoimmunity.

关键词： 调节性B细胞   免疫调节   IL-10   自身免疫性疾病  

摘要： B细胞除了能通过产生抗体,提呈抗原来发挥免疫作用外,还有免疫抑制功能。机体内存在少量的调节性B细胞(Breg),能通过分泌抑制性细胞因子(如IL-10、肿瘤坏死因子等)或直接的细胞接触诱导免疫耐受、抑制过度炎症反应等,从而发挥免疫调节功能。B细胞在自身免疫性疾病、肿瘤免疫、抗感染免疫、移植耐受的维持等方面都发挥着重要作用。本文主要对Breg细胞的功能相关分子、作用机制以及与疾病的相关性等方面进行综述。