关键词： 调节性B淋巴细胞   儿童   新诊断   血小板减少症  

摘要： 目的探讨调节性B淋巴细胞（Breg）在儿童新诊断免疫性血小板减少症（ITP）外周血的表达及意义。方法选取2014年1月至12月在郑州大学第一附属医院儿科病房收治的新诊断ITP患儿35例为研究对象，以同期体检的20例健康儿童为健康对照组，分别留取静脉血3mL。采用流式细胞仪检测新诊断ITP患儿及对照组儿童外周血Breg细胞的表达水平，实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血细胞因子白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA的表达，Pearson相关分析检测Breg细胞比值与IL-10、TGF-β1mRNA表达的相关性。结果新诊断ITP患儿外周血Breg细胞比值[（2．37±0．67）％]显著低于健康对照组[（4．92±1．32）％]，差异有统计学意义（t=一7．47，P=0．000），IL-10mRNA的表达水平（0．202±0．059）显著低于健康对照组（0．415±0．212），差异有统计学意义（t=一5．175，P=0．000），TGF．131mRNA的表达水平（1．587±0．823）明显高于健康对照组（0，619±0．322），差异有统计学意义（t=4，081，P=0．001）。Breg细胞比值与IL-10mRNA的表达水平呈正相关（rs：0．828，P〈0．05），与TGF-β1mRNA的表达水平无相关性（rs=0．527，P=0．117）。结论新诊断ITP患儿外周血Breg细胞降低，Breg细胞异常表达可能在儿童ITP的免疫学发病过程中起重要作用。

关键词： 实验性自身免疫性脑脊髓炎   雌激素   调节性B细胞   炎性因子   程序性死亡受体-1/配体  

摘要： 目的检测雌激素在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的预防性治疗作用并初步探讨其体内作用机制。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG_(35-55))和完全弗氏佐剂(CFA)免疫C57BL/6J小鼠制备EAE模型;雌激素于建模始每日皮下注射50μmol/L进行治疗,通过发病指数评分、脊髓病理分析、炎症因子水平检测,并应用流式细胞仪(FACS)及实时荧光定量PCR(q PCR)评价治疗效果;进一步通过分析小鼠脾细胞及脊髓相关功能分子CD4/PD-1、CD19/PD-L1、CD4/CD25/Foxp3、CD19/CD21/CD23及CD19/CD5/CD1d^(high)的表达变化,探讨雌激素可能的作用机制。结果雌激素预防性治疗可有效延缓EAE小鼠的发病,减轻脱髓鞘病变。病理结果显示,雌激素治疗能减少小鼠脊髓组织炎性细胞的浸润,同时下调外周炎性因子TNF-a及IL-17A的分泌表达(P<0.01);与模型组相比,雌激素治疗下调T淋巴细胞表面活化分子CD69的表达(P>0.05)并可显著上调CD4^+T细胞表面PD-1的表达(P<0.05);同时,雌激素治疗后PD-1的配体CD19+B细胞表面PD-L1的表达明显上调(P<0.01),脾细胞中CD19^+CD21^(high)CD23^(low)(P<0.01)及CD19^+CD5^+CD1d^(high)(P<0.01)的比例也有不同程度的升高,但对脾细胞中CD4^+CD25^+Foxp3^+的表达无明显作用。结论雌激素预防性治疗可延缓EAE小鼠的发病进程,其作用机制可能与上调PD-1/PD-L1通路并上调调节性B细胞水平有关。

关键词： 免疫性血小板减少   利妥昔单克隆抗体   Th1/Th2   调节性B细胞   调节性T细胞   Th17细胞  

摘要： 目的:评估利妥昔单克隆抗体和地塞米松联合环磷酰胺治疗复发难治的免疫性血小板减少症(ITP)的有效性、安全性及其可能的作用机制。方法:前瞻性纳入12例复发难治的ITP患者,给予利妥昔单克隆抗体375 mg/m^2,每周1次,连用4周;地塞米松40 mg,连用4d环磷酰胺500 mg/m^2,两周1次,连用2周。用ELISA法检测患者治疗前后外周血IFN-r和IL-4水平,流式细胞术检测治疗前后调节性淋巴细胞Breg、Treg和Th17的水平,同时观察治疗前后血小板计数的变化,监测不良反应。结果:12例患者中6例(50.00%)获得完全缓解,4例(33.33%)部分缓解,总有效率为83.33%。治疗前血小板计数的平均值为(12.83±6.01)×10~9/L,治疗后血小板的平均峰值为(115.42±76.60)×10~9/L,二者差异有显著统计学意义(P<0.001)。治疗后IFN-r/IL-4比值(5.89±2.30)较治疗前(7.00±2.73)下降,差异均有显著统计学意义(P=0.002)。治疗后外周血Breg细胞(21.27±4.28)%较治疗前(15.48±1.67)%升高(P<0.001),Treg/Th17比值(3.07±1.50)较治疗前(0.98±0.45)升高(P<0.001),差异均有显著统计学意义。不良反应为输液反应(1例),继发性高血压和高血糖(1例),呼吸道感染(2例)。结论:利妥昔单克隆抗体和地塞米松联合环磷酰胺可改善复发难治ITP患者的疗效,且患者耐受性较好,其机制可能为促使辅助T细胞亚群及调节性淋巴细胞达到平衡。

关键词： 脊柱炎,强直性   血小板功能试验   T淋巴细胞,调节性   血沉  

摘要： 目的观察强直性脊柱炎(AS)患者血小板参数的变化及外周血B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)、调节性T细胞(Treg)的表达。方法选取60例AS患者,检测患者血小板参数,采用流式细胞术检测外周血BTLA及Treg的表达,观察AS患者血小板变化及其影响因素。结果 AS患者存在血小板参数异常变化,表现为PLT、PCT的升高。与正常组比较,AS患者外周血BTLA及Treg的表达降低;与BTLA正常者比较,BTLA异常组血小板参数PLT、PCT升高;与Treg正常者比较,Treg异常者血小板参数PLT、PCT升高,MPV降低(P<0.05 or P<0.01)。血小板参数与BTLA、Treg及C3、hs-CRP、IGG存在一定相关性(P<0.05 or P<0.01)。结论 AS患者外周血BTLA、Treg表达降低可能是引起血小板参数异常的原因。

关键词： 癌症   B细胞   调节性B细胞   肿瘤免疫  

摘要： 调节性B细胞(Breg)是继调节性T细胞后免疫领域研究的新热点,Breg是通过白细胞介素(IL)-10、IL-35,转化生长因子(TGF)-β产生免疫抑制作用的一类细胞。Breg通过阻止致病性T细胞和其他促炎性淋巴细胞扩增,从而发挥抑制免疫病理损伤作用。研究已证实,Breg在炎症、自身免疫性疾病以及癌症进展、转归和预后中发挥一定作用。本文就Breg与癌症的关系及其研究进展作一综述。

关键词： B淋巴细胞   调节性B细胞   肿瘤   肿瘤免疫  

摘要： B淋巴细胞作为体液和细胞免疫的重要组成部分,能够通过多种调控方式发挥正性免疫调节作用。然而,越来越多的研究表明,B淋巴细胞亦可通过多种途径参与机体的免疫抑制调节,其中在肿瘤中以免疫抑制作用为主。目前研究多关注于B淋巴细胞特殊亚型-调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)在肿瘤中发挥的免疫抑制性作用,并通过分泌多种细胞因子、调控T细胞的作用以及直接作用于恶性肿瘤细胞等多途径影响肿瘤的发生发展进程。本文就B淋巴细胞在肿瘤免疫抑制机制研究的最新进展作一综述,为B淋巴细胞作为抗肿瘤潜在治疗靶点及治疗策略提供新的思路。

关键词： 肝炎,丙型,慢性   调节性B细胞   调节性T细胞  

摘要： 目的：探讨慢性丙型肝炎患者外周血IL-10＋CD1＋9调节性B细胞（regulatory B cells，Breg）和CD ＋4 CD ＋25 high 调节性 T 细胞（regulatory T cells，Treg）的表达及其相互关系。方法选取慢性丙肝患者45例，健康对照者25例。流式细胞术分析外周血 Breg 和 Treg 的表达情况，并进行相关性分析，ELISA 测定血清IL-10和 TGF-β水平。结果慢性丙肝组 Breg 较健康对照组显著升高，差异有统计学意义[3．55％（2．40％～4．14％）比1．66％（1．24％～2．02％），t ＝6．78，P ＜0．01]，同时慢性丙肝组 Treg 也显著高于对照组，差异有统计学意义[4．55％（3．35％～5．88％）比2．05％（1．39％～2．61％），t ＝7．17，P ＜0．01]。丙肝组 Breg 与 Treg存在正相关关系（r ＝0．374，P ＝0．019），对照组则无此相关性。慢性丙肝组血清 IL-10表达水平显著高于对照组，差异有统计学意义[（78．65±17．21）pg／mL 比（53．21±11．47）pg／mL，t ＝7．51，P ＜0．001]。结论Breg 和 Treg 可能在 HCV 慢性感染过程中通过分泌 IL-10发挥免疫抑制作用，促进 HCV 的持续感染和特异性T 细胞的功能缺失。

关键词： 系统性红斑狼疮   白介素35   调节性B细胞   发病机制  

摘要： 研究背景：\n 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种表现有多系统损害慢性自身免疫疾病，其临床特征是产生大量自身抗体和多系统、器官受累。该病女性发病率高于男性，比例约为9:1，且多见于育龄期妇女，对患者的健康和生活质量造成了重大危害，但SLE的发病机制尚不明确，遗传、环境、雌激素、免疫等因素都可能与之相关，免疫失衡贯穿整个发病过程，B细胞和T细胞是SLE发病的重要参与者。既往认为B细胞主要通过分泌大量自身抗体，形成免疫复合物，参与体液免疫或直接对机体造成损害。但最近几年发现在实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)小鼠模型中，缺乏B细胞和CDl9-/-的小鼠病情更加严重，提示B细胞可以缓解病情，推测B细胞有负性调节作用。2006年，Mizoguchi等提出通过分泌IL-10、TGF-β、IL-35等负性调节因子，发挥负性免疫调节作用的B细胞群体称为调节性B细胞（Bregs）。Bregs可以通过调节Thl/Th2平衡抑制有害免疫应答，或可以直接减缓免疫细胞介导的炎症反应。Bregs已成为近几年研究热点，在多种疾病（如多发性硬化、类风湿关节炎、炎性肠病、肿瘤、移植、感染、慢性肝炎等）中参与免疫调节，与疾病的发生、发展、转归密切相关。\n 近年的研究发现，调节性B细胞还有一种新的亚群—白介素35阳性调节性B细胞（IL-35+Bregs）,一些研究证明IL-35和IL-35+Bregs在多种动物实验模型中参与发病，如在缺乏表达IL-35+Bregs的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型中调节性B细胞丧失功能，出现神经系统的脱髓鞘病变[5]。动物实验提示IL-35+Bregs主要通过分泌IL-35发挥免疫作用，IL-35是IL-12家族中的新成员，由EB病毒诱导基因3（Epstein-Barr virus-induced gene3，EBI3）蛋白和IL-12p35（IL-12A）亚基组成的异源二聚体， IL-35可反复诱导IL-35+Bregs细胞及IL-35的再分泌，形成正反馈机制。IL-35也可由调节性T细胞（Tregs）分泌，与Bregs可能有协同作用。IL-35+Bregs作为一种新的负性免疫调节的关键细胞，在体内发挥强有力的抗炎作用。事实上，IL-35可以抑制Th17细胞，在小鼠胶原性关节炎（CIA）、实验性自身免疫性脑炎(EAE)、实验性自身免疫性心肌炎(EAM)中缓解病情，提示IL-35在自身免疫性疾病中起着重要免疫调节的作用，另在MRL/PrA鼠模拟的系统性红斑狼疮模型研究经IL-35治疗的鼠肾炎指标可以得到改善。在SLE患者中血浆IL-35表达下调，与病情活动程度呈负相关，提示IL-35可能参与SLE的发病，而IL-35+Bregs通过分泌IL-35发挥重要的免疫调节作用。\n 因此，我们初步推测IL-35+Bregs可能参与SLE的发生、发展。本研究采用流式细胞术检测SLE患者和健康对照者外周血中CD19+IL-35+Bregs细胞及D4+CD25+F OXP3+Tregs细胞的比例，同时应用ELISA技术检测细胞培养上清中IL-35水平，分析其与疾病活动的关系，探讨IL-35+Bregs细胞及其效应细胞因子在SLE发病机制中的作用。\n 研究目的：\n 检测系统性红斑狼疮患者外周血中IL-35+CD19+Bregs细胞的表达，探讨IL-35+CD19+Bregs细胞在SLE发病机制的作用。\n 研究方法：\n 选择50例SLE患者（其中活动期30例，稳定期20例）和20例健康对照者为研究对象，分离外周血单个核细胞(PBMCs)，以LPS和hINF-γ刺激 PBMCs并进行培养，用流式细胞术分析外周血IL-35+CD19+Breg细胞CD4+CD25+FOXP3+Tregs细胞的表达；ELISA方法检测培养上清中白细胞介素（IL）-35的水平。\n 研究结果：\n 一、外周血IL-35+CD19+Bregs细胞检测结果：\n 1、外周血IL-35+CD19+Bregs细胞的表达：\n 外周血IL-35+CD19+Bregs细胞的表达(IL-35+CD19+Bregs／CD19+B细胞)：活动期SLE患者外周血中IL-35+CD19+Bregs细胞的表达为(1.43±0.67)％，稳定期SLE患者组为(2.27±0.68)％，两组比较P＜0.01；活动期SLE组和正常对照组[(4.24±1.11)％]比较P＜0.01；稳定期SLE患者组与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。\n 2、外周血IL-35+CD19+Bregs细胞的表达与疾病活动程度的相关性：\n SLE患者外周血C

关键词： Bla细胞   自身免疫性胆管炎   调节紊乱   调节性B细胞   腹腔  

摘要： 原发性胆汁性胆管炎（PBC）是一种自身免疫性肝脏疾病,它的典型特征是肝脏有大量淋巴细胞浸润在胆管周围,并且血清中有高滴度的由自身反应性B细胞分泌的抗线粒体抗体AMAs。有很多因素参与到PBC的发病过程中,包括免疫失调、遗传的易感性以及环境因素等。已有的研究指出B细胞在PBC的发病过程中的作用十分复杂,根据情况不同,可能发挥致病性作用或者免疫调节性功能。但是其具体机制尚不清楚,仍然需要进一步研究和探索。B细胞是一类重要的免疫细胞,主要分为2个亚群,即B1细胞（包含B1a细胞和Blb细胞）和B2细胞。这两个B细胞亚群在前体细胞来源、发育途径、组织分布、表型及功能等方面存在差异。在自身免疫性疾病发生过程中,一般认为B细胞通过分泌抗体发挥致病性作用。但最近的研究发现B细胞除了包含发挥致病性功能的亚群,同时还具有免疫调节性功能的亚群。调节性B细胞（Breg细胞）发挥功能的机制主要包括产生IL-10和TGF-β、参与次级抗原递呈、与致病性T细胞相互作用以及诱导调节性T细胞（Treg细胞）的产生等。B1细胞是一个特殊的B细胞亚群,大量存在于腹腔及胸腔中,主要通过分泌天然抗体、作为抗原递呈细胞以及分泌细胞因子来发挥免疫保护作用。B1细胞来源的天然抗体在细菌和病毒感染过程中发挥重要的保护作用。Bla细胞是腹腔B1细胞中的主要亚群,Bla细胞经典的功能包括产生血清中静息状态的IgM、分泌肠道IgA以及发挥免疫调节功能等。B1a细胞是抗炎性细胞因子IL-10的主要来源,并且在接触性超敏反应模型以及病理条件下能够发挥免疫调节性功能。为了更好的阐明B细胞亚群在PBC发病进程中的作用,我们以p40-/-IL-2Rα-/-小鼠以及被广泛研究的dnTGF-βRII小鼠作为PBC的模型鼠展开研究。本论文主要探究了p40-/-IL-2Rα-/-小鼠中腹腔B1a细胞的紊乱与自身免疫性胆管炎的关系,同时利用dnTGF-βRⅡ小鼠腹腔B细胞的共转输实验对模型鼠中腹腔B细胞的免疫调节性功能进行验证。目前取得的结果如下：1.p40-/-IL-2R α-/-模型鼠腹腔徽环境改变影响腹腔B细胞数目并与肝脏炎症具有相关性为了探究p40-/-IL-2Rα-/-模型鼠肝脏损伤时腹腔微环境的变化,通过检测腹腔中各细胞亚群数量,我们发现模型鼠中腹腔总细胞数目显著增多,且增多的主要是T细胞,尤其是致病性的CD8+T细胞,而B细胞数目显著减少。进一步研究表明模型鼠腹腔CD4+和CD8+T细胞分泌Thl型炎性细胞因子IFN-γ的能力显著增强。通过检测腹腔灌洗液中炎性细胞因子的水平,我们发现促炎性细胞因子TNF和MCP-1水平显著升高,这可能是导致腹腔各细胞亚群改变的原因。通过相关性分析,发现模型鼠中腹腔总细胞数与肝脏单个核细胞数呈正相关,腹腔中B1a细胞占B细胞的比例与腹腔及肝脏单个核细胞数呈负相关,且腹腔中Bla细胞占B细胞的比例与腹腔及肝脏中致病性的CD8T细胞的比例呈负相关。2. p40-/-IL-2Rα-/-模型鼠腹腔Bla细胞数目减少且功能性分子改变通过对PBC模型鼠发病过程中腹腔B细胞的详细检测,我们发现相比于对照鼠,模型鼠腹腔B1a及B1b细胞的比例和数目显著降低,而且模型鼠腹腔Bla细胞的比例随着年龄增长逐渐降低。进一步的机制研究表明模型鼠腹腔Bla细胞增殖能力显著降低且凋亡水平显著升高。模型鼠腹腔B1a细胞数目显著减少的同时,与Bla细胞免疫调节性功能相关分子,包括IL-10, CTLA-4和GITR的表达水平都显著下降;与B1a细胞活化及免疫共刺激相关分子CD44和CD80的表达水平明显降低。通过对另一种PBC模型鼠,即dnTGF-βRII小鼠的表型检测,我们发现与p40-/-IL-2Ra-/-模型鼠类似, dnTGF-βRII小鼠腹腔B1a细胞比例下降,且表达IL-10、CTLA-4、CD44和CD80的水平同样显著低于同窝对照鼠。3. p40-/-IL-2Rα-/-模型鼠腹腔Bla细胞转录组学分析为了全面探究p40-/-IL-2Ra-/-模型鼠腹腔B1a细胞转录组变化及其内在机制,利用基因芯片技术并配合荧光定量PCR验证,我们发现与对照鼠相比,模型鼠腹腔Bla细胞有381个基因发生了显著变化（2倍以上差异）,其中包含大量细胞因子及其受体相互作用相关、转录因子活化相关及细胞周期相关基因的变化。且多个与B细胞功能相关的基因都发生了显著改变,其中具有免疫抑制性基序（ITIM）的分子CD72 （Cd72）、CD22 （Cd22）等表达显著上升,与流式结果一致的Cd44、Ctla4等表达显著下降,以及IL-10的上游抑制分子AHR （Ahr）等表达显著上升。这些发现详细地展示了模型鼠与对照鼠腹腔Bla细胞存在的差异,揭示了B1a细胞异常在PBC发病过程中的重要作用机制,并提示了

关键词： Caspase-1抑制剂   白介素-1β   树突状细胞   Th17细胞   实验性自身免疫性重症肌无力   滤泡辅助T细胞   调节性B细胞  

摘要： 研究背景：重症肌无力(Myasthenia gravis, MG)是以损伤神经肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor, AChR)为特征,从而导致神经肌肉处传导功能障碍产生肌肉无力的自身免疫性疾病,这个过程是需要自身抗体介导,T细胞依赖,补体参与。为了更好地研究人类MG的发病机制及治疗方法,从电鳐器官中提取AChR,通过皮下免疫Lewis大鼠能够成功地建立实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG)动物模型。进一步研究证实,人工合成的大鼠来源的AChR α亚基97-116肽段(R97-116)也可以起到类似作用,通过其皮下注射诱导的EAMG模型临床评分、免疫学特征、电生理学指标及自身抗体水平与从电鳐器官中提取的AChR诱导的EAMG模型非常类似。树突状细胞(dendric cell, DC)、组织巨噬细胞、血液单核细胞等可以产生高效促炎因子IL-1β,这依赖于半胱氨酸天冬氨酸酶(Cysteinyl aspartate-specific proteinase-1, caspase-1)的激活。Pro-IL-1β和pro-IL-18前体需要激活的caspase-1加工、剪接从而成为有活性的成熟形式,而caspase-1的活化需要炎性复合体(inflammasome)的分子复合物的参与。IL-1p和IL-18能够诱导固有免疫细胞包括γδT细胞、NKT细胞分泌IL-17。成熟的IL-1p首先与固有免疫细胞表面的I型IL-1受体结合,然后与IL-1受体辅助蛋白结合形成受体复合物。Toll样受体结构域募集衔接分子MyD88,然后激活NF-κB,激活的NF-kB转移到细胞核内并诱导促炎细胞因子转录。IL-1靶向药物,比如IL-1受体拮抗剂阿那白滞素、IL-1p单克隆中和抗体康纳单抗,能够快速、持久地抑制炎症疾病。C57BL/6 EAMG大鼠每天注射IL-1受体拮抗剂可以通过减少血清IFN-7, TNF-a, IL-1β, C3, anti-AChR IgGl水平抑制EAMG临床症状。最近研究发现caspase-1对固有免疫细胞的IL-17产生起着重要作用。Caspase-1在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)发病机制中的作用已经阐明,在疾病的炎性过程中caspase-1蛋白水平和活性是上调的。Caspase-1基因敲除的小鼠EAE疾病发病率下降,这与Thl细胞受抑制和中枢神经系统血管周围炎性浸润减少有关。在体内实验中,抑制caspase-1可以抑制Th17细胞和EAE的发生,注射IL-1p或者IL-18可以逆转这种现象,注射IL-1p效果更显著。另外,一些研究已经证实激活的caspase-1可以通过分泌IL-1p上调树突状细胞表面的N IHC class Ⅱ、CD80口CD86分子。我们由此推断caspase-1是治疗自身免疫疾病的重要药物。在这个研究中,我们检测了c aspase-1抑制剂对EAMG大鼠的影响,及其在内源性树突状细胞、白介素-1、白介素-17途径中的作用,为MG的治疗提供了新的方向和思路。研究目的：探讨caspase-1抑制剂影响实验性自身免疫性重症肌无力的细胞免疫学机制。研究方法：1.建立EAMG模型及临床分级选择健康的雌性Lewis大鼠,一般6-8周龄,体重160-180 g。用H37Ra株热灭活结核杆菌和不完全弗氏佐剂溶解人工合成的大鼠来源的AChR α亚基97-116肽段(R97-116),首先每只大鼠在双后足垫皮下注射免疫剂量200μl,然后首次免疫11天后在每只大鼠背部再次免疫1次,作为强化免疫。每间隔一天采用Lennonl临床评分量表对每只大鼠进行临床分级和称重,这个过程需要采用双盲法。2.动物分组分别设立caspase-1抑制剂Ac-YVAD-cmk治疗组、caspase-1抑制剂Ac-YVAD-cmk+IL-1β治疗组和EAMG对照组。于第一次免疫后的第13天和第14天分别给予腹腔注射Ac-YVAD-cmk和IL-1β及等体积的灭菌PBS,观察症状直至发病高峰期。3.制备脾脏、骨髓DC及检测通过无菌操作分离、摘取Lewis大鼠的脾脏,在超净台中研磨脾脏组织,过滤、离心获取单个核细胞悬液。用裂解液破坏细胞悬液中的红细胞,离心、冲洗后将细胞悬液转移至培养瓶中,于37℃、5% CO2条件下培养1 h 40 min,平晃培养瓶,使悬浮细胞离壁,弃掉其内液体,冲洗并留取贴壁细胞,加入完全培养液继续培养18h,最后悬浮的细胞即是脾脏树突状细胞。同样的取Lewis大鼠的股骨和胫骨,制备单细胞悬液,加入10 ng/ml