关键词： 高迁移率族蛋白B1   调节性T细胞   黄芪甲苷   免疫抑制   脓毒症  

摘要： 目的在体外实验基础上,明确高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在体内对小鼠调节性T细胞(Treg)免疫功能的影响,同时观察不同剂量黄芪甲苷(AST IV)对HMGB1介导的Treg免疫功能是否具有拮抗作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠,予实验当日早、晚各腹腔注射10μg HMGBl,并于注射后第2天、4天、6天分别予腹腔注射生理盐水或黄芪甲苷。实验分组:120只小鼠随机分为6组(每组20只)。正常对照组;HMGB1实验组;(HMGB1+NS)组;(HMGB1+AST)I组;(HMGB1+AST)II组;(HMGB1+AST)III组。于实验第7天处死动物,提取脾脏Treg,并将Treg与CD4+CD25-T淋巴细胞进行共培养,对Treg细胞免疫功能状态进行检测。结果当加入HMGB1攻击组Treg共培养后,CD4+CD25-T细胞增殖受抑制程度较加入正常对照组Treg明显减轻(P<0.01),上清中IFN-γ较对照组明显升高(P<0.01),IL-4水平较对照组显著降低(P<0.01);生理盐水治疗组动物上述指标与HMGBl攻击组比较无统计学差异(P>0.05);与生理盐水治疗组比较,AST治疗组CD4+CD25-T细胞增殖受抑制程度显著加重(P<0.01),IFN-γ水平明显降低(P<0.01),IL-4水平显著上升(P<0.01),且这种趋势在高剂量组较低剂量组更为显著(P<0.05)。结论 HMGB1在体内可抑制小鼠Treg免疫功能发挥,而黄芪甲苷可拮抗HMGB1对Treg免疫功能的抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。

关键词： 糖尿病酮症酸中毒   CD4+CD25+调节性T细胞   胰岛B细胞   功能改变  

摘要： 目的探讨糖尿病酮症酸中毒(DKA)患儿外周血调节性T细胞(Treg)和胰岛B细胞功能的变化情况及两者的关系。方法 34例1型糖尿病患儿,根据有无并发DKA分为DKA组(24例)、非DKA组(10例),20例正常健康儿童作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Treg百分率,化学发光法检测血清空腹C肽(FC-P)、胰岛素及糖化血红蛋白(HbA1c)水平。结果 DKA组和非DKA组外周血CD4+CD25+Treg百分率、胰岛素、FC-P低于正常对照组,HbA1c高于正常对照组(P<0.05);DKA组外周血CD4+CD25+Treg百分率、胰岛素和FC-P低于非DKA组,HbA1c高于非DKA组(P<0.05)。相关分析显示,CD4+CD25+Treg百分率与胰岛素、FC-P呈正相关(r=0.627、0.532,P<0.05),与HbA1c水平呈负相关(r=-0.708,P<0.05)。结论 DKA患儿外周血CD4+CD25+Treg百分率减低,可能参与了儿童DKA的发生和发展,与胰岛B细胞功能相关。

关键词： 1型糖尿病   调节性B细胞   调节性T细胞   白细胞介素10  

摘要： 以流式细胞术检测1型糖尿病患儿外周血调节性B细胞（ Breg） CD19＋CD24hi CD38hi Breg、CD4＋CD25＋Treg比例,酶联免疫吸附法检测培养上清中白细胞介素10（ IL-10）浓度；实时定量PCR检测外周血B细胞IL-10和CD4＋T细胞中Foxp3、细胞毒T淋巴细胞抗原4（ CTLA-4）、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（GITR）的mRNA表达。结果显示,1型糖尿病患儿外周血CD19＋CD24hiCD38hiBreg细胞比例、B细胞IL-10 mRNA和蛋白水平均明显低于对照组（P＆lt;0.05）；Treg相关分子Foxp3、CTLA-4和GITR mRNA表达明显低于对照组（P＆lt;0.05）。这些结果提示Breg细胞数量及功能异常可能是导致1型糖尿病患儿免疫功能紊乱的重要原因之一。

关键词： 白细胞介素35(IL-35)   调节性T细胞   调节性B细胞   免疫抑制   自身免疫性疾病   综述  

摘要： 白细胞介素35(IL-35)是IL-12家族成员之一,主要发挥抗炎及免疫抑制作用。IL-35是调节性T细胞发挥最大抑制效应所必需的一种抑制性细胞因子,IL-35诱导的调节性B细胞在自身免疫性和感染性疾病中也发挥关键调控作用。自身免疫性疾病的小鼠模型研究结果提示,IL-35可通过IL-10依赖的机制在调控免疫反应性方面发挥作用,重组型IL-35可增强自身免疫调控,推测IL-35在人类疾病中也有相似的作用,并对IL-35的靶向治疗充满期待。现就IL-35的结构、功能以及在人类自身免疫性疾病方面的研究进展进行综述。

关键词： 多发性骨髓瘤/药物疗法   多发性骨髓瘤/免疫学   T淋巴细胞   T淋巴细胞,调节性   B淋巴细胞  

摘要： 【目的】探讨免疫联合化疗对多发性骨髓瘤（MM）患者外周血T、B淋巴细胞及调节性T细胞（Tregs）水平的影响。【方法】本院收治的MM患者60例，采用数字随机对照表分为两组，每组各30例；对照组给予DC-CIK免疫治疗＋化疗，对照组仅给予化疗，评估两组临床疗效，观察两组T淋巴细胞、Tregs水平、B细胞、浆细胞比例水平变化；随访1年，比较两组复发率。【结果】观察组治疗有效率为53．33％（i6／30）显著高于对照组26．67％（8／30），1年复发率为6．67％（2／30）显著低于对照组30．0％（9／30），且差异有显著性（P〈0．05）。观察组治疗后CD4＋T淋巴细胞比例、CD4＋／CD8＋T淋巴比值显著高于对照组，CD8＋T淋巴细胞比例显著低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）。观察组治疗后CD4＋CD25＋Tregs、CD4＋CD25 high Tregs显著低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）。观察组治疗后B细胞比例高于对照组，浆细胞比例低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）。【结论】DCcIK免疫治疗＋化疗能够改善MM患者免疫功能紊乱症状，降低浆细胞比例，提高临床疗效。

关键词： 红斑狼疮,系统性   B淋巴细胞   T淋巴细胞   白细胞介素35  

摘要： 目的：检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血白细胞介素35^＋调节性B细胞（IL-35^＋Bregs）的表达，并探讨其在SLE发病机制中的作用。方法以2015年1月至2016年1月就诊于本院风湿免疫科的SLE患者50例为研究对象，按SLE活动指数（SLEDAI）分为活动期SLE组（n=30）和稳定期SLE组（n=20）。以同期健康志愿者20例作为正常对照组。分离外周血单个核细胞（PBMC）进行培养，流式细胞术检测各组外周血IL-35^＋CD19^＋Bregs和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞（Tregs）表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清液IL-35水平。结果流式细胞术检测显示，活动期SLE组、稳定期SLE组和正常对照组外周血IL-35^＋CD19^＋Bregs表达分别为（1.43±0.67）％、（2.27±0.68）％、（4.24±1.11）%，组间两两比较差异均具有统计学意义（均P〈0.01）；活动期SLE组、稳定期SLE组和正常对照组外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ Tregs表达分别为（2.26 ±0.49）％、（3.82 ±0.94）％、（5.77±1.09）％，组间两两比较差异均具有统计学意义（均P〈0.01）。活动期SLE组、稳定期SLE组外周血IL-35^＋CD19^＋Bregs和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tregs表达均低于正常对照组，且活动期SLE组均低于稳定期SLE组。活动期SLE组、稳定期SLE组和正常对照组细胞培养上清液IL-35水平分别为（5.48±1.68）pg/ml、（7.74±1.26）pg/ml、（11.96±1.67）pg/ml，组间两两比较差异均具有统计学意义（均P〈0.01）。活动期SLE组细胞培养上清液IL-35水平低于稳定期SLE组和正常对照组。SLE患者外周血IL-35^＋CD19^＋Bregs表达与CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tregs表达呈正相关（r=0.813，P〈0.01），SLE患者外周血IL-35^＋CD19^＋Bregs表达、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tregs表达与细胞培养上清液IL-35水平均呈正相关（r=0.862、0.811，均P〈0.01）。结论 IL-35^＋Bregs可能通过分泌IL-35参与了SLE的发病。

关键词： IL-35   调节性B细胞   桥本甲状腺炎  

摘要： 目的探讨IL-35^+调节性B细胞(i35-Breg)在桥本甲状腺炎(HT)免疫发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测36例HT患者及32例对照者外周血CD19^+IL-12p35^+IL-27EBI3^+细胞比例及PD-L1、CD169、PD-1、CD43、IL-12p35、IL-27EBI3、IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测CD19^+细胞SHP-2、Vav mRNA表达,ELISA检测血浆中IL-35、TNF-α、IL-12水平。结果 HT患者外周血CD19^+IL-12p35^+IL-27EBI3^+细胞比例及IL-12p35、IL-27EBI3、IL-10表达明显低于对照组(P<0.01)。HT患者血浆IL-35水平及CD19^+B细胞IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达明显低于对照组(P<0.01),而血浆TNF-α、IL-12水平及CD14+细胞PD-L1、CD169表达明显高于对照组(P<0.01)。结论 i35-Breg细胞数量及功能异常可能是导致HT患者免疫功能紊乱的重要因素之一。

关键词： 免疫耐受   调节性B细胞   转化生长因子-β   心脏移植   胰岛移植  

摘要： 目的研究抗CD45RB抗体或联合抗Tim-1抗体诱导的移植免疫耐受中转化生长因子(TGF)-β的调节作用。方法建立小鼠同种异体心脏移植以及胰岛移植模型,前者用抗CD45RB抗体和(或)抗TGF-β抗体治疗,后者用抗CD45RB抗体联合抗Tim-1抗体治疗并加用或不用抗TGF-β抗体,观察移植物长期存活时间。分离胰岛移植物长期耐受的受体B细胞,过继输注至胰岛细胞移植模型小鼠体内,经抗TGF-β抗体治疗后观察移植胰岛的存活情况。在体外将经双抗体治疗14 d的移植有胰岛细胞的受体B细胞与脂多糖(LPS)混合刺激培养过夜,采用流式细胞仪检测CD19+LAP+细胞的比例。结果抗CD45RB抗体治疗后有6/9的同种异体小鼠心脏长期存活,但若加用抗TGF-β抗体治疗则所有移植心脏均被排斥。在小鼠胰岛细胞移植模型中,抗CD45RB抗体联合抗Tim-1抗体治疗后有90%移植物长期耐受,但加用抗TGF-β抗体后则无1例移植物长期存活。B细胞输注治疗后,8/9的胰岛移植物不被排斥,而加用抗TGF-β抗体后则移植物很快被排斥。B细胞体外刺激培养,流式细胞术检测显示CD19+LAP+细胞在B细胞中的比例显著增高(P<0.0001)。结论抗CD45RB抗体或联合抗Tim-1抗体诱导的移植免疫耐受需要TGF-β,其可能受调节性B细胞的调节。

关键词： 调节性B细胞   肿瘤免疫   IL-10   TGF-β1  

摘要： B细胞介导的体液免疫在肿瘤免疫系统中发挥着重要作用。研究发现,确实存在一种名为调节性B细胞(Bregs)的B淋巴细胞亚群,可与肿瘤细胞相互作用,通过分泌白细胞介素10和转化生长因子β等细胞因子,在肿瘤免疫系统中承担其特殊的调节性作用。针对Bregs的肿瘤诊断思路和治疗方法的研究也初步展开,并显示出其重要的研究价值和广阔的应用前景。