关键词： 口腔扁平苔藓   口腔苔藓样损害   B淋巴细胞   调节性B细胞   单细胞测序  

摘要： 目的:分析口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)和苔藓样损害(oral lichenoid lesion,OLL)中的B细胞数量比例、分布状态和浸润特点,并评价其与临床治疗转归的相关性。方法:收集OLP、OLL和健康口腔黏膜组织,应用单细胞测序技术分析组织中的B细胞表型和数量比例;另回顾性收集OLP组织31例、OLL组织69例,应用免疫组化染色观察CD20^(+)B细胞和CD20^(+)IL-10^(+)B细胞在组织中的浸润部位、数量比例和浸润特点,进一步评价这些特点与临床治疗效果的相关性。结果:单细胞测序结果显示,B细胞在OLP、OLL和健康黏膜中占总细胞数量分别为4.34%、0.59%、0.44%,其中IL-10^(+)的调节性B细胞约占总B细胞数量分别为1%、0.94%、1.35%;GO分析显示,OLP、OLL中B细胞的功能主要富集在胞质翻译产物等方面。免疫组化结果显示,OLP组和OLL组中存在CD20^(+)B细胞浸润。OLP组和OLL组中分别有92.9%、41.9%病例数的CD20^(+)B细胞分布于固有层浅层(P<0.0001),25.0%、62.9%病例数存在B细胞灶性分布(P=0.0009)。而在OLP和OLL损害中均罕见共表达CD20和IL-10的细胞类型。OLP和OLL两组中存在B细胞浸润(B^(+))的病例,其治疗前后的REU评分差异均具有统计学意义(P值均<0.01),而无明显B细胞浸润(B-)的病例,治疗前后REU评分差异无统计学意义(P值均>0.05);OLP队列中B^(+)组和B-组的治疗前后REU差值相比,差异无统计学意义(P=0.659),而OLL队列两个亚组的治疗前后REU差值差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:CD20^(+)B细胞广泛存在于OLP和OLL损害中,B细胞的浸润数量与口服糖皮质激素的治疗效果有关,但其确切的临床意义和病理机制仍有待进一步研究。

关键词： 调节性B细胞   白细胞介素10   慢性乙型肝炎  

摘要： 目的通过利妥昔单抗破坏小鼠HBV感染的免疫耐受状态,了解Bregs细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法用流式细胞仪动态观察慢性HBV感染小鼠模型中Bregs细胞的数量,同时测量血清IL-10水平、肝功能和凝血功能,并分析Bregs、IL-10和肝功能之间的相关性。结果利妥昔单抗破坏的小鼠肝脏、脾脏和外周血中Bregs细胞低于没有利妥昔单抗破坏的小鼠分别为0.54(0.49,0.71)%比1.34(1.15,1.54)%、3.19(2.90,3.57)%比4.75(3.92,5.32)%、2.50(2.29,2.64)%比3.35(3.07,3.58)%(P<0.05);与对照组相比,利妥昔单抗破坏的小鼠血清IL-10水平也较低为21.51(14.70,28.28)pg/mL比32.87(27.76,35.82)pg/mL(P<0.05)。此外,实验组中Bregs细胞的变化与IL-10呈正相关(r=0.73、0.74、0.71,P<0.05)。实验组的ALT和AST水平高于对照组;实验组的IL-10水平与ALT和AST水平之间存在负相关关系。结论Bregs细胞在慢性乙型肝炎的发病机制中通过分泌IL-10抑制炎症活动。

关键词： 隔药饼灸   免疫抑制   环磷酰胺   TIGIT   CD155   JAK2   STAT3  

摘要： 目的观察隔药饼灸对免疫抑制兔TIGIT/CD155和JAK2/STAT3通路表达的影响及相关性,探讨隔药饼灸介导免疫应答的机制。方法将32只日本大耳白兔随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组,每组8只。除空白组外,其余3组连续7 d腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg建立免疫抑制模型。造模成功后次日开始干预,选取“神阙”“关元”“足三里”“脾俞”“肾俞”隔日灸,共10次。ELISA检测血清白细胞介素(IL)-10、TIGIT、CD155含量,Western blot检测肝组织JAK2、STAT3蛋白表达,免疫组化检测脾组织和肝组织TIGIT表达。采用Pearson相关性分析评价上述指标间相关性。结果与空白组比较,模型组兔血清IL-10含量显著减少,TIGIT、CD155含量明显增加(P<0.01),肝组织JAK2、STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),肝组织和脾组织TIGIT表达升高(P<0.01);与模型组比较,艾条灸组和隔药饼灸组兔血清IL-10含量显著增加,TIGIT、CD155含量显著减少(P<0.01),隔药饼灸组肝组织JAK2、STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),艾条灸组和隔药饼灸组兔肝组织、脾组织TIGIT表达显著降低(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,血清IL-10与CD155(r=-0.68)、TIGIT(r=-0.72)含量呈负相关,与肝组织JAK2(r=0.73)、STAT3(r=0.75)表达呈正相关;肝组织JAK2与血清CD155(r=-0.84)、TIGIT(r=-0.88)含量呈负相关,与肝组织STAT3(r=0.98)呈正相关;肝组织STAT3与血清CD155(r=-0.86)、TIGIT(r=-0.89)呈负相关。结论隔药饼灸对免疫抑制兔免疫功能有明显改善作用,该作用与IL-10介导的JAK2/STAT3通路及TIGIT变化有密切关系。

关键词： 调节性T细胞   DLBCL   预后  

摘要： 目的：研究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma， DLBCL)患者初诊时外周血中调节性T细胞(regulatory T cell， Treg)水平及其对疗效评估和预后判断的价值。方法：选取2018年1月-2022年2月期间我院收治的72例初诊DLBCL患者作为研究对象，以17例健康志愿者为对照，使用流式细胞术检测所有纳入研究对象的外周血中CD4+CD25+CD127lowTreg水平，并结合患者的临床特征进行比较分析。结果：患者治疗前外周血Treg百分比与Ann Arbor分期、IPI评分、ECOG评分、血红蛋白(HB)相关；初诊时外周血Treg水平显著低于健康对照(3.85±0.22 vs 5.15±0.31，P=0.007)；根据初诊时外周血CD4+CD25+CD127low细胞占CD4+T细胞百分比的中位数将DLBCL患者分为高Treg组和低Treg组， 低Treg组患者的治疗总有效率明显低于高Treg组(P=0.035)；有B症状(P=0.040)和低Treg(P=0.014)是影响DLBCL患者PFS的独立危险因素；有B症状(P=0.028)、ECOG评分≥2分(P=0.041)和低Treg(P=0.036)是影响患者OS的独立危险因素；低Treg组PFS(P=0.020)和OS(P=0.036)均显著低于高Treg组。结论：初诊DLBCL患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比低提示预后不良。

关键词： 布鲁菌病   调节性B细胞   细胞因子   免疫反应  

摘要： 目的检测布鲁菌病(布病)急性期和慢性期患者治疗前后外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD27^(+)调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)和血清细胞因子IL-10和IFN-γ水平。分析布病患者不同病程中Bregs和细胞因子变化特点,评估机体免疫反应状态。方法选取2021年6月—2022年7月在新疆医科大学第八附属医院诊治的急、慢性期布病患者各20例,在治疗前后分别抽取血标本,并设立健康对照组(20例),入组后抽取血标本。应用流式细胞术检测各组Bregs水平,ELISA法检测外周血IL-10和IFN-γ水平,对各组检测结果进行统计学分析。结果与健康对照组相比,急、慢性期2组患者治疗前Bregs水平均明显升高;治疗后水平均下降,但慢性期组仍高于健康对照组和急性期组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与健康对照组相比,治疗前急、慢性期组IL-10均明显升高,治疗后2组水平均下降,但仍高于健康对照组,且差异均具有统计学意义(P均<0.05)。与对照组相比,治疗前,急、慢性期组血清IFN-γ水平均明显升高,治疗后,2组血清IFN-γ水平较治疗前明显下降,但急性期组仍高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论布鲁杆菌感染机体后,伴随着高水平的IFN-γ机体炎症反应,急性期和慢性期均会出现Bregs、IL-10水平升高。急性期组治疗前炎症因子IFN-γ水平升高伴Bregs明显增加,治疗后明显下降。慢性期患者治疗后Bregs和IL-10水平仍偏高,提示出现并发症或转为慢性化可能。

关键词： 视神经脊髓炎   视神经脊髓炎谱系疾病   B淋巴细胞,调节性   细胞因子类   免疫调节   白细胞介素类   淋巴细胞表型   酶联免疫吸附测定  

摘要： 背景调节性B淋巴细胞(Breg)是一类具有负向免疫调节作用的细胞,在多种自身免疫性疾病中表达异常,视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)系自身免疫性疾病,目前关于Breg在NMOSD患者外周血中的表达和意义的研究较少。目的研究Breg在NMOSD患者外周血中的表达和意义。方法选取2019年6月—2021年12月新疆医科大学第一附属医院神经内科收治的NMOSD患者55例作为NMOSD组,选取同期本院体检正常的健康志愿者50例作为对照组。运用流式细胞仪检测两组研究对象外周血中CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) Breg、CD19^(+)CD24^(hi)CD27^(+)Breg的表达。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测和比较两组研究对象血清中白介素10(IL-10)、白介素35(IL-35)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平。结果NMOSD组患者CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) Breg、CD19^(+)CD24^(hi)CD27^(+)Breg细胞表型比例低于对照组(t=6.235、12.131,P<0.05)。NMOSD组患者IL-10、IL-35、TGF-β1水平均低于对照组(t=4.249、7.316、2.057,P<0.05)。结论Breg及其细胞因子在NMOSD患者中表达下降,提示负性免疫调节在NMOSD疾病的发生和进展中发挥作用。

关键词： 弥漫大B细胞淋巴瘤   调节性T细胞   肿瘤微环境  

摘要： 弥漫大B细胞淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤中最常见的一种,目前CD20单克隆抗体联合化疗使其缓解率较前增加,但仍有部分人群疗效欠佳甚至耐药,仍需要开发新的药物提高缓解率。调节性T细胞作为免疫调节中发挥重要作用的细胞群体,其在弥漫大B细胞淋巴瘤肿瘤微环境中协调细胞和分子网络,介导局部免疫抑制状态,从而促进肿瘤细胞的增殖、迁移。据此有望靶向治疗弥漫大B细胞淋巴瘤。将对调节性T细胞在弥漫大B细胞淋巴瘤肿瘤微环境的作用机制作一综述。

关键词： 免疫性血小板减少症   调节性B细胞   调节性T细胞   细胞因子  

摘要： 目的:探讨免疫性血小板减少症(ITP)患者治疗前后调节性B细胞(Breg)、调节性T细胞(Treg)及其相关细胞因子水平及意义。方法:选取2018年12月至2022年1月在我院治疗的ITP患者103例作为观察组,同时选取健康志愿者103例作为对照组,检测两组Breg细胞、Treg细胞、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、可溶性程序性死亡1(sPD-1)和可溶性程序性死亡配体1(sPD-L1)差异,同时分析观察组治疗前后Breg细胞、Treg细胞等差异。结果:观察组Breg细胞、Treg细胞、TGF-β、IL-10和IL-4分别为(4.46±1.01)%、(5.11±1.03)%、(2203.19±225.51)pg/mL、(4.06±0.93)pg/mL和(298.32±55.62)pg/mL,明显低于对照组(P<0.05),IL-17和sPD-1分别为(12.01±2.28)pg/mL和(110.32±19.20)pg/mL,明显高于对照组(P<0.05)。观察组和对照组sPD-L1比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后3个月Breg细胞、Treg细胞、TGF-β、IL-10和IL-4较治疗前升高(P<0.05),而IL-17和sPD-1较治疗前降低(P<0.05)。观察组治疗无效患者治疗前Breg细胞、Treg细胞分别为(3.88±0.97)%和(4.72±0.98)%,明显低于治疗有效患者(P<0.05);观察组治疗无效和有效患者治疗前TGF-β、IL-10、IL-4、IL-17、sPD-1和sPD-L1比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗无效患者治疗后Breg细胞、Treg细胞和TGF-β分别为(5.68±1.01)%、(6.65±1.02)%和(2606.82±203.14)pg/mL,明显低于治疗有效患者(P<0.05),而IL-17和sPD-1为(10.11±1.60)pg/mL和(102.21±14.04)pg/mL,明显高于治疗有效患者(P<0.05)。治疗前Breg细胞、Treg细胞预测治疗有效的ROC曲线下面积分别为0.694和0.725,P<0.05。结论:ITP患者治疗前Breg细胞、Treg细胞明显降低,且相关细胞因子水平明显异常,治疗后患者Breg细胞、Treg细胞等指标明显改善,同时治疗前Breg细胞、Treg细胞在预测治疗疗效方面有一定应用价值。

关键词： 葫芦素B   Hippo-Yes相关蛋白通路   宫颈癌   调节性T细胞   免疫逃逸  

摘要： 目的探讨葫芦素B调节Hippo-Yes相关蛋白(YAP)通路对宫颈癌中调节性T细胞(Treg)介导的免疫逃逸的影响。方法选取BALB/c裸鼠32只作为研究对象,皮下注射人宫颈癌Hela细胞建立裸鼠移植瘤模型,将造模成功的裸鼠按照随机数字表法分为CON组、葫芦素B组、LPA组和葫芦素B-LPA组,每组8只。CON组采用腹腔注射生理盐水,葫芦素B组和LPA组采用腹腔注射剂量0.5 mg/kg的葫芦素B和剂量为3 mg/kg的JAP激活剂LPA,葫芦素B-LPA组采用腹腔同时注射0.5 mg/kg的葫芦素B和3 mg/kg的LPA,每2天给药一次,共处理21 d后取材;采用ELISA试剂盒法比较各组裸鼠血清白介素-2(IL-2)、IL-10和转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平;采用流式细胞术比较各组裸鼠淋巴细胞CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)叉状头状螺旋转录因子3(Foxp3^(+))Treg水平;采用Western blot法比较各组瘤组织Foxp3、TGF-β、YAP、大肿瘤抑制基因1(LATS1)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)蛋白表达。结果21 d后,葫芦素B组裸鼠的肿瘤质量、血清IL-2、IL-10、TGF-β_(1)表达、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)比例、Foxp3、TGF-β、YAP蛋白表达低于CON组,LATS1、MST1蛋白表达高于CON组,差异有统计学意义(P<0.05);LPA组裸鼠的肿瘤质量、血清IL-2、IL-10、TGF-β_(1)表达、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)比例、Foxp3、TGF-β、YAP蛋白表达高于CON组,差异有统计学意义(P<0.05);LPA组和CON组的LATS1、MST1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);葫芦素B-LPA组裸鼠的肿瘤质量、血清IL-2、IL-10、TGF-β_(1)表达、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)比例、Foxp3、TGF-β、YAP蛋白表达高于葫芦素B组,低于LPA组,差异有统计学意义(P<0.05);葫芦素B-LPA组和葫芦素B组的LATS1、MST1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);葫芦素B-LPA组的LATS1、MST1蛋白表达高于LPA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论葫芦素B可通过调节Hippo-YAP通路抑制宫颈癌中Treg介导的免疫逃逸。

关键词： 调节性B细胞   结肠癌   淋巴管生成   淋巴转移  

摘要： 目的:通过共培养模型,验证结肠癌相关性Breg细胞促进淋巴管生成的作用及相关机制。方法:利用结肠癌细胞CT26及MC38与B细胞构建共培养模型,诱导结肠癌相关性Breg细胞,流式细胞术鉴定CD19+IL-10+Breg细胞比例。ELISA法检测结肠癌相关性Breg细胞条件培养基中VEGF-A、VEGF-C和VEGF-D的分泌水平。利用划痕实验及管腔形成实验检测Breg条件培养基干预后淋巴结内皮细胞SVEC4-10的迁移及管腔形成能力。结果:与24 h共培养体系相比,Breg^(CT26)诱导组[(4.90±0.05)%vs.(27.63±1.12)%]和Breg^(MC38)诱导组[(5.85±0.86)%vs.(24.27±2.27)%]在48 h共培养体系中能诱导更多的Breg细胞,且结肠癌相关性Breg诱导组VEGF-A和VEGF-C的表达水平与空白组相比显著增加(P<0.05)。管腔形成实验及划痕实验结果表明,结肠癌相关性Breg细胞能增强SVEC4-10的成管和迁移能力。结论:在肿瘤微环境中,结肠癌细胞通过诱导B细胞向Breg细胞转化,上调VEGF-A和VEGF-C分泌水平,增强SVEC4-10的成管和迁移能力,从而促进肿瘤淋巴管生成。