关键词:
煤矸石
解磷细菌
巨大芽孢杆菌
间作
植被恢复
摘要:
煤矸石作为我国产出量最大的工业固体废物之一,其无序堆放侵占土地、污染水土,造成了一系列亟待解决的生态环境问题。因此,煤矸石山的生态恢复治理迫在眉睫。微生物-植物联合修复技术因其具有高效、经济、清洁并能减轻污染物对人类健康危害等优点,在矿山环境治理工作中得到广泛关注。本研究拟以废弃煤矸石为研究对象,筛选解磷效果优良的微生物,并以此为供试菌株,通过单因素培养实验研究菌株对煤矸石基础肥力的强化效果,最终筛选得到高效解磷细菌作为功能型微生物应用于无客土“煤矸石-微生物-植物”间作体系中,旨在为有效改善煤矸石山植被存活率低、抗逆性差、生长状况差等问题提供理论与技术支持,这对于煤矸石山生态恢复治理具有重要现实意义。研究结果如下:(1)采集某矿山周边表层污染土壤,经富集驯化和分离筛选最终选定2株解磷效果相对优良的微生物,对其进行菌落及细胞形态的观察、生理生化鉴定、细胞分子生物学鉴定、细菌16Sr DNA鉴定、系统发育树的构建以确定B1为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium strain B1),B2为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis strain B2)。测定2株细菌的生长曲线表明,B1、B2菌株的生长速度较快,可用于后续实验。(2)接种微生物能显著提高煤矸石养分含量并有效降低其p H,在接菌量为150 m L即固液比为1:3、培养6天、30℃、体系初始p H=7.0的培养条件下,煤矸石有效磷、速效钾、碱解氮含量显著提高了152.92%、101.03%、196.90%,p H降低了0.41个单位。解磷细菌主要吸附于煤矸石表面,并在420 min左右细菌吸附量较大;Zeta电位结果表明,在体系初始p H=7.0的前提下B1菌株与煤矸石样品的电位差高于B2菌株,更有效地吸附于煤矸石表面。FT-IR分析表明,在细胞层面上B2菌株的稳定性强于B1菌株,所以吸附性低于B1菌株。因此,相较于B2菌株,接种B1菌株即巨大芽孢杆菌更能有效改善煤矸石养分含量。(3)接种巨大芽孢杆菌和间作均能促进植物吸收微量元素,尤其是地下部分Fe元素,且间作体系下植物吸收微量元素效果整体优于单作体系。接种巨大芽孢杆菌对植物的生长有促进作用,株高较单作增长14.4%~31.4%,地上部分和地下部分干重较单作分别增长92.0%~138%和74%~124%。与单作相比,间作处理整体提高了植物叶片抗逆境胁迫的能力。接种巨大芽孢杆菌后,紫花苜蓿的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性提高,紫花苜蓿叶片的自由基清除能力增强,丙二醛(MDA)含量降低,抗逆性增强。IZMJ处理对提升木豆抗逆境胁迫能力有明显效果,其MDA含量低于紫花苜蓿且达到最低。与单作相比,间作有助于减轻银合欢叶片受损程度。(4)接种巨大芽孢杆菌和间作均有助于改善煤矸石基质养分含量,其中速效钾和有效磷含量提高16.49%和33.11%,p H降低0.49个单位;脲酶、磷酸酶、蔗糖酶、FDA水解酶活性均有提升,过氧化氢酶活性受抑制。“煤矸石-微生物-植物”体系可初步建立。间作及接种巨大芽孢杆菌并未改变煤矸石的优势菌门,植物可通过选择芽孢杆菌属(Bacillus)等有益菌群来改变菌群结构,减少煤矸石较差立地环境及贫瘠养分对植物的胁迫,提高植物对抗逆性及存活率。