关键词:
宫腔粘连
粒细胞集落刺激因子
胸苷磷酸化酶
整合素αvβ3
摘要:
目的揭示整合素αvβ3及胸苷磷酸化酶(TYMP)蛋白在宫腔粘连(IUA)发展中的作用,探索粒细胞集落刺激因子(G-CSF)改善宫腔粘连大鼠子宫内膜组织容受性的可能机制,为临床治疗IUA提供参考。方法将12只SD雌性大鼠适应性喂养后,随机分为模型组和治疗组,每组6只。于动情期予以造模,两组大鼠均以95%乙醇损伤双侧宫腔,造模成功后第14天开始,模型组予以生理盐水腹腔注射,治疗组予以G-CSF腹腔注射。造模28 d后处死各组大鼠进行取材,经甲醛固定后行HE染色,观察各组大鼠子宫内膜组织形态,行免疫组织化学法观察整合素αvβ3及TYMP在各组宫腔中的表达情况。另取6只大鼠于动情期造模,造模成功后第14天处死,将子宫取出分为2 cm大小一段,将子宫组织置于G-CSF培养液,在处理后的0、30 min、45 min、1 h行Western blot检测整合素αvβ3及TYMP蛋白的表达水平。收集行宫腔镜检查发现宫腔形态正常及宫腔粘连患者的宫腔灌洗液各15组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测临床标本中整合素αvβ3及TYMP mRNA的相对表达量。结果HE染色发现,治疗组与模型组相比,子宫形态均有不同程度的恢复,内膜厚度均匀增加,间质内腺体和血管数目均增加。免疫组织化学染色结果提示,与模型组相比,整合素αvβ3及TYMP在治疗组的表达均明显增多。与0 h组比较,G-CSF处理30 min[(1.000±0.058)vs.(1.376±0.121)]、45 min[(1.000±0.058)vs.(2.303±0.331)]、1 h[(1.000±0.058)vs.(2.162±0.477)]可使TYMP的表达升高,差异均有统计学意义(t=6.289、8.662、5.405,P均<0.05);处理45 min[(1.000±0.109)vs.(2.323±0.294)]、1 h[(1.000±0.109)vs.(1.362±0.274)]可使整合素αvβ3的表达升高,差异均有统计学意义(t=9.419、2.747,P均<0.05)。与正常宫腔比较,粘连宫腔整合素αvβ3[(1.000±0.191)vs.(0.573±0.182)]和TYMP[(1.000±0.209)vs.(0.528±0.117)]mRNA的表达均明显下降,差异均有统计学意义(t=2.802、3.413,P均<0.05)。结论整合素αvβ3及TYMP蛋白可作为子宫内膜容受性的评价指标。G-CSF治疗宫腔粘连的作用机制可能与上调子宫内膜中整合素αvβ3及TYMP蛋白的表达有关。