关键词:
多囊卵巢综合症
雄激素受体
性激素结合球蛋白
毛细管电泳
摘要:
背景和目的:多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性常见的一种高度异质性的内分泌代谢紊乱性疾病,临床表现多种多样,典型的表现为不同程度的月经异常、卵巢多囊性改变、高雄激素血症、不孕、多毛、痤疮、肥胖等,并常伴有随年龄增长而日益明显的胰岛素抵抗、高胰岛素血症和高脂血症,常合并2型糖尿病和心血管疾病。迄今为止,PCOS的病因尚不清楚,其明显的家族聚集性提示遗传因素在PCOS的发病中起重要作用,由于临床表现的异质性,多数研究认为:PCOS很可能是少数几个关键基因与微效基因共同作用,这种遗传易感性与环境因素相互作用而发病的,而且对于不同种族,不同家庭,起关键作用的基因可能不同。国外对PCOS的多种基因进行了研究,结果不尽相同,国内对PCOS的致病基因研究不多。国外学者还研究表明指长比有性别、种族和地域差异,与个体攻击性行为、艾滋病病毒易感性、心肌梗塞、乳腺癌、精子数量、及同性恋等有关,但国内研究较少。
本课题针对PCOS常见的高雄激素血症的内分泌特征,选择与雄激素有关的雄激素受体(AR)基因和性激素结合球蛋白(SHBG)基因进行研究,旨在探讨AR基因微卫星(CAG)n多态性和SHBG基因(TAAAA)n多态性与PCOS发病及临床特征的关系,寻找PCOS的致病基因,以期为PCOS的预防和治疗提供理论基础。同时研究指长比与PCOS的相关性,以期为国内女性PCOS患者的早期筛选、诊断和预防提供一定的理论依据。
方法:收集2008年10月-2010年4月在宁夏医科大学附属医院生殖医学中心就诊的PCOS患者191例作为PCOS组,并与PCOS患者同时期因单纯输卵管因素或男性因素不孕就诊的70名女性作为对照组。所有女性均排除其他内分泌疾患,近3月内未使用激素类药物,行血清性激素水平、空腹血糖、餐后2小时血糖、空腹胰岛素、餐后2小时胰岛素水平及血脂水平测定。并且记录月经、痤疮及脂肪肝的发生情况,测量体重、身高、腰围、臀围、血压、计算体重指数(BMI)、腰臀比、胰岛素抵抗(IR)、按照是否存在高雄激素血症将PCOS患者分为高雄激素组和雄激素水平正常组;按照是否存在胰岛素抵抗分为胰岛素抵抗组和非胰岛素抵抗组;按照BMI分为肥胖组和非肥胖组。对照组测定血清性激素水平及血脂水平。对各指标进行比较。从血液标本中提取DNA,PCR扩增所有标本的雄激素受体AR基因的CAG微卫星片段和性激素结合球蛋白SHBG基因的TAAAA片段,分别进行琼脂糖凝胶、毛细管电泳检测目的基因产物,对目的基因测序确定CAG和TAAAA重复次数。测量左右手第2-5指长度(掌侧),并计算各手指间的指长比值。
结果:***患者的临床资料分析
1.1 PCOS组于正常对照组比较,两组的年龄、初潮年龄、收缩压、舒张压、FSH、PRL、E2、CHOL、LDL、HDL之间没有差异,月经周期、腰围、臀围、WHR、BMI、痤疮发生率、LH、T、TG之间有差异,PCOS组均大于正常对照组。
1.2 PCOS患者高雄激素组和雄激素正常组比较,两组的年龄、空腹胰岛素、空腹血糖、餐后2小时血糖、LH、FSH、PRL、E2均无差异,餐后2小时胰岛素、T、BMI有差异,PCOS组均大于正常对照组。
1.3 PCOS患者胰岛素抵抗组与胰岛素非抵抗组比较,两组的年龄、E2、FSH、LH、PRL水平之间没有差异,而胰岛素抵抗组的PCOS患者的T、BMI、WHR和两个时点的血糖及胰岛素水平均高于胰岛素非抵抗组的PCOS患者,且差异有显著性。在高雄激素组中存在胰岛素抵抗的患者例数与雄激素正常组中存在的胰岛素抵抗的患者的例数有差异,高雄激素组例数高于雄激素正常组例数。
1.4 PCOS患者肥胖组与非肥胖组比较,两组患者的年龄、空腹血糖、餐后2小时血糖、E2、FSH、LH、PRL水平之间没有差异,而空腹胰岛素、餐后2小时胰岛素、IR、T、BMI、WHR之间有差异,肥胖组均大于非肥胖组。
***基因(CAG)n重复次数与多囊卵巢综合征的相关性研究
2.1 AR基因(CAG)n重复次数的整体分布:AR-CAG重复次数在PCOS组为11-33,主要分布在22、23、21;在对照组为13-30,主要分布在22、21、23,两组均以22居多,两组均以22为界,按AR基因所含CAG重复次数,将其分为短组CAG(n≤22)与长组CAG(n>22),两组基因重复次数相似,无统计学意义。
2.2短组与长组AR基因CAG重复在PCOS患者高雄激素组与雄激素水平正常组的分布中短组患者例数高于长组,差异有统计学意义。短组与长组AR基因CAG在PCOS患者胰岛素抵抗组和非胰岛素抵抗组的分布无差异。
3. SHBG基因(TAAAA)n重复次数与多囊卵巢综合征的相关性研究
3.1