关键词:
可溶性晚期糖基化终产物受体
多囊卵巢综合症
炎症
人类生殖
颗粒细胞
摘要:
研究背景多囊卵巢综合征(PCOS)至今发病机制不清,近期研究认为慢性炎症状态参与其发生。因此从PCOS病因着手研究其发病机制、探索PCOS的治疗靶点,是本课题的主要研究目的。晚期糖基化终末产物(AGEs)是一组非酶促修饰的异质性蛋白质,作为AGEs受体的RAGE属于免疫球蛋白超家族,通常在AGEs累积的情况下合成增加,导致细胞功能和代谢障碍,从而诱导病理过程导致疾病的发生。可溶性晚期糖基化终产物受体(s RAGE)是RAGE的可溶性形式,因为缺乏普通RAGE胞内段和跨膜结构域,可抑制AGE-RAGE系统在体内产生的不良影响。s RAGE不仅作为反映体内病理变化的生物标志物,也可作为多种疾病的保护因子。糖尿病患者s RAGE浓度降低,与胰岛素抵抗呈负相关;肥胖患者体内s RAGE水平明显降低;随着年龄的增长,尤其是35岁之后,s RAGE水平明显降低。AGE-RAGE降低育龄期妇女卵巢功能的研究已经达成共识,其对PCOS病理发生发展过程中的促进作用近来也称为研究热点。s RAGE被认为可以影响为卵泡发育微环境环境,作为育龄期妇女生育能力的标记物。但也有学者认为卵泡液中高度的s RAGE对可对卵泡和胚胎发育产生不良影响。在生殖领域,s RAGE与炎症关联也存在争议。有学者认为羊水中高浓度s RAGE与炎症呈正相关,参与早产的发生。但也有学者认为血液中高浓度s RAGE与炎症因子负相关,能够避免早产的发生。s RAGE与炎症因子,胰岛素抵抗与卵巢储备功能都具有关联性,而炎症反应,胰岛素抵抗和卵巢储备能力低下是PCOS典型的临床和病理特点。那么,s RAGE在PCOS的发生发展过程中扮演着什么的角色,可能的机制是什么?目前,s RAGE对卵巢储备的预测能力存在争议,其在PCOS发生发展过程中的作用和机制尚未见报道。目的1.研究卵泡液中s RAGE对行体外受精-胚胎移植助孕的患者卵巢储备能力及IVF结局的预测作用。2探索PCOS患者卵泡液中s RAGE浓度与其妊娠结局相关系数的关联,并从炎症角度探索s RAGE对PCOS的作用。材料与方法第一部分实验包括对照组和实验组:对照组为因输卵管阻塞患者35名;实验组为PCOS患者39名,用于卵泡液检测;第二部分实验包括PCOS患者10名,用于颗粒细胞体外培养。实验所用卵泡液均取自≥18mm的卵泡,超声下取卵,取第一管清亮、无血染卵泡液1ml用于检测s RAGE和TNF-α,IL-6,CRP的浓度。实验第二部分纳入10例PCOS患者,提取颗粒细胞体外培养,添加s RAGE干预,终浓度为0μg/ml,0.6μg/ml,1.2μg/ml。干预24小时和48h后,检测TNF-αm RNA,IL-6 m RNA,CRP m RNA和TNF-α,IL-6,CRP,RAGE,p-ERK,AP-1蛋白的表达量。结果1.正常对照组患者卵泡液中高浓度s RAGE蛋白表达量预测本新鲜周期中较低的促性激素(Gn)总剂量(r=-0.328,P=0.041)、较高的取卵总数(r=0.488,P=0.005)和较好的助孕结局(Odds ratio=1.014,P=0.039)。***组患者的卵泡液中s RAGE蛋白的表达量降低(666.753±233.153vs.1518.608±872.130,P=0.000);卵泡液s RAGE表达量与本周期Gn总量负相关(r=-0.037,P=0.831);对PCOS与对照组卵泡液s RAGE蛋白表达量进行ROC分析示,敏感度0.971,特异性0.821。***组患者卵泡液中TNF-α,IL-6,CRP因子较对照升高,并且和卵泡液中s RAGE蛋白量均负相关(TNF-α,r=-0.450,P=0.004;IL-6,r=-0.455,P=0.004;CRP,r=-0.375,P=0.019);外源性s RAGE降低PCOS患者颗粒细胞中TNF-α,IL-6,CRP的转录和翻译,抑制PCOS患者颗粒细胞中RAGE,p-ERK,AP-1的表达,并且有剂量依赖性和时间依赖性。结论卵泡液s RAGE可能参与卵泡发育,预测卵巢储备,并且可能通过抑制炎症因子的生成而在PCOS的发生发展中起保护作用。抑制AGEs-RAGE通路可能是改善卵巢储备能力低下和治疗PCOS的潜在方法。