关键词： 氰戊菊酯   卵泡发育   卵泡类固醇激素合成   窦前卵泡   HSD17B5   HSD17B6   多囊卵巢综合症   多态性   睾酮  

摘要： 第一部分氰戊菊酯对大鼠窦前卵泡生长发育的影响 氰戊菊酯作为农业上应用较为广泛的杀虫剂,对生殖系统具有一定的损害作用,但其对卵泡生长发育的影响尚不清楚。本研究以大鼠窦前卵泡为染毒模型,观察氰戊菊酯对其生长发育及类固醇激素合成的影响,并初步探讨其影响类固醇激素合成的机制。大鼠窦前卵泡暴露于0,1,5,25μmol/L氰戊菊酯72h,显微镜下观察卵泡形态变化,放免法测量激素水平变化,实时定量PCR检测类固醇合成急性调节蛋白(StAR),胆固醇急性调节蛋白(P450scc)表达水平。结果表明氰戊菊酯剂量依赖性抑制卵泡直径增大,降低孕酮,睾酮,雌二醇的合成水平。其对卵泡类固醇激素分泌水平的抑制可能与StAR,P450scc表达下降有关。 第二部分HSD17B5,HSD17B6基因多态性与多囊卵巢综合症相关性的研究 高雄激素是多囊卵巢综合症(PCOS)的主要临床特征之一,17β-羟类固醇脱氢酶5 (HSD17B5),17β-羟类固醇脱氢酶6 (HSD17B6)分别为雄激素合成,代谢相关基因。本研究采用病例-对照研究探讨了中国汉族人群中HSD17B5,HSD17B6基因多态性与PCOS发病风险及其主要临床特征的关系。Taqman等位基因分型(AD)技术对335例PCOS患者及354例正常怀孕妇女HSD17B5,HSD17B6基因多态性检测,并测定PCOS患者基础状态下促卵泡激素(LH)、促黄体生成素(FSH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、空腹血糖(Fasting glucose)、空腹胰岛素(Fasting insulin)。结果表明HSD17B5基因rs1937845位点基因型分布在PCOS患者与正常怀孕妇女之间存在显著性差异(p=0.01)。在PCOS病例中,rs1937845位点TT基因型携带者HOMA-B%较CC基因型显著升高(p=0.045),且睾酮水平也有升高,但未达到统计学差异(p=0.053);rs12529位点GG基因型携带者睾酮水平显著高于CC基因型(p=0.034)。进一步将病例分为高雄激素血症及非高雄激素血症的PCOS,HSD17B5基因rs1937845、rs12529位点基因型分布在高雄激素血症与非高雄激素血症的PCOS患者间均存在显著差异(p=0.007, p=0.005)。未发现HSD17B6基因多态性与PCOS发病及其主要临床特征有关。结果提示:在中国汉族人群中,HSD17B5基因多态性与PCOS发病风险及其主要临床特征有关,HSD17B6基因多态性与PCOS发病风险及其主要临床特征无关。

关键词： 穴位埋线   肥胖型多囊卵巢综合症   胰岛素抵抗  

摘要： 理论背景 多囊卵巢综合症(简称PCOS)是以持续性无排卵、高雄激素或胰岛素抵抗为特征的内分泌紊乱的症候群。目前认为,PCOS是育龄女性内分泌疾病中最常见的一种,患病率为5%-20%。迄今仍病因不明,其病理生理变化复杂,临床表现呈多态性。PCOS的病机目前尚不清楚,但最主要的病损是胰岛素抵抗导致的胰岛素过多。PCOS患者中肥胖的发生率为41%-50%,降低患者体重,能有效地纠正糖脂代谢的紊乱,改善胰岛素抵抗状态。如何有效地减轻体重,减轻肥胖,现已经成为解决肥胖型多囊卵巢综合症的重要方法。 针对肥胖型的PCOS患者,西医主要运用药物或手术进行促排卵治疗、改善胰岛素抵抗及助孕,但西药、手术治疗等不良反应多。 中医方面认为肥胖型的PCOS病因多考虑为痰湿为患及肝肾不足所致,病机主要是痰瘀互结,胞脉闭塞及肝肾不足两个方面。根据文献报道总结,目前对于针刺治疗肥胖型PCOS的方法报导较少,但对于治疗肥胖的研究却比较多。针刺治疗肥胖的方法多样化,临床疗效比较高,极少出现不良反应的报道。根据临床观察,通过针刺及穴位埋线治疗减轻肥胖,能有效改善肥胖型PCOS患者症状,减轻胰岛素抵抗。针刺及穴位埋线作为一种有效简便的减肥调经疗法,对肥胖型PCOS其疗效及作用机理值得我们在今后的研究过程中深入探讨。研究目的 探讨穴位埋线治疗肥胖型多囊卵巢综合症的有效性,为患者提供有效的治疗方案;并探讨穴位埋线对肥胖型多囊卵巢综合症患者胰岛素抵抗的影响。研究方法 从广东省中医院针灸科门诊及大学城传统疗法中心就诊的肥胖型PCOS患者60例为研究对象,随机分为治疗组(穴位埋线组)与对照组(电针组),进行随机对照试验,每组30例。治疗3个月后评价两组病例临床疗效。观察患者治疗前后体重、体重指数、体围、月经情况、空腹血糖、空腹胰岛素等,并应用统计学方法进行分析。 研究结果 1.本试验结果显示,经3个疗程治疗后,两组体重、腰围均显著减少(P<0.05)。而在改善月经恢复疗效方面,治疗后两组月经情况均得到改善。两组间比较,治疗肥胖型多囊卵巢综合症总疗效无明显差异(P>0.05)。 2.本试验观察发现,肥胖患者空腹胰岛素、IR程度与BMI、腰围呈显著正相关(P<0.05),空腹血糖水平与腰围呈显著正相关(P<0.05);治疗组与对照组治疗后患者空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数均见显著降低(P<0.05),此两项指标两组之间无明显差异(P>0.05)。说明穴位埋线与针刺对肥胖型多囊卵巢综合症患者胰岛素抵抗均能产生良性调节作用。 3.在试验中发现,体重与腰围变化趋势基本一致,治疗组与对照组减重及减腰围过程均可分2阶段,4周前速度明显较4周-12周快。研究结论 1.穴位埋线与针刺均是治疗肥胖型多囊卵巢综合症的有效方法,两者疗效及对各疗效性指标的影响无显著差异。 2.在实际操作方面,穴位埋线较针刺更具优势。穴位埋线操作简单,治疗需时短,且作用时间长,符合现代人快速高效的生活节奏。 3.穴位埋线是一种操作简便、效果好、无副作用的治疗肥胖型多囊卵巢综合症的疗法,能有效改善肥胖型PCOS的临床症状,改善胰岛素抵抗,值得临床使用。

关键词： 经阴道超声   腹腔镜   多囊卵巢综合征  

摘要： 目的探讨经阴道超声检查(TVS)卵巢形态学的改变,诊断多囊卵巢综合征(PCOS)的准确性。方法回顾我院腹腔镜术后诊断为PCOS的116例不孕症患者,其术前TVS的卵巢形态学的变化,并与生殖内分泌激素对照分析。结果TVS和腹腔镜术一致诊断PCOS的符合率为51724%,漏诊率为48275%。结论经阴道超声检查依据卵巢多囊性增大改变诊断PCOS有一定的局限性。

关键词： 阿米替林   多囊卵巢综合症   交感神经   a1型肾上腺素受体   β2型肾上腺素受体  

摘要： 本实验的研究目的是评估三环类抗抑郁药、阿米替林对多囊卵巢患者卵巢及卵巢内神经功能的影响。雌二醇诱导的多囊卵巢模型可以表现出多囊卵巢综合症一些内分泌和卵巢形态学方面的特征,同时也使得卵巢内交感神经更加活跃。本实验就是通过对雌二醇诱导的多囊卵巢大鼠模型连续的进行阿米替林腹腔注射处理,研究动情周期,卵巢结构,肾上腺素受体a1各亚型mRNA表达,及B2亚型mRNA和蛋白含量的表达变化情况。主要研究内容及结果包括： 1.通过阴道涂片检测,Control组表现为相对规律的4d动情周期,阿米替林对AMI组动情周期没有影响。PCO组中大鼠长期处于发情期,但阿米替林腹腔注射后,PCO+AMI组的大鼠动情周期被部分恢复。 2.与Control组相比,PCO组大鼠的卵巢重量明显降低,阿米替林注射后,PCO+AMI组卵巢重量明显上升。Control组和AMI组的表现为正常的卵巢结构,存在新生黄体和处于不同发育阶段的卵泡。而PCO和PCO+AMI组卵巢变小,黄体的大小和数量均有所减少,但PCO+AMI组的黄体大小和数量相比于PCO组略有增加,同时闭锁卵泡数量下降。 3.与对照组相比,a1A-AR和B2-AR的mRNA表达量在其他三组中均没有明显变化。而a1B-AR和a1D-AR的mRNA表达量在PCO组中明显升高,在阿米替林处理后,PCO+AMI组的a1B-AR和a1D-AR mRNA表达明显降低。 4.与Control组相比,PCO和PCO+AMI组B2-AR蛋白表达量明显下降。PCO+AMI组B2-AR蛋白表达略有下降,但差异不显著。相对于Control组,AMI组B2-AR蛋白表达量下降,差异亦不显著。 综上所述,阿米替林可以部分恢复雌二醇诱导的大鼠PCOS模型紊乱的动情周期,增加卵巢重量,增加卵巢中有腔卵泡和新生黄体的数量,明显降低在多囊卵巢模型中升高了的a1B-AR和a1D-AR的mRNA表达量,但对alA-AR,B2-AR的mRNA表达无影响并能够降低B2-AR蛋白的表达。这些实验结果表明,对于患有抑郁症的PCOS患者来说,服用阿米替林对缓解卵巢内的神经过度活跃是有积极意义的,其作用机制仍需做进一步的研究。

关键词： polycystic ovary syndrome   impaired glucose tolerance   type 2 diabetes mellitus   metabolic syndrome   systematic review   CARDIOVASCULAR RISK-FACTORS   CORONARY-HEART-DISEASE   3RD NATIONAL-HEALTH   NORMAL-WEIGHT WOMEN   BETA-CELL FUNCTION   INSULIN-RESISTANCE   OBESE WOMEN   BODY-FAT   MEDITERRANEAN WOMEN   FASTING INSULIN  

摘要： Polycystic ovary syndrome (PCOS) is a common condition in reproductive-aged women associated with impaired glucose tolerance (IGT), type 2 diabetes mellitus (DM2) and the metabolic syndrome. A literature search was conducted (MEDLINE, CINAHL, EMBASE, clinical trial registries and hand-searching) identifying studies reporting prevalence or incidence of IGT, DM2 or metabolic syndrome in women with and without PCOS. Data were presented as odds ratio (OR) [95% confidence interval (CI)] with fixed- and random-effects meta-analysis by Mantel-Haenszel methods. Quality testing was based on Newcastle-Ottawa Scaling and The Cochrane Collaboration's risk of bias assessment tool. Literature searching, data abstraction and quality appraisal were performed by two investigators. A total of 2192 studies were reviewed and 35 were selected for final analysis. Women with PCOS had increased prevalence of IGT (OR 2.48, 95% CI 1.63, 3.77; BMI-matched studies OR 2.54, 95% CI 1.44, 4.47), DM2 (OR 4.43, 95% CI 4.06, 4.82; BMI-matched studies OR 4.00, 95% CI 1.97, 8.10) and metabolic syndrome (OR 2.88, 95% CI 2.40, 3.45; BMI-matched studies OR 2.20, 95% CI 1.36, 3.56). One study assessed IGT/DM2 incidence and reported no significant differences in DM2 incidence (OR 2.07, 95% CI 0.68, 6.30). One study assessed conversion from normal glucose tolerance to IGT/DM2 (OR 2.4, 95% CI 0.7, 8.0). No studies reported metabolic syndrome incidence. Women with PCOS had an elevated prevalence of IGT, DM2 and metabolic syndrome in both BMI and non-BMI-matched studies. Few studies have determined IGT/DM2 or metabolic syndrome incidence in women with and without PCOS and further research is required.

关键词： GTPASE-ACTIVATING-PROTEIN   UNTREATED WOMEN   SECRETORY ENDOMETRIA   GLUT4 TRANSLOCATION   STIMULATED PHOSPHORYLATION   TISSUE HOMEOSTASIS   ESTROGEN-RECEPTORS   SKELETAL-MUSCLE   MENSTRUAL-CYCLE   GLUCOSE-UPTAKE  

摘要： Polycystic ovary syndrome (PCOS) is an endocrine-metabolic disorder associated with insulin resistance and compensatory hyperinsulinemia. Scarce information is available on the expression of molecules involved in the insulin pathway in endometria from women with PCOS. Therefore, we examined the protein levels of insulin-signaling molecules, like insulin receptor, insulin-receptor substrate (IRS)-1, pIRS-1Y612, Akt, AS160, pAS160T642 and GLUT4 in endometria from PCOS women with or without hyperinsulinemia. Protein levels were assessed by Western blot and immunohistochemistry in 21 proliferative-phase endometria from control women (CE = 7), normoinssulinemic PCOS women (PCOSE-NI = 7) and hyperinsulinemic PCOS women (PCOSE-HI = 7). The data show no differences in the expression of insulin receptor between all groups as assessed by Western blot; however, IRS-1 and pIRS-1Y612 were lower in PCOSE-HI than controls and PCOSE-NI (P < 0.05). AS160 was detected in all analyzed tissues with similar expression levels between groups. Importantly. PCOSE-HI exhibited lower levels of pAS160T642 (P < 0.05) and of GLUT4 (P < 0.05) compared with CE. The immunohistochemistry for insulin receptor, IRS-1, Akt, AS160 and GLUT4 showed epithelial and stromal localization; IRS-1 staining was lower in PCOSE-HI (P < 0.05). In conclusion, human endometrium has the machinery for glucose uptake mediated by insulin. The diminished expression of GLUT4, as well as the lower level of pIRS-1Y612 and pAS160T642 exhibited by PCOSE-HI, suggests a disruption in the translocation of vesicles with GLUT4 to the cell surface in these patients. (C) 2010 The Feinstein Institute for Medical Research, *** Online address: http://*** doi: 10.2119/molmed.2009.00118

关键词： 吡格列酮   胰岛素抵抗   排卵  

摘要： 目的:探讨罗格列酮治疗胰岛素抵抗(IR)的多囊卵巢综合症患者内分泌、代谢异常的疗效。方法:将48例多囊卵巢综合症患者给予罗格列酮治疗,比较用药前后的排卵率和内分泌。结果:罗格列酮治疗后排卵率明显提高,胰岛素水平降低显著。结论:格列酮能明显改善PCOS患者的内分泌紊乱症状。

关键词： 多囊卵巢综合症   肥胖   胰岛素抵抗   中药天癸胶囊   二甲双胍   达英-35   雄激素  

摘要： 多囊卵巢综合症(PCOS)是一组复杂的症候群,其发生是由于下丘脑-垂体-卵巢之间激素分泌量的关系异常,破坏了相互之间的依赖与调节,最终引起卵巢长期不能排卵及代谢异常所致的一系列的病理状态、异常症状,如月经稀发、闭经或功能失调性子宫出血、不孕等,远期并发症有子宫内膜癌、乳腺癌、糖尿病及心血管疾病等,其诊断、治疗用药是目前国内外妇产科界及相关领域的热门研究课题。 第一部分多囊卵巢综合征肥胖与非肥胖患者的临床观察 目的：了解肥胖与非肥胖PCOS患者临床症状、内分泌特征,比较两种PCOS患者在血内分泌激素、胰岛素抵抗情况及糖代谢紊乱方面的差异。 方法：收集符合PCOS诊断标准86例门诊女性PCOS患者,根据BMI指数是否≥25kg/m2分组,分为48例非肥胖组及38例肥胖组。观察月经失调类型;测定身高、体重,计算BMI指数;测量腰围、臀围,计算WHR指数;采集月经3-5天静脉血测定激素水平,包括FSH、LH、E2、PRL、T、DHEA-S及SHBG;同时测定OGTT、胰岛素释放试验及B超检查卵巢体积或卵泡个数;分析两组患者的血LH、T、DHEA-S、SHBG、LH/FSH及FAI指数、OGTT、IGTT、HOMA-IR、胰岛素敏感指数、GAUC、IAUC及卵巢体积的差异。分析肥胖与T、FAI、HOMA-IR的相关性。 结果：①肥胖组及非肥胖组患者月经失调类型均为月经稀发②肥胖组血FSH.E2、T及DHEAS水平与非肥胖组无统计学差异(P>0.05)。③肥胖组血LH、PRL水平显著性低于非肥胖组,差异有统计学意义(P<0.05)。④肥胖组血SHBG及LH/FSH比值均低于非肥胖组,差异有统计学意义(P<0.01),FAI较非肥胖组升高,差异有统计学意义(P<0.01)⑤肥胖组的HOMA-IR及FINS均高于非肥胖组,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),胰岛素敏感指数低于非肥胖组,差异有统计学意义P<0.05)⑥肥胖组胰岛素曲线下面积参数(IAUC)比非肥胖组高,差异有统计学意义(P<0.01)⑦OMA-IR与肥胖有相关性⑧肥胖组患者与非肥胖组患者双侧卵巢体积比较无差异(P>0.05) 结论：肥胖与非肥胖PCOS患者均以月经稀发为主要的月经失调类型。肥胖与非肥胖PCOS患者在内分泌上存在差异,肥胖者侧重于胰岛素抵抗而非肥胖患者侧以LH/FSH分离为主;PCOS患者无论肥胖与非肥胖均可发生胰岛素抵抗,但肥胖可加重胰岛素抵抗的发生率及严重程度。是否将胰岛素抵抗纳入PCOS的诊断标准有待日后进一步的研究。 第二部分中药天癸胶囊治疗多囊卵巢综合征疗效观察 目的：观察中药天癸胶囊与目前用于治疗PCOS的两种主要药物二甲双胍和达英-35疗效上的差异,研究其是否能作为治疗PCOS的一线药物,给PCOS患者在治疗药物上提供多一种有效的药物。 方法：收集符合PCOS诊断标准的47例特需门诊19-40岁女性患者,根据随机分组标准分为19例中药天癸胶囊治疗组、17例二甲双胍治疗组及11例达英-35治疗组;治疗前与每治疗3个月测定所有病例的身高、体重、血压、腰/臀围、葡萄糖耐量及胰岛素释放试验、空腹血脂及肝肾功能,于月经周期第3-5天测定血清的性激素(FSH、LH、E2、T及SHBG)水平及B超检查分别测内膜厚度、子宫体积、卵巢体积及卵泡大小。分析三组的FSH、LH、E2、T及SHBG及各个葡萄糖耐量试验及血胰岛素水平,比较及分析三组间治疗后的疗效差异。 结果：①治疗后血激素FSH及LH水平二甲双胍组及达英-35组较治疗前降低,而中药天癸胶囊组较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05),三组治疗后血T水平较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),三组治疗后血E2较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.05、P<0.01),中药天癸胶囊组及二甲双胍组治疗后血SHBG水平较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),达英-35组血SHBG水平较治疗前升高,差异有统计学意义P<0.01);②治疗后葡萄糖耐量试验3小时血糖水平中药天癸胶囊组及二甲双胍组较治疗前降低,而达英-35组较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05),;③三组治疗后血胰岛素水平较治疗前降低,差异均有统计学意义,其中药天癸胶囊组和二甲双胍组为(P<0.01),达英-35组(P<0.05);④三组治疗后组间血T水平比较无统计学意义(P>0.05);⑤中药天癸胶囊及二甲双胍组治疗后血SHBG水平比达英-35组低,差异有统计学意义(P<0.01);⑥中药天癸胶囊组治疗后血SHBG水平与二甲双胍组无差异(P>0.05);⑦中药天癸胶囊组治疗后葡萄糖耐量试验3小时血糖水平与二甲双胍组无差异(P>0.05);⑧中

关键词： 多囊卵巢综合症   多囊卵巢综合症动物模型   CYP19   GATA-4   FSH受体  

摘要： 研究目的和意义 多囊卵巢综合征（polycysitic ovary syndrome, PCOS）是育龄妇女中最常见的妇科内分泌失调性疾病,发病率占全球育龄女性的5%-10%,占无排卵性不孕症患者的30%-60%。此外,PCOS患者还较易发生糖尿病、心血管疾病以及子宫内膜癌等远期并发症。可见,PCOS是关乎女性一生的内分泌和代谢紊乱性疾病。但当前关于PCOS病因学、诊断标准和最佳治疗方案却还存在许多争论和悬而未决的问题,使PCOS成为研究热点,而研究的重中之重是PCOS病因学的研究。 因高雄激素血症是PCOS的主要病理生理特征,与雄激素合成和雄激素转化相关酶的基因成为研究PCOS的靶基因。P450芳香化酶为卵巢颗粒细胞上催化雄激素转化为雌激素的限速酶,是CYP19基因表达的产物,因此CYP19基因成为研究PCOS的靶基因之一。目前,关于CYP19基因在PCOS妇女卵巢组织中的表达水平存在争议,有文献报道CYP19基因表达降低,而有的文献报道表达增高。CYP19基因表达降低则P450芳香化酶产生减少,可导致雄激素向雌激素转化减少以至于雄激素水平升高;而CYP19基因表达升高则P450芳香化酶产生增加,理论上由于其转化雄激素的能力增强雄激素水平应降低,但矛盾的是PCOS患者血清雄激素水平升高。在卵巢颗粒细胞,芳香酶编码基因CYP19的表达主要受卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone, FSH）的调节,同时前列腺素E2 （Prostaglandin E2, PGE2）等也可促进CYP19的表达。FSH的作用是通过卵巢上相应的FSH受体（follicle-stimulating hormone receptor, FSHR）所介导,目前研究发现,大多数PCOS患者的FSH水平正常,而针对FSHR的表达有文献报道其水平升高。近年研究发现,FSH对CYP19表达的调节作用是通过转录因子GATA-4介导的,因此,在FSH水平正常且FSHR的表达升高的情况下也有可能因转录因子GATA-4表达异常而导致CYP19表达异常,同时PGE2对CYP19表达的刺激作用也是由转录因子GATA-4介导的,所以GATA-4在调节CYP19表达中可能起到关键性作用。更加值得注意的是,转录因子GATA-4在卵泡发育过程中激活许多基因的转录,包括抑制素、抗苗勒管激素、类固醇激素合成急性调控蛋白,而这些产物均有研究证明在PCOS的发生中起着至关重要的作用。根据文献检索,目前国内外尚未见有关GATA-4基因与PCOS发生相关的研究报道,GATA-4基因在PCOS患者和正常女性卵巢中的表达水平是否存在差异也不清楚。因此,有必要对CYP19、GATA-4和FSHR三种基因在PCOS卵巢中的表达水平及作用进行探讨。 本研究拟以CYP19、GATA-4和FSHR为研究对象,首先采用病例对照的研究形式初步检测三种基因在PCOS患者卵巢中的表达水平。由于取材条件的限制,很有必要建立一个与PCOS妇女卵巢组织中CYP19表达相一致的模型来进一步研究这三种基因的作用及其相关性。由于来曲唑直接作用于P450芳香化酶,且其诱导的PCOS大鼠模型具有与人类PCOS患者极其相似的卵巢结构方面的改变,故本研究以来曲唑建造PCOS大鼠模型,检测该PCOS大鼠模型卵巢组织中三种基因的表达水平,并对模型中三种基因表达间的相关性进行研究,同时也为该模型的应用提供一定的理论依据。 第一章：CYP19、GATA-4和FSHR蛋白在PCOS患者卵巢组织中的表达及其临床意义 目的： 研究CYP19、GATA-4和FSHR蛋白在PCOS患者卵巢中的表达特点,为进一步探讨CYP19、GATA-4和FSHR与PCOS发生的关系奠定基础。 研究方法： 1.标本来源与分组 收集南方医院、佛山市第一人民医院、福州军区总院符合鹿特丹诊断标准的多囊卵巢综合症患者16例。对照组9例,因单侧卵巢肿瘤行对侧卵巢剖探术,或因子宫肿瘤行子宫及双侧附件切除术。两组患者年龄无显著性差异。所有组织均用10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,切片,分别进行HE染色和免疫组化检测。 2.免疫组织化学方法检测CYP19、GATA-4和FSHR蛋白在卵巢组织中的表达 卵巢组织常规石蜡包埋,2um切片行HE染色。5um切片行免疫组织化学染色。切片经二甲苯脱蜡、梯度酒精水化,3%H2O2封闭内源性过氧化物酶,微波修复抗原,10%山羊血清室温封闭,一抗孵育过夜,DAKO anti mouse, rabbit二抗室温孵育30分钟／DAKO anti-goat immunoglobulins/HRP二抗室温孵育,DAB显色

关键词： 补肾化瘀   转化生长因子受体   表皮生长因子受体   多囊卵巢综合症   颗粒细胞   基因  

摘要： 目的：通过观察补肾化瘀方对PCO大鼠卵巢颗粒细胞上表皮生长因子受体和转化生长因子受体基因表达的影响,探讨补肾化瘀方治疗多囊卵巢综合征的相关作用机理。 方法：选用6周龄SPF级有规律动情周期的SD雌性大鼠79只,饲养于符合SPF级动物要求的环境中,1：5随机分为正常组和造模组后,用配制的来曲唑-羧甲基纤维素溶液灌胃诱导大鼠多囊卵巢病理模型,正常组则用1%羧甲基纤维素水溶液灌胃,共21天。造模成功后,将造模组随机分为模型空白对照组、补肾化瘀方高剂量组、补肾化瘀方中剂量组、补肾化瘀方低剂量组及阳性药物对照组,加上正常组,共六组,.分别用生理盐水、补肾化瘀方不同浓度的汤剂和达英-35进行药物干预,(Qdx3d,休息1d)×21次。干预周期结束后每组随机抽取八只大鼠的一侧卵巢分离颗粒细胞,实时荧光定量PCR测定基因表达数值以观察补肾化瘀方对PCO大鼠卵巢颗粒细胞上EGFR和TGFR表达的影响。 结果：①PCO大鼠卵巢颗粒细胞EGFR、TGFR呈低表达;②补肾化瘀方对PCO大鼠卵巢颗粒细胞EGFR、TGFR的表达有改善作用。 结论：补肾化瘀方对PCO大鼠颗粒细胞上EGFR和TGFR的表达有改善作用,提示补肾化瘀方治疗PCOS可能与改善颗粒细胞上基因受体表达有关。