关键词： 黄芪甲苷   非酒精性脂肪肝疾病   脂质积聚   氧化应激   炎症  

摘要： 第一章 黄芪甲苷经5-LO/LTB4途径防治NAFLD小鼠的作用及机制目的:评估黄芪甲苷（Astragaloside IV,ASIV）对非酒精性脂肪肝小鼠（Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）的防治作用,并探索该作用是否与5-脂氧酶（5-lipoxygenase）/白三烯（Leukotriene）通路有关。方法:1.将体重20-22 g左右的40只雄性昆明小鼠随机分为对照组（Control）,高脂饮食组（High-Fat diet,HFD）,HFD+ASIV低剂量组（20 mg/kg）,HFD+ASIV中剂量组（40 mg/kg）,HFD+ASIV高剂量组（80 mg/kg）,并在16周内接受不同的饮食,每组8只。给小鼠喂食HFD 16周,给对照动物喂标准的啮齿动物饮食。喂养三周后,喂食HFD的小鼠通过灌胃施用不同剂量的ASIV,对照组小鼠接受相同体积的0.5%的羧甲基纤维素钠（CMC）,每周测量体重,在16周后对所有动物实施安乐死,记录肝脏湿重。2.肝脏形态学:将收集的肝脏组织碎片进行组织切片和苏木精和曙红染色（hematoxylin and eosin staining,HE）,观察小鼠肝脏组织病理损伤的情况。3.血清中甘油三酸酯（triglyceride,TG）、丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）和天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）含量的检测:使用TG、ALT和AST试剂盒检测对照组、HFD组和ASIV低、中、高组小鼠血清中TG、ALT和AST的含量。***检测对照组、HFD组和ASIV低、中、高组小鼠血清中白三烯B4（Leukotriene,LTB4）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF-α）和白介素6（Interleukin,IL-6）的含量。5.基因水平分析:q-PCR检测对照组、HFD组和ASIV低、中、高组小鼠肝脏组织5-LO和白三烯A4水解酶（Leukotriene A4 hydrolase,LTA4H）mRNA的表达变化。6.蛋白水平分析:蛋白印迹检测对照组、HFD组和ASIV低、中、高组小鼠肝脏组织5-LO和LTA4H的蛋白表达变化。结果:1.干预6周后,与对照组相比,HFD组的高脂饮食增加了小鼠体重（P＜0.001）。干预12周后,与HFD组相比,ASIV治疗显著减轻了体重增加。其中以ASIV高剂量组的小鼠体重降低最多（P＜0.001）。与HFD组相比,在接受16周ASIV治疗后,ASIV各剂量组小鼠的肝脏重量不同程度的降低,其中以ASIV高剂量组降低最多（P＜0.001）。2.与对照组相比,HFD组的血清TG,ALT和AST水平显著升高（P＜0.001）,而ASIV各剂量组均可不同程度降低小鼠血清中TG,AST和ALT水平,其中以ASIV高剂量降低水平最高。***切片表明对照组小鼠肝细胞肝索沿中央静脉呈放射状排列,而HFD组小鼠肝脏切片显示肝内大量脂质积聚,其间具有明显的脂肪空泡,ASIV低、中、高剂量各组小鼠切片显脂肪空泡出现不同程度减少。4.与对照组相比,HFD组小鼠血清中TNF-α和IL-6的含量明显升高（P＜0.001）,与HFD组相比,ASIV低、中、高剂量组不同程度的降低了小鼠血清中的TNF-α和IL-6的含量,高剂量组为最佳（P＜0.001）。5.与对照组相比,HFD组小鼠肝脏中5-LO（P＜0.001）和LTA4H（P＜0.01）mRNA的表达明显升高,而ASIV低、中、高剂量组不同程度的降低了小鼠肝脏中的5-LO和LTA4H mRNA的表达。6.与对照组相比,HFD组小鼠肝脏中5-LO和LTA4H蛋白的表达明显升高,而ASIV低、中、高剂量组不同程度的降低了小鼠肝脏中的5-LO和LTA4H蛋白的表达。7.与对照组相比,HFD组小鼠血清中LTB4的表达明显升高（P＜0.001）,而ASIV低、中、高剂量组不同程度的降低了小鼠血清中LTB4的表达。结论:1.低、中、高剂量组ASIV均可明显降低NAFLD模型小鼠体重和肝脏湿重,并且改善NAFLD模型小鼠肝脏病理损伤,显示ASIV具有防治NAFLD小鼠的作用。***对NAFLD模型小鼠的保护作用可能与其降低NAFLD模型小鼠血清炎症因子TNF-α和IL-6的含量有关。***对NAFLD模型小鼠的保护作用可能与其降低小鼠血清中LTB4的含量有关。***可能通过下调NAFLD模型小鼠肝脏组织中5-LO和LTA4H的基因和蛋白表达,产生保护NAFLD模型小鼠的作用。第二章 黄芪甲苷对PA诱导LO2细胞的保护作用及机制目的:评估黄芪甲苷对NAFLD体外模型-棕榈酸（Pa

摘要： 脂肪肝是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的病变(>5%肝细胞发生脂肪变性)。脂肪肝的病因多种多样,例如长期嗜酒、摄食过多等不健康的生活方式,同时,肥胖、糖尿病、高血脂以及长期服用四环素、肾上腺皮质激素、嘌呤霉素、环已胺等也是脂肪肝发病的高危因素。此外,脂肪肝并非肥胖人群的专属,瘦人同样要警惕,例如近期体重突增>3%,腹部肥胖、隐性肥胖人群以及乳糜泻患者等。

关键词： 非酒精性脂肪肝   参苓白术散   肠道菌群   短链脂肪酸  

摘要： 目的:本研究采用临床经典健脾方剂参苓白术散,通过观察模型小鼠的血清生化指标、肝脏病理、肠道菌群及短链脂肪酸的变化,初步探讨该方治疗NAFLD的生物学基础,可为临床上采用健脾法治疗NAFLD提供实验依据。方法:1.复制模型:采用高脂饮食喂养的方法,除正常组外的小鼠给予高脂饲料,喂养到8周末。2.药物干预:于第4周末开始给予药物干预。参苓白术散低（2.34g/kg）、中（4.68g/kg）、高剂量组（9.36g/kg）给予参苓白术散灌胃,连续给药28天,双歧杆菌组给予双歧杆菌（8.4 g/kg）灌胃,正常组和模型组给予等量的生理盐水灌胃。3.指标检测:（1）血清生化指标:AST、ALT、TC、TG、LDL-C、HDL-C、TBIL。（2）病理指标:通过对比病理切片观察小鼠肝脏病理变化。（3）肠道微生态相关指标:用基因高通量测序检测小鼠肠道菌群的丰度和多样性变化;通过GC-MS法检测肠道内容物短链脂肪酸的含量。结果:1.血清生化指标的变化（1）与正常组相比,模型组和参苓白术散低、中、高组、双歧杆菌组小鼠血清生化指标ALT、AST、TC、TG、LDL-C、HDL-C显著上升（P＜0.01）,模型组的TBIL呈显著上升（P＜0.01）,其余用药组无明显差异（P＞0.05）。（2）与模型组相比,参低组、参中组血清生化指标ALT、AST、TC、TG、LDLC、HDL-C、TBIL呈显著下降趋势（P＜0.01）;参高组AST、TC、TG、LDL-C、HDLC、TBIL呈显著下降趋势（P＜0.01）,ALT无明显差异（P＞0.05）;双歧杆菌组AST、TC、TG、LDL-C、HDL-C、TBIL呈显著下降趋势（P＜0.01）,ALT存在显著差异（P＜0.05）。2.病理切片观察第8周正常组小鼠肝脏呈鲜红,表明较光滑。模型组的肝脏肉眼可见为淡黄色,表面有明显颗粒感;双歧组与正常组比无明显差异。与正常组相比,模型组小鼠模型组开始出现脂肪空泡,肝索排列紊乱、有部分肝细胞破裂,肝细胞核染色后颜色加深部分,区域出现炎性因子侵润。与模型组相比,参低组肝细胞结构、肝索排列及肝小叶结构无明显异常;中剂量组有散在的脂肪小空泡,肝索清晰;参高组存在小脂肪空泡,与模型组相比空泡变小变少。双歧杆菌组,可看到少量脂肪空泡,肝细胞形态正常,肝索排列规则。3.肠道菌群相对丰度变化（1）门水平丰度变化:与正常组相比,模型组小鼠肠内容物菌群有2个菌门相对丰度升高,8个菌门相对丰度降低。与模型组相比,参苓白术散低、中、高组小鼠肠内容物菌群有2个菌门相对丰度升高,2个菌门相对丰度降低;双歧杆菌组有3个菌门相对丰度升高,4个菌门相对丰度降低。（2）属水平丰度变化:与正常组相比,模型组小鼠肠内容物菌群以Lachnospiraceae NK4A136 group（8.70%）和Dubosiella（杜氏藻属）（2.74%）和Helicobacter（螺杆菌属）（5.08%）为主的16个菌属相对丰度升高,以Lactobacillus（乳酸菌属）（28.66%）为主的4个菌属相对丰度下降。与模型组相比,参苓白术散低、中、高组以Lachnospiraceae NK4A136 group、Dubosiella（杜氏藻属）和Lactobacillus（乳酸菌属）为主的5个菌属相对丰度升高,以Helicobacter（螺杆菌属）和Lachnospiraceae UCG-008为主的9个菌属相对丰度降低;双歧杆菌组以Dubosiella（杜氏藻属）和Lactobacillus（乳酸菌属）为主的9个菌属相对丰度升高,以Lachnospiraceae NK4A136 group和Helicobacter（螺杆菌属）为主的11个菌属相对丰度降低。4.短链脂肪酸含量的变化与正常组相比,模型组丙酸（Propionic acid）、丁酸（Butyric acid）含量有显著上升（P＜0.01）。与模型组相比,参低、中、高组、双歧杆菌组丙酸有下降趋（P＞0.05）,乙酸、丁酸变化无明显趋势。结论:1.参苓白术散能够改善NAFLD模型的肝脏的脂肪变性,降低血脂,改善肝功能。2.参苓白术散基于中医“治肝实脾”治法,健脾治疗NAFLD,其作用机理可能与调节肠道微生态有关,具体表现为双歧杆菌属和乳酸菌属上升,螺杆菌属下降,以及肠道短链脂肪酸含量发生变化等。

关键词： 丹参   泽泻   非酒精性脂肪肝   大鼠   氧化应激  

摘要： 目的:研究丹参、泽泻对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠脂代谢及氧化应激的影响。方法:将60只Wista大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药(东宝甘泰)对照组和丹参水煎剂组、泽泻水煎剂组、丹参配伍泽泻(丹泽)水煎剂组,共6组,每组10只。通过喂饲高脂饲料方法复制NAFLD大鼠模型,然后分别给予相应药物治疗,8周后,观察大鼠血清TC、TG、FFA、ALT、AST、SOD和MDA含量或活性的变化及肝组织病理形态学改变。结果:丹参、泽泻和丹泽水煎剂均能降低血清TC、TG、FFA、ALT、AST和MDA含量,升高SOD活性(P<0.05或P<0.01)。结论:丹参、泽泻和丹泽水煎剂能显著改善非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢紊乱,改善肝功能,其机制可能与抑制氧化应激有关。

关键词： NAFLD   当归芍药散   肠道菌群   肠黏膜机械屏障   LPS   TLR4   ERK1/2   JNK  

摘要： 目的:通过观察当归芍药散对非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素10(Interleukin-10,IL-10)和肝组织中TC、TG、游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)的含量或活性变化、肝脏、回肠和结肠的病理形态学变化、肠道菌群组成结构、小肠绒毛的高度和宽度、回肠和结肠中occludin、闭锁小带蛋白1(zonula occludens 1,ZO-1)的蛋白表达以及肝组织中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)通路相关基因和蛋白表达的影响,探讨该方对NAFLD的防治作用及机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组及当归芍药散低、中、高剂量组。通过喂饲高脂饲料复制NAFLD大鼠模型,造模同时给予相应药物治疗。给药8周后,麻醉状态取血,检测血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT、AST、LPS、TNF-α和IL-10的含量或活性;剖取肝脏、回肠和结肠,检测肝脏中TC、TG、FFA含量;HE染色法观察肝脏、回肠和结肠病理形态学及小肠绒毛的高度和宽度;油红O染色法观察肝脏脂质蓄积情况;免疫组织化学法检测回肠和结肠中occludin、ZO-1的蛋白表达水平;q RT-PCR法和Western Blot法检测肝脏中TLR4、髓样分化细胞因子88(Myeloid different factory 88,My D88)、细胞外信号调节蛋白激酶1/2(Extracellular signal regulated kinase messenger1/2,ERK1/2)、c-Jun-N-末端蛋白激酶(C-Jun n-terminal kinase,JNK)的基因和蛋白表达以及p-ERK1/2、p-JNK的蛋白表达情况;收集各组的粪便,16s RNA测序法分析粪便肠道菌群组成结构。结果:与正常组比,模型组大鼠肝细胞出现大量脂滴空泡蓄积和气球样变,回肠和结肠黏膜上皮出现水肿,血清中TC、TG、LDL-C、ALT、AST、LPS、TNF-α的含量或活性、肝组织中TC、TG、FFA的含量、TLR4、My D88、ERK1/2和JNK的基因和蛋白表达以及p-ERK1/2、p-JNK的蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),HDL-C和IL-10的含量、小肠绒毛的高度和宽度、回肠和结肠中occludin和ZO-1蛋白表达均显著降低(P<0.01),Simpon指数、厚壁菌门、梭菌纲和毛螺菌科的相对丰度以及厚壁菌门/拟杆菌门的数值显著升高(P<0.01),Chao1、Ace、Shannon指数、拟杆菌门、拟杆菌纲和S24-7的相对丰度显著下降(P<0.01)。与模型组比,当归芍药散能改善肝细胞脂滴空泡积聚、气球样变和回肠、结肠的黏膜上皮水肿等现象,显著降低血清中TC、TG、LDL-C、ALT、AST、LPS、TNF-α的活性或含量、肝组织中TC、TG、FFA的含量以及肝组织中TLR4、My D88、ERK1/2和JNK的基因和蛋白表达以及p-ERK1/2、p-JNK的蛋白表达水平(P<0.01或P<0.05),显著上调血清中HDL-C和IL-10的含量、小肠绒毛的高度和宽度以及肠道组织中occludin和ZO-1蛋白表达(P<0.01或P<0.05),显著升高Chao1、Ace、Shannon指数、拟杆菌门、拟杆菌纲和S24-7的相对丰度(P<0.01),显著降低Simpon指数、厚壁菌门、梭菌纲和毛螺菌科的相对丰度以及厚壁菌门/拟杆菌门的数值(P<0.01)。结论:当归芍药散对NAFLD有较好的防治效果,其机制可能与调节肠道菌群紊乱,保护肠黏膜机械屏障,调节TLR4信号通路,减轻炎症反应有关。

关键词： 院长助理   保健中心   新华医院   健康促进   执行董事   脂肪肝   专项基金管理   基金会  

摘要： 2020年11月12日,中国健康促进基金会脂肪肝防治专项基金管理委员会在京成立。中国健康促进基金会徐卸古常务副理事长兼秘书长、上海交通大学医学院附属新华医院消化内科主任范建高、浙江大学医学院附属第二医院院长助理兼国际保健中心主任宋震亚、重庆市汇人健康管理有限责任公司执行董事吴心芬。

关键词： 治未病   脂肪肝   防治  

摘要： 中医“治未病”是预防医学的重要组成部分,其理念涵盖了未病先防、既病防变、瘥后防复三个层面。脂肪性肝病是我国最常见慢性肝病,文章将中医“治未病”理念贯穿脂肪肝的防治始末,对脂肪肝早防御、早发现、早治疗,从而降低治疗成本,提高治疗效率,为临床实践提供新思路。

关键词： CCN蛋白   肥胖症   非酒精性脂肪肝  

摘要： CCN由富半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich protein 61,CYR61)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和肾母细胞瘤过表达蛋白(nephroblastoma overexpressed protein,NOV)的首字母缩写而来。CCN家族是一类具有半胱氨酸富集特性的基质细胞蛋白(matricellular proteins),包括CCN1~6等家族成员(其中CCN1即CYR61,CCN2即CTGF,CCN3即NOV),具有广泛的生物学功能。它们通过与细胞表面的各种整合素直接结合或与多种细胞生长因子相互作用来调控各种因子的生物活性,还可通过信号途径相互作用来改变细胞生长因子的具体作用[1],从而参与细胞的生长、黏附和迁移过程。CCN蛋白在肥胖症和非酒精性脂肪肝及其并发症中的炎症调控、创伤修复、纤维性疾病等方面均发挥重要作用。

关键词： 脂肪肝   管理模式   风险分层   全程管理  

摘要： 代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)又称非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD),是遗传易感和营养过剩个体发生的与代谢功能障碍相关的脂肪性肝病[1]。随着肥胖和代谢综合征的流行,MAFLD现已取代慢性乙型肝炎成为我国最常见的慢性肝病[2]。亚洲地区的总体患病率为29.6%,其中我国大陆普通人群患病率为29.8%[3]。

关键词： 脂肪肝   健康教育   健康促进  

摘要： 脂肪肝,现被命名为“代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)”,是全球最常见的慢性肝病,人群患病率为6.3%~45.0%,其中10%~30%为非酒精性脂肪性肝炎(NASH),在我国已经成为第一大肝病[1-3]。脂肪肝至今仍无特效的治疗药物,其最基础、最有效的治疗是生活方式的改变与调整。而健康教育和健康促进在生活方式的调整中发挥着非常重要的作用。健康教育的定义是:通过有计划、有组织、有系统的社会教育活动,使人们自觉地采纳有益于健康的行为和生活方式,消除或减轻影响健康的危险因素,预防疾病,促进健康,提高生活质量。