关键词： 预防医学   流行病学   课程思政  

摘要： 席卷全球的新冠肺炎疫情对我国预防医学人才培养提出了更高的要求。流行病学作为预防医学专业的核心课程，对培养预防医学生的流行病学现场调查、现场处置、慢性病防控、疾病预防等公共卫生思维至关重要，是预防医学学科最重要的方法学之一。文章通过分析课程的特点，分享南京医科大学在流行病学课程思政教学团队培养、思政元素挖掘、课程资源建设及教学改革等方面的经验，为其他高校流行病学课程思政教学提供借鉴。

关键词： 变应性鼻炎   6-7岁   影响因素   变应原  

摘要： 目的:本研究对云南省西双版纳州和迪庆州6～7岁儿童进行变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）流行病学调查,并对其影响因素进行分析。方法:该研究采用整群抽样的方式,在云南省两个地区开展6～7岁儿童AR横断面问卷调查,此问卷的填写均在专业医务人员指导下与儿童监护人共同完成填写。AR的诊断标准参照《变应性鼻炎诊断和治疗指南（2015年,天津）》和《Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma（ARIA）2008》,采用SPSS17.0对全部调查结果进行统计学分析,AR患病的单因素采用χ检验,以P<0.05为差异有统计学意义;多因素分析采用二分类Logistic回归分析,以P<0.01为差异有统计意义。结果:（1）本次调查中,发放和回收问卷2933份,剔除无效问卷63份,有效率95%,西双版纳州AR自报患病率为19.7%;迪庆州AR自报患病率为36.0%;两地常年性AR分别为72.45%、79.43%,季节性AR分别为20.57%、27.55%。两地以少数民族为主,但汉族患病率明显高于少数民族,西双版纳州汉族23.2%,傣族17.0%,哈尼族18.1%,彝族20.5%,布朗族和拉祜族19.6%,迪庆州汉族50.5%,藏族33.3%,傈僳族32.2%,纳西族37.9%;（2）皮肤点刺实验结果:西双版纳州以螨为主,粉螨74.5%、户螨79.7%、油菜花50.3%、向日葵36.25%;迪庆州以季节性花粉为主,油菜42.95%、大籽蒿42.9%、粉螨41.15%、户螨37.50%。（3）两地的单因素分析结果显示:出生地、曾居住地、家庭月人均收入、家族遗传过敏史、早期抗生素使用史、胎次、地区、父母受教育程度是变应性鼻炎的影响因素（p<0.05）。西双版纳州多因素分析结果显示:景洪发生变应性鼻炎风险高于勐海（OR=2.305,95%CI:1.657～3.207）;有家族过敏遗传史发生变应性鼻炎风险高于无家族遗传过敏史（OR=3.328,95%CI 1.957～5.658）、早期抗生素使用史发生变应性鼻炎风险高于无早期抗生素使用史（OR=2.884,95%CI 2.125～3.913）。迪庆州结果显示:出生地在农村发生变应性鼻炎风险小于城市（OR=0.684,95%CI 0.344～0.740）、男童发生变应性鼻炎风险大于女童（OR=0.739,95%CI 0.573～0.954）、有吸烟史发生变应性鼻炎风险大于无吸烟史（OR=1.35,95%CI 1.042～1.749）、有家族过敏遗传史发生变应性鼻炎风险大于无家族过敏史（OR=4.904,95%CI 1.980～12.148）、早期抗生素使用史发生变应性鼻炎风险升高（OR=1.953,95%CI 1.288～2.960）、藏族发生变应性鼻炎风险明显小于汉族（OR=0.553,95%CI 0.343～0.891）、维西地区发生变应性鼻炎风险大于德钦地区（OR=0.300,95%CI 0.188～0.478）。结论:（1）云南6～7岁儿童变应性鼻炎西双版纳州自报患病率为19.7%,迪庆州自报患病率为36.0%,存在明显的地域差异;（2）两地以少数民族为主,但汉族患病率明显高于少数民族;（3）迪庆州的变应原以季节性花粉为主,西双版纳州的变应原以螨为主;（4）两地自报患病儿童出生地、曾居住地、家庭成员吸烟史、家族过敏遗传史、早期抗生素使用史、民族、地区与变应性鼻炎呈正相关。

关键词： Chinese Ⅰ型弓形虫   流行病学调查   miRNA聚类   miR-206   靶基因  

摘要： 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种人畜共患寄生原虫,其宿主范围广泛,猫科动物是唯一终末宿主,包括人类在内的其它温血动物则是中间宿主。动物弓形虫病多以隐性感染为主,但可引起猪急性发病死亡,妊娠期母猪繁殖障碍等;慢性感染则可在猪组织内形成包囊,危害肉品安全和人体健康。近年来,弓形虫已逐渐成为危害我国生猪产业发展的重要病原。当前,猪弓形虫病的防控仍然依赖化学药物,但如磺胺类或乙胺嘧啶等常用药物,仅对猪急性感染有一定治疗作用,而对组织内的弓形虫包囊无效。随着我国无抗养殖政策的推进,该病防治将面临更大困境,因此,当前急需寻找新的药物靶点以研发针对猪弓形虫病的新防治技术。Chinese Ⅰ型弓形虫是流行于我国人和动物体内的优势基因型,但其致病作用尚不完全明确。本课题组前期研究发现,猪源ChineseⅠ型弓形虫不仅导致仔猪急性发病,而且可在脑组织形成包囊,其诱导的免疫病理学特征与机体miRNA表达谱的改变密切相关,提示miRNA在弓形虫调节宿主重要生物学过程中发挥关键作用。miRNA已被证明具备作为重要分子诊断标志物和治疗药物靶标的巨大潜力,且该领域已成为当前的研究热点。因此,本文首先对就诊于扬州大学动物医院的临床病猪及宠物犬、猫开展弓形虫病流行病学调查;接着通过K-means、FSOM和层次聚类等方法对人工感染Chinese Ⅰ型虫株的猪脾脏组织miRNA进行功能聚类分析;随后构建Chinese Ⅰ型虫株体外培养体系,采用qPCR技术评价弓形虫调控miR-206及其潜在靶基因表达的作用;最后通过双荧光素酶报告基因系统,明确miR-206与ARAF基因的靶向结合作用关系。研究结果将有助于识别和发现弓形虫调控宿主细胞凋亡等生物学过程的重要靶点,并为寻找防控猪弓形虫病的关键药物靶标奠定基础。1.江苏地区临床病例动物弓形虫感染情况调查分别采用PCR或ELISA方法对198例临床病猪及其819份组织样本以及155例患病宠物犬与猫血液样品进行弓形虫检测,并对猪弓形虫感染的风险因素进行统计分析。结果显示,115例临床病猪呈弓形虫阳性,阳性率58.08%;367份组织样本呈弓形虫阳性,阳性率44.81%;相较于肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结组织,心脏和肺脏组织的弓形虫检出率更高;风险分析显示,日龄是病猪弓形虫感染的主要风险因素。宠物猫血清弓形虫检出率为10.20%(5/49),宠物犬为0(0/106)。研究结果为江苏地区动物弓形虫病的临床诊断和防控提供了数据支持。2.猪源弓形虫急性和慢性感染仔猪脾脏组织microRNA的功能聚类分析对于实验室保存的Chinese Ⅰ型猪源弓形虫急性和慢性感染的仔猪脾脏组织进行small RNA建库和测序分析;基于弓形虫感染不同时间点仔猪脾脏组织miRNA动态表达水平,应用K-means、SOM及层次聚类等3种方法对miRNA进行聚类分析,生物信息学方法对不同miRNA组开展功能富集分析。测序分析结果显示:猪脾脏组织中共鉴定到252个miRNA,通过K-means、SOM和层次聚类方法分别将其划分为22个(K1～K22),29个(SOM1～SOM29)和6个(H1～H6)miRNA亚群;功能富集突出了弓形虫诱导的代谢调节、离子转运、生物合成和细胞凋亡等生物学进程,并成功揭示了不同miRNA组控制大量免疫调节信号分子在宿主抗弓形虫感染的免疫调节机制中发挥关键作用,其中,K1和K2亚群的miRNA成员调节Notch信号进而介导IL-1细胞反应和Th1/Th2细胞分化,K15亚群涉及中性粒细胞脱颗粒和TLR4级联信号的先天免疫应答;SOM17、SOM1和SOM25亚群参与B细胞活化;SOM9亚群与白细胞迁移和趋化因子活性有关,H2亚群参与调控细胞因子与细胞因子受体相互作用信号通路,以及H3-K17-SOM1亚群miRNA成员调节白细胞介素产生、免疫细胞的趋化性、趋化因子和C型凝集素受体信号通路等。上述结果反映了脾脏组织中不同miRNA组的调节特性以及弓形虫急性和慢性感染诱导宿主免疫调节的重要特征。*** Ⅰ型弓形虫调节宿主细胞miR-206与其潜在靶基因的表达相关性研究以猪肾上皮细胞(PK-15)为感染模型,构建Chinese Ⅰ型弓形虫猪源分离株(YZ-1株)体外培养体系;通过miRanda和RNAhybrid数据库筛选miR-206的潜在靶基因,采用qPCR方法评价弓形虫感染调控PK-15细胞miR-206及其潜在靶基因表达的作用;设计并合成miR-206 mimics与inhibitor,转染细胞后,qPCR技术检测miR-206与其潜在靶基因的表达相关性。结果显示,通过miRanda和RNAhybrid数据库筛选到4个参与调控细胞凋亡信号通路的miR-206潜在靶基因(WDR48、LAMC2、C

关键词： 口腔颌面部间隙感染   流行病学   严重并发症   住院时长   危险因素   全身抗生素治疗   切开引流  

摘要： 目的：　　研究口腔颌面部间隙感染（oral and maxillofacial space infection，OMSI）的临床特点，探讨其发生严重并发症及住院时间延长的危险因素，为OMSI的预防、诊断和治疗提供参考。　　方法：　　选择2017年7月1日～2022年6月31日于河南大学淮河医院口腔颌面外科住院治疗的OMSI患者，纳入住院天数≥3天、病历资料完整的患者，共273例，收集性别、年龄、入院时间、感染部位及来源、并发症、住院时长、影像学资料、实验室检查结果等信息，录入自行设计的EXCEL表格进行分析，使用SPSS 21.0软件进行统计学分析。　　结果：　　男性患者168例，女性 105例，男女比例 1.60:1，平均年龄（48.95±21.93）岁， 41～60岁为疾病好发年龄段（33.33%）。夏季患者最多（32.23%）。入院前平均病程为9天，最短6 h，最长60天，4～7天就诊人数最多（40.66%），84.62%的患者曾在院外治疗过。多间隙感染患者172例（63.00%），牙源性是主要的感染途径（80.22%），多数病灶牙（76.71%）位于下颌，累及最多的是下颌下间隙(60.07%）, 其次为颊间隙（43.22%）。162株菌株中，最常见的病原菌为草绿色链球菌（44.44%），其次为星座链球菌（19.75%）。共24人（8.79%）在住院期间出现单个或多个严重并发症，其中气道梗阻14人，262人（95.97%）治愈出院。合并糖尿病的48例（17.58%）患者平均住院天数13.35天，非糖尿病患者平均住院天数10.07天（z=-2.287，P=0.022）。入院WBC＞15×109/L、累及间隙数目≥4、累及咽旁间隙与发生严重并发症有关（P＜0.05），累及间隙数目≥4是OMSI患者出现严重并发症的独立危险因素（OR=8.128，P＜0.001）。入院WBC＞15×109/L、有基础疾病、累及间隙数目≥4、有严重并发症与住院时间延长有关（P＜0.05），有基础病（OR=2.168，P=0.008）、累及间隙数目≥4（OR=6.995，P＜0.001）是显著增加OMSI患者住院时长（＞10天）的独立危险因素。　　结论：　　1.口腔颌面部间隙感染好发于中老年男性，牙源性是主要感染途径，多数病灶牙位于下颌，累及最多的是下颌下间隙。　　2.草绿色链球菌和星座链球菌是主要致病菌，与以往认为的金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌感染最多不同。　　3.气道梗阻是主要的严重并发症，累及间隙数目≥4 是出现严重并发症的独立危险因素。有基础病和累及间隙数目≥4会显著增加OMSI患者住院时长（＞10天）。　　4.全身抗生素应用+切开引流是主要治疗手段，抗生素推荐二代或三代头孢菌素联合奥硝唑，以覆盖大部分G+菌、G-菌和厌氧菌。切开引流应彻底打开各个脓腔，注意全身支持治疗及糖尿病患者的血糖控制。

关键词： 横纹肌溶解   急性肾损伤   连续性肾脏替代治疗   危险因素   死亡  

摘要： 研究背景:横纹肌溶解(Rhabdomyolysis,RM)是由骨骼肌细胞膜完整性破坏,细胞内容物如肌红蛋白(Myoglobin,MB)、肌酸激酶(Creatine kinase,CK)等释放而引发的临床综合征。急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)是RM最常见的并发症,虽然RM诱导的AKI(Rhabdomyolysis-induced acute kidney injury,RI-AKI)在临床上被广泛关注,但由于诊断标准及纳入人群的不同,既往研究中RI-AKI发病率差异很大,波动于20%-80%,同时,RI-AKI患者的死亡率及长期肾功能情况等亦不一致,缺乏系统评价与分析。目前,RI-AKI缺乏针对性药物,治疗方案仍以补液为主。肾脏替代疗法(Renal replacement therapy,RRT)可清除RI-AKI的主要致病物质MB,并纠正疾病引发的电解质紊乱和酸中毒,近年来已成为RI-AKI的治疗方案之一。连续性肾脏替代治疗(Continuous renal replacement therapy,CRRT)具有持续清除MB并维持血流动力学稳态的优势,是RM患者常用的RRT模式。然而,CRRT在RM患者中的治疗指征和最佳治疗时机存在争议。同时,尽管CRRT有诸多优势,但部分研究中经CRRT治疗的患者预后仍较差,究竟哪些因素影响了CRRT的疗效尚不明确。因此,针对上述问题,本研究拟通过以下两部分研究进行探讨,首先,全面回顾文献,对RI-AKI的发病率、预后、RRT使用率及RRT预后进行系统评价和荟萃分析。其次,开展回顾性队列研究,探讨RM患者CRRT的启动时机,分析影响经CRRT治疗的RM患者预后的危险因素。研究方法:1.第一部分:联合主题词“Rhabdomyolysis”、“Crush injury”和“Acute kidney injury”及其自由词,对“Pub Med、Web of Science、Embase、Cochrane Library”进行检索,日期从建库至2022年7月。提取RI-AKI发病率、死亡率、长期肾功能情况,RM病因,RM和AKI诊断标准,RI-AKI患者RRT使用率和RRT死亡率等数据,使用Stata 16.0进行荟萃分析。2.第二部分:建立回顾性队列,纳入2010年5月1日至2021年5月31日在西京医院住院且接受CRRT的RM患者,收集患者的基线和CRRT相关临床资料,随访记录90天患者生存情况。使用单因素及多因素logistic回归分析,确定经CRRT的RM患者的90天死亡的独立危险因素。研究结果:1.第一部分:筛选后共73篇研究纳入荟萃分析,汇总的结果显示40%的RM患者发生了AKI。31项研究合并的结果显示RI-AKI的死亡率为22%,29项研究报道了有无AKI的RM患者的死亡率,AKI患者死亡风险较无AKI患者增加3.75倍。48项研究报道了RRT使用情况,合并的结果显示38%的RI-AKI患者接受了RRT。11项研究报道了经RRT的RI-AKI患者死亡数,死亡率为39%。对10项研究的合并结果显示11%的RI-AKI患者长期肾功能恢复不佳。2.第二部分:134名接受CRRT的RM患者被纳入最终分析,患者90天死亡率为38.06%。根据CRRT启动到CK峰值出现的中位时间4.8(16,14)小时划分早期及晚期治疗组。67例患者在CK达峰后4.8小时前接受CRRT(早期CRRT组),67例患者在CK达峰4.8小时后接受CRRT(晚期CRRT组)。多因素logistic回归分析显示,晚期CRRT[比值比(odds ratio,OR)3.082,95%CI 1.072-8.859,p=0.037],CRRT启动到CK峰值的时间(每延长1 h,OR 1.026,95%CI 1.004-1.049,p=0.023),血清肌钙蛋白I(每升高1 ng/m L,OR 1.218,95%CI 1.011-1.468,p=0.038),高龄(每增加1岁,OR1.042,95%CI 1.003-1.081,p=0.032),以及需要机械通气(OR 4.632,95%CI 1.292-16.61,P=0.019)为90天死亡率的独立危险因素。研究结论:本研究第一部分内容,明确了RI-AKI的高发病率,高死亡率及长期肾功能预后不佳,同时,研究结果提示RRT是RI-AKI的重要治疗手段,使用率达38%,而经RRT治疗的患者死亡率仍高达39%。因此,有必要进一步研究此类高死亡风险患者的预后。本研究第二部分,在回顾性队列中进一步探索了经CRRT治疗的患者死亡的危险因素,结果显示早期启动CRRT的RM患者死亡率显著下降。此外,我们发现CRRT启动到CK峰值的时间、高龄、高c Tn I、需要

关键词： 研究生   《污水流行病学》   课程改革  

摘要： 以研究生专业课程《污水流行病学》为例，探讨实施教学改革的具体路径，包括提升任课教师课程改革意识、优化教学内容和教学方法及完善课程评价方式等方面。经过教学团队反复改革和实践，构建了具有环境科学与工程专业特色的课程教学体系，为进一步加强课程建设提供参考和借鉴。

关键词： 弧菌   分离鉴定   毒力基因   耐药性  

摘要： 山东省海洋渔业资源得天独厚,沿海水域盛产鱼虾贝藻参等海产品,其中浅海贝类多达百种以上,主要经济贝类有牡蛎、螺、贻贝、扇贝、蚶、蛤、蛏等。近些年来,浅海贝类和滩涂贝类养殖在创造巨大产值的同时也面临着严峻的养殖问题,其中比较值得重视的是贝类弧菌病频频爆发,严重影响了我省我国贝类养殖业的健康发展。本研究采集了2021-2022年度山东省烟台、潍坊、滨州、威海、青岛、日照、东营沿海七地市浅海贝类和滩涂贝类540份贝类样品并从中分离出526株弧菌,82株其他细菌;弧菌的分离主要采用了TCBS琼脂糖培养基增菌纯化培养,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪鉴定为主,PCR鉴定为辅的方法开展了弧菌菌株的鉴定,并对复杂菌株和部分高频分离菌种进行了弧菌的生化鉴定。针对弧菌溶血性、毒力和耐药性质方面进行了副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的毒力基因检测,溶血性检测和药敏试验。本次弧菌流行病学调查结果如下:2021-2022年度自山东省沿海七地市共采集了近20种贝类包括海湾扇贝、青柳蛤、杂色蛤、贻贝、牡蛎、螠蛏、毛蚶、尖尾螺、扁玉螺、蝾螺、水泡蛾螺、西施贝、玉黍螺、竹蛏、文蛤、马蹄螺、泥蚶、钉螺、海蛔等;分离鉴定出19种526株弧菌,主要包括副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、塔斯玛尼亚弧菌(Vibrio tasmaniensis)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)、灿烂弧菌(Vibrio splendidus)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、河口弧菌(Vibrio aestuarianus)、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、轮虫弧菌(Vibrio rotiferianus)、需钠弧菌(Vibrio natriegens)、地中海弧菌(Vibrio mediterranei)、巴西弧菌(Vibrio brasiliensis)、海弧菌(Vibrio pelagius)、环硝基弧菌/食环弧菌(Vibrio cyclitrophicus)、卡那罗弧菌(Vibrio kanaloae)、蒲梅利氏弧菌(Vibrio pomeroyi)、齐氏弧菌(Vibrio chagasii)、强壮弧菌(Vibrio fortis)、托兰佐尼亚弧菌(Vibrio toranzoniae)、长巨牡蛎弧菌(Vibrio gigantis)。其中,两年共分离出副溶血弧菌11株、哈氏弧菌16株、溶藻弧菌46株,塔斯玛尼亚弧菌98株,长巨牡蛎弧菌185株;副溶血弧菌在文蛤、小花蛤、青柳蛤、牡蛎和贻贝、扁玉螺中的分离率较高,分别占分离比例的9.09%、45.45%、18.18%、9.09%、9.09%、9.09%;哈氏弧菌在毛蚶、青柳蛤、扁玉螺、蝾螺、牡蛎中分离率较高,分别为6.25%、37.50%、31.25%、12.50%、12.50%;溶藻弧菌在海湾扇贝、青柳蛤、杂色蛤、牡蛎、贻贝、螠蛏、毛蚶、尖尾螺、扁玉螺、蝾螺、文蛤中的分离率较高,分别为4.35%、6.52%、19.57%、8.70%、8.70%、8.70%、6.52%、13.04%、6.52%、4.35%、8.70%。对分离弧菌中的副溶血弧菌、哈氏弧菌、溶藻弧菌等271株弧菌进行了药敏试验,选用了头孢噻肟、氨苄西林、头孢呋辛、克林霉素、大观霉素、卡那霉素、丁胺卡那、新霉素、恩诺沙星、多粘菌素B、四环素、多西环素、米诺环素、复方新诺明、氟苯尼考、氨曲南在内的9大类16种抗生素;结果显示:氨苄西林、四环素耐药率较高,分别为76.01%、29.15%。氨基糖苷类的抗生素药敏片均具有良好的抑菌效果,大观霉素、丁胺卡那、卡那霉素的药物敏感性均达到了96%以上;克林霉素、复方新诺明、氟苯尼考、氨曲南的菌株药物敏感率也在90%以上。弧菌对头孢呋辛、克林霉素、丁胺卡那、新霉素、卡那霉素、多粘菌素B、多西环素、米诺环素等药物具有较高的中度敏感数量,中度敏感率分别为59.78%、66.79%、93.36%、68.63%、73.06%、59.41、60.52%、48.71%。本次试验检测中,副溶血弧菌主要毒力基因碱性丝氨酸蛋白酶相关基因Asp A,检出率为28.3%,跨膜转录调节蛋白相关基因tox S、tox R,检出率分别为54.35%、39.13%,鞭毛蛋白相关基因Fla A,检出率为34.78%,铁调节基因fur检出率为56.52%,三型分泌系统相关基因vsc B,检出率为19.57%;溶藻弧菌主要的毒力相关基因碱性丝氨酸蛋白酶相关基因Asp A的检出率为28.3%,跨膜转录调节蛋白的相关基因tox S、tox R检出率分别为54.35%、39

关键词： 急性呼吸道感染   人博卡病毒   流行病学   遗传学   细菌性病原体  

摘要： 目的:人博卡病毒(Human bocavirus,HBo V)的高检出率被认为与急性呼吸道感染疾病密切相关。本文以青岛市急性呼吸道感染住院患者为研究对象,监测其重要病毒病原体,建立HBo V感染者病毒、细菌性病原体感染谱,探索其特异性临床特征。深入了解青岛市HBo V呼吸道感染流行病学及遗传学特征,将为青岛地区HBo V相关呼吸道感染的预防和控制、临床诊断和治疗、分子流行病学研究以及急性呼吸道感染的预防和治疗提供基础数据和科学依据。方法:本研究收集了2018年1月至2019年12月期间青岛大学附属医院西海岸院区和青岛大学附属医院崂山院区急性呼吸道感染患者的呼吸道样本共2340份。采用多重实时荧光聚合酶链反应(Multiplex real-time fluorescence polymerase chain reaction,RT-PCR)方法对所有样本进行病毒性病原体检测后,对HBo V检出阳性样本再使用RT-PCR方法进行细菌性病原体检测。结合患者的人口学资料和临床数据信息,分析HBo V的流行病学特征及相关临床表现。通过巢式聚合酶链反应(Nested polymerase chain reaction,nested PCR)对HBo V阳性样本VP1/VP2基因片段进行了扩增和测序,利用生物信息学方法进行核苷酸测序分析、系统发育分析、选择压力分析和分子进化分析。结果:1.流行病学特征及临床表现分析结果:(1)2340份呼吸道样本共检出138份HBo V阳性样本,男女比例1.8:1,年龄按照<2岁、2～4岁、5～14岁、15～64岁以及≥65岁进行分组,HBo V检出率分别为27.54%、21.01%、15.22%、21.01%和15.22%。(2)HBo V仅在2018年9月、10月、11月、12月以及2019年1月、3月、9月、10月、11月和12月检测到;(3)病毒性病原体检测仅检出HBo V的病例106例(76.81%)。HBo V与其他病毒混合感染病例32例(23.19%),其中仅混合感染一种病毒25例,混合感染两种病毒7例。(4)HBo V样本中检出细菌性病原体103例(74.6%),其中仅混合感染一种细菌性病原体41例,混合感染两种细菌性病原体40例,混合感染三种细菌性病原体18例,混合四种细菌性病原体感染4例。(5)临床数据分析表明,HBo V感染患者中常见的呼吸道感染临床症状主要是咳嗽、发烧。(6)单一HBo V感染组与混合HBo V感染组比较,中性粒细胞、腺苷脱氢酶、肌酸激酶、胱抑素和碳酸氢盐水平值间的差异有统计学意义(P<0.05)。(7)存在细菌性病原体感染与不存在细菌性病原体感染的HBo V患者组相比,红细胞计数和甘油三酯水平值之间差异具有统计学意义(P<0.05)。(8)存在嗜麦芽窄食单胞菌感染与不存在嗜麦芽窄食单胞菌感染的HBo V患者相比,仅血钠水平值差异具有统计学意义(P<0.05)。2.遗传学特征分析结果:(1)系统发育分析显示本研究所得HBo V临床株都是HBo V1,临床株间遗传距离较近。(2)针对HBo V VP1/VP2基因片段进行同源性分析,本研究临床株与原型株相比,核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.78%～100.00%和95.00%～100.00%;与国外HBo V1代表株相比,核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.78%～100.00%和94.97%～100.00%。(3)氨基酸变异分析表明,本研究中HBo V临床株核苷酸变异位点共11个,共导致4个氨基酸发生了变异。(4)选择压力分析表明,本研究中HBo V临床株存在多个负选择位点,仅存在1个正选择位点。(5)贝叶斯进化分析结果表明,HBo V的VP1/VP2基因片段平均进化速率为7.657×10替代/位点/年,进化速率较低。结论:*** V1为本研究中HBo V感染的主要病原体。*** V感染对机体产生的不良影响需进一步研究。3.本研究所得临床株与流行参考株高度同源,遗传变异度较低。*** V虽基本处于负向选择作用,仍存在少量正向选择作用影响,对其监测仍然不可放松警惕。

关键词： 宠物猫   十二指肠贾第虫   隐孢子虫   胎儿三毛滴虫   人兽共患  

摘要： 隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)和十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis)是两种重要的人兽共患肠道寄生原虫,可感染人、猫等多种哺乳动物并可导致严重的腹泻。胎儿三毛滴虫(Trichomonas foetus)是引起猫大肠性腹泻的重要病原体,其在多种宿主的不同部位均可寄生,可能具有人兽共患风险。近年来,由于老龄化程度的加深及疫情影响,人们对猫等减压类治愈性伴侣动物的情感需求强烈。快速上升的猫饲养量给公共卫生带来巨大隐患。目前,猫寄生虫病与人类的健康密切相关,但河南省猫源肠道寄生虫感染情况的相关报道较少,隐孢子虫、十二指肠贾第虫和胎儿三毛滴虫等重要寄生虫的种系发育数据相对有限。因此,本研究通过调查河南省11个地级市的宠物猫肠道寄生虫的感染情况、探究猫体内三种重要肠道原虫的流行情况和种系发育情况,为河南省猫源肠道寄生虫的防控提供参考数据。本研究于河南省11个地级市共采集898份宠物猫粪便样品,相关研究结果如下:(1)显微镜检查结果显示肠道寄生虫总感染率为10.58%(95/898)。本研究共检查到6种肠道寄生虫,包括囊等孢球虫、华支睾吸虫、钩口线虫、芽囊原虫、贾第虫和蛔虫,其感染率分别为5.23%(47/898)、3.12%(28/898)、1.78%(16/898)、0.78%(7/898)、0.33%(3/898)和0.33%(3/898)。囊等孢球虫和华支睾吸虫为感染的优势虫种。宠物猫肠道寄生虫混合感染率为1.45%(13/898),以囊等孢球虫和圆线虫混合感染为主。本研究通过显微镜检查共检测到5种(华支睾吸虫、钩口线虫、芽囊原虫、贾第虫和蛔虫)人兽共患寄生虫虫种。地区分布、年龄、驱虫、免疫及腹泻等因素与宠物猫肠道寄生虫感染相关,其中幼龄、未驱虫、未免疫、腹泻的宠物猫华支睾吸虫检出率较高,感染华支睾吸虫的宠物猫易出现消瘦症状。通过显微镜检查未检测到隐孢子虫和胎儿三毛滴虫的存在,同时,贾第虫的检出率仅为0.33%(3/898),因此,后续研究采用分子生物学方法对三种重要肠道原虫进行进一步检测。(2)基于SSU rRNA位点,对隐孢子虫进行巢氏PCR扩增,其总感染率为0.78%(7/898),经鉴定均为人兽共患虫种***;基于gp60位点,对***阳性样本进行巢氏PCR扩增及DNA测序,均鉴定为IId A19G1亚型。基于β-giardin(bg)位点,对十二指肠贾第虫进行巢氏PCR扩增,发现其总感染率为2.00%(18/898)。共鉴定出4种十二指肠贾第虫集聚体,分别为集聚体C(10/18)、A1(4/18)、D(3/18)和F(1/18),集聚体C、A1、D和F均存在感染人类的风险。河南省宠物猫隐孢子虫和十二指肠贾第虫的感染率与地区分布、年龄、性别、腹泻、免疫及驱虫等因素无相关性,但感染隐孢子虫和十二指肠贾第虫的宠物猫均明显消瘦。基于18S rRNA位点,对胎儿三毛滴虫进行PCR扩增,其总感染率为6.01%(54/898),幼龄、未驱虫、未免疫、腹泻的河南省宠物猫应重点防控胎儿三毛滴虫感染。综上所述,河南省11个地级市宠物猫肠道寄生虫的总体感染率较低;隐孢子虫、十二指肠贾第虫和胎儿三毛滴虫的感染率不高,但均鉴定出可能存在人兽共患传播风险的虫种或基因型,揭示猫肠道寄生虫在伴侣动物与人之间相互传播的可能性。本研究首次在猫体内检测到隐孢子虫IIdA19G1亚型,丰富其在我国的宿主类型和地理分布信息。本研究为制定河南省宠物猫肠道寄生虫的有效防控措施提供了科学依据。

关键词： 羔羊腹泻致病性大肠杆菌   流行病学   粪菌移植   耐药性  

摘要： 羔羊腹泻是羊场的常发疾病，给新疆肉羊养殖带来重大经济损失。引起羔羊腹泻的病因较多，细菌性腹泻中大肠杆菌是常见的条件病原菌。本研究对喀什某羊场的腹泻羔羊肛拭子样品进行大肠杆菌的分离培养、溶血试验、致病性大肠杆菌鉴定和系统进化分群，常用抗生素的耐药性调查和ESBLs鉴定，同时采用粪菌移植的方法对腹泻羔羊进行初步治疗，具体研究如下:　　（1）在喀什羊场采集526份腹泻羔羊肛拭子样品进行大肠杆菌的分离鉴定、致病性大肠杆菌分类、溶血试验和系统进化分群。结果显示，526份样品中有326份含有大肠杆菌。采用PCR方法扩增13种特征性毒力基因（stx1、stx2、F5、F17、eae、IpaH、LT2、hlyA、aggR、escV、pic、InvE、astA）鉴定有271株致病性大肠杆菌，其中有80株EPEC（29.52％）,12株ETEC（4.43％），28株EAEC（10.33％），14株STEC（5.17％），及137株没有分型的致病性大肠杆菌（50.55％）;有151株大肠杆菌出现透明溶血环（151/326,46.32％），55株大肠杆菌出现溶血基因hlyA（55/326,16.87％）;共有295株大肠杆菌进行了系统进化分群，其中A群214株大肠杆菌（214/295,72.54％），D群43株大肠杆菌（43/295,14.58％），F群19株大肠杆菌（19/295,6.44％），B1群12株大肠杆菌（12/295,4.07％），分支1群6株大肠杆菌（6/295，2.03％），B2群1株大肠杆菌（1/295,0.34％）。　　（2）挑选了204株致病性大肠杆菌进行12类16种抗生素的耐药性调查。耐药结果由高到低依次是氨苄西林（100％）、头孢唑啉（100％）、阿奇霉素（99.02％）、甲氧苄啶（99.02％）、四环素（99.02％）、卡那霉素（98.53％）、恩诺沙星（98.04％）、头孢哌酮（98.04％）、庆大霉素（96.08％）、头孢噻肟（93.63％）、氯霉素（91.67％）、氨曲南（90.69％）、呋喃妥因（78.43％）、头孢他啶（61.27％）、美罗培南（42.65％）和磷霉素（21.57％）。204株致病性大肠杆菌中多药耐药菌株有204株（100％），主要为9重耐药、10重耐药及11重耐药。其中9重耐药有36株，占有17.65％;10重耐药有70株，占有34.31％;11重耐药有46株，占有22.55％。204株致病性大肠杆菌中有201株为产ESBLs且100％编码β-内酰胺酶耐药基因，49株（49/201，24.38％）产ESBLs菌株编码1种β-内酰胺酶耐药基因，分别为CTX-M（4株，1.99％）、CTX-M-1G（29株，14.43％）、CTX-M-9G（4株，1.99％）、TEM(12株，5.97％），152株（152/201，75.62％）产ESBLs菌株编码2种及以上的β-内酰胺酶耐药基因，主要组合形式为CTX-M-1G+CTX-M+TEM(61株，30.35％）、CTX-M-9G+CTX-M+TEM（25株，12.44％）、CTX-M-1G+CTX-M（20株，9.95％）和CTX-M-1G+CTX-M-9G+CTX-M+TEM（14株，6.97％）。　　（3）采用粪菌移植的方法对63只腹泻羔羊进行治疗，治愈了40只，治愈率为63.49％,生理生化指标基本恢复正常水平，能够达到一定的治疗效果。采用16SrRNA测序使用的粪菌液，微生物多样性分析属结果主要菌群为其他菌属和普雷沃特氏菌-9。　　综上所述，引发该场羔羊腹泻的致病性大肠杆菌主要是EPEC和EAEC，有较多的溶血性大肠杆菌，系统进化群主要是A群和F群，分离菌株耐药严重，呈高耐药性。且产ESBLs菌株也较多，并编码大量的β-内酰胺酶耐药基因，提示该羊场耐药情况的复杂和严重性。采用粪菌移植的方法对羔羊腹泻有一定的治疗效果。