关键词： 过敏性咽炎   中医证候   相关因素   研究  

摘要： 目的：本研究收集四川省内符合过敏性咽炎诊断患者的临床资料,分析患者的基本资料情况、四诊资料、中医证候分布特点及与相关因素之间的关系,初步提出四川省过敏性咽炎中医证型分布规律,为以后进一步制定并优化过敏性咽炎辨证治疗方案提供中医流行病学依据。方法：本研究通过问卷方式,门诊收集2022年1月到2023年1月期间就诊于成都中医药大学附属医院等多家医院的患者信息(包括基本情况、中医四诊资料、既往史、个人史、家族史、相关辅助检查结果),将所收集的符合要求的问卷导入Excel,运用SPSS27.0软件进行统计分析,计数资料以频数及频率表示,四诊资料进行聚类分析和因子分析。结果：根据收集的资料分析,有如下特点:(1)发病特点:过敏性咽炎发病女性多于男性,约为5:3,且以汉族居多;发病年龄主要在28～57岁,以青中年多见;就诊时间集中于秋冬、冬春季节,以1、3、9、10、11、12月为多。因感冒、食入某种食物或是吸入刺激性气味而诱发本病的占比分别达23.5%、17.2%、14.5%。(2)证候特点:咽痒、咳嗽为过敏性咽炎主症,咽部异物感、咽干、干咳无痰等症状出现最为频繁,舌淡红、舌淡、舌红为主要舌质表现,薄白、薄腻、薄黄、少苔为常见舌苔,脉象以脉浮、脉细弱、脉滑及脉细数常见。局部体征主要表现为:咽后壁淋巴滤泡增生、咽部黏膜色淡。(3)临床证型特点:统计患者的四诊资料,并对证候进行临床证型分类,结果显示:风邪犯肺型(144例,占32.6%)、卫表不固禀赋异常型(111例,占25.1%)、脾虚痰浊型(93例,占21.0%)及肺肾阴虚型(48例,占10.9%)为临床常见证型。(4)聚类分析结果:对收集的证候进行聚类分析,结果显示当标尺垂直放于欧式距离为7时,可分为5类证候群,得出4个证型,分别为:风邪犯肺证(156例,占35.3%)、卫表不固禀赋异常证(123例,占27.8%)、脾虚痰浊证(105例,占23.8%)、肺肾阴虚证(58例,占13.1%),与临床辨证符合度分别为:92.3%、90.2%、88.5%、82.7%。因子分析结果:除咽痒咳嗽主症外,咽部异物感、咽干、干咳无痰、白稀痰、咽后壁淋巴滤泡增生、舌质淡红、舌苔薄白、脉浮、脉细弱为其主要因子,9个因子总方差累计贡献率达72.908%。依据旋转后的各变量对公因子的贡献率,可将过敏性咽炎证型归为:类风邪犯肺证、类卫表不固禀赋异常证、类脾虚痰浊证、类肺肾阴虚证。可得出过敏性咽炎病位主要在肺、脾、肾三脏,“风邪、气虚、阴虚、痰湿”为其主要病因。聚类分析与因子分析的结果和临床调查结果较为相符,表明具有可信度。结论：通过442例有效资料分析,得出如下结论:(1)过敏性咽炎发病以青中年为主,且女性多于男性,约5:3。(2)发病时间多见于秋冬、冬春季节;感冒、食入或吸入过敏原为其主要诱发因素。(3)过敏性咽炎主要证候以咽痒、咳嗽、咽部异物感、咽干、舌淡红、苔薄白或薄腻、脉浮、脉细弱或脉滑为主;局部体征主要表现为:咽后壁淋巴滤泡增生、咽部黏膜色淡。(4)风邪犯肺型、卫表不固禀赋异常型、脾虚痰浊型及肺肾阴虚型为临床常见证型。其病位主要在肺、脾、肾,病理因素主要有“风邪、气虚、阴虚、痰湿”。

关键词： 糖尿病   患病率   Meta分析   时间序列   空间自相关分析  

摘要： [背景]糖尿病是一种以血糖升高为主要特征的代谢性疾病,病程长且伴随多种并发症。因目前还没有有效的治愈方法,糖尿病的防治更为重要。党的十九大提出“健康中国”战略,中国作为人口大国,老龄化进程加快,慢性病在疾病占比逐渐增大,糖尿病作为慢性病之一,已经成为严重的公共卫生问题。但是对于糖尿病患病率宏观上数据的量化。本研究旨在促进糖尿病患病率的揭示,促进科学决策,为国家糖尿病预防治措施的发布增加数据支撑。[目的]近些年糖尿病前期患病率和糖尿病患病率持续走高,糖尿病现象越来越普遍,且已有年轻化趋势,相比之下糖尿病的知晓率和治疗率仅为30.1%,与我国的高患病率并不匹配,探究糖尿病与时间、空间、地区之间的关系,分析其规律,在宏观上对糖尿病患病率进行把控。[方法]研究搜集国内外众多数据库,制订相关检索式,初步筛选并对纳入文献进行质量评估,将最终质量合格文献进行数据采集和数据清洗,在Meta分析的基础上进行糖尿病患病率的合并,对于时间、空间、人群三个要素,分别采用时间序列分析法,空间数据自相关方法以及人群相关的方法进行分析。[结果]本次研究共纳入2307篇文献,发表年份在1980～2022年之间。时间分布:我国1990～2020年的糖尿病患病率呈持续走高趋势,周期性上升。30年糖尿病患病率合并数据量,糖尿病患病率为7.5%,95%置信区间为(0.064～0.085)。在1993年、2003年和2021年呈大幅度上升,并且在1999年和2012年产生两个拐点。对于未来5年的发病率预测是13.6%、14.2%、14.1%、12.5%、15%。空间分布:我国34个省份,部分省份没有文献记载,糖尿病患病率为8.5%,95%置信区间为(0.080～0.090)。其中发病率最高的陕西,最低的是西藏。全局莫兰指数为0.09446,全局患病率有显著空间性,局部LISA图中,五个地区显著性较强。其中高-高聚集地区是陕西,高-低聚集地区是西藏。人群分析:性别:糖尿病的发病率在性别之间有显著差异(P<0.05),女性患病率高于男性。年龄:年龄与糖尿病患病率呈正相关。糖尿病患病率在在30岁～35岁和35岁～40岁两个年龄段之间增幅较大,在80岁～85岁年龄段增长到最高点,整体呈波动式上升。随着年龄的增长,发病率逐渐升高,在25岁和75岁时出现两个拐点。民族:本次研究共涉及32个民族,其中14个民族只有1篇文献。为保证研究结果的真实性,选取3个调查人数最多的民族进行研究,分别是哈萨克族、维吾尔族和回族,哈萨克族、维吾尔族和回族的患病率分别为:4.9%、7.1%、10.2%。少数民族回族的患病率最高为10.2%。糖尿病患病率在民族之间存在显著差异。[结论]据对1990～2020年之间相关文献的研究,我国糖尿病患病率在时间、空间、人群三个维度之间都有规律可以遵循。我国糖尿病患病率自1990年～2020年曲折式增高,年均增长率为0.33%,30年糖尿病患病率合并为7.5%。并且在1999年和2020年出现两个拐点,患病率大幅度升高。在空间上34个省(市、自治区)糖尿病患病率合并为8.5%,全局莫兰指数为0.0945,Z得分为1.0623,P值=0.2881>0.05,说明整体没有聚集性,在局部的分析中有明显的聚集性,高高聚集是山西省和安徽省,低低聚集是西藏自治区,云南省和广西壮族自治区。热点分析显示热点地区是山西省。人群分析中,男性患病率8.3%,女性合并发病率7.8%。女性患病率低于男性;随着年龄的增长患病率逐渐增高,在85岁时达到最高;本研究纳入文献的民族中,回族的合并发病率最高。

关键词： 羊刺球蚴病   流行病学   调查报告   防治措施  

摘要： 刺球蚴病又被称为包虫病，是放牧地区羊养殖领域发生流行率相对较高的一类体内寄生虫疾病，同时也是一种典型的人畜共患传染性疾病。刺球蚴病的发生流行会对一个地区的畜牧养殖安全构成严重的威胁，当牲畜受到该种疾病感染之后，往往表现为生长发育不良，生产性能大幅度下降，由于包囊的大量出现，会导致脏器组织受到严重压迫，表现出特征性的临床症状，严重时直接会造成羊群死亡。对此就需要掌握刺球蚴病的实际流行，且现状定期采取措施进行有效处理，确保在短时间内控制病情。本文主要结合实际工作经验，探讨了2018年～2021年青海省化隆县羊刺球蚴病的流行情况，通过掌握刺球蚴病的流行规律，为科学防控该种疾病奠定坚实基础。

关键词： 新冠病毒感染   无症状患者   流行病学   变异体   预后  

摘要： 研究背景:新冠病毒感染是一种世界流行病,无症状传播是新冠病毒社区传播的重要问题之一,然而关于无症状患者的人口学、病毒学特征和预后的信息很少。研究目的:(1)探索新冠病毒感染无症状患者的人口学特征,明确哪些人群容易成为无症状患者,予以重点关注和监测,减少无症状传播。(2)探索不同新冠病毒变异体的致病特点,筛选出我们应该重点关注的变异体。(3)明确不同患者的预后,以指导预防或治疗。研究方法:经广东省卫生健康委员会和广东省新冠疫情防治指挥部的授权,借助广东省远程医疗平台,对2020年9月1日至2021年2月28日期间,广东省内32家新冠定点医院收治的,233名确诊为新冠病毒感染并明确了其感染的新冠病毒变异体的患者进行回顾性分析。根据患者的临床特点,分为无症状组和有症状组,借助SPSS26.0软件,采用统计描述、正态检验、参数检验、非参数检验等统计学方法,对其年龄、性别、基础病、来源国家或地区、新冠病毒变异体、临床病程的重要时间点、感染指标及器官功能指标等数据资料进行对比分析。结果:与有症状组患者相比,无症状组患者的年龄更小(32.71±12.17vs 36.73±12.55,P=0.019),基础病较少(8.4%vs 20.0%,P=0.021),高血压(2.4%vs 9.3%,P=0.083)、慢性肝病(1.2%vs 8.7%,P=0.045)的合并率更低,但慢性肺病的合并率更高(4.8%vs 0.7%,P=0.056).本研究中233名患者来自57个不同的国家和地区,其中来自南非、印度尼西亚、缅甸、俄罗斯、加纳等国家或地区的患者主要为无症状,而来自英国、美国、菲律宾、孟加拉国、尼日利亚、马来西亚、香港、法国和科威特等国家或地区的患者主要为有症状.PANGOLIN B是本研究中新冠病毒变异体的主体,且有12种主要变异体(病例数 n≥5):B(n=10)、B.1(n=34)、B.1.1(n=26)、B.1.1.63(n=9)、B.1.1.7(n=6)、B.1.351(n=11)、B.1.36(n=10)、B.1.36.1(n=10)、B.1.36.16(n=13)、B.1.5(n=10)、B.1.524(n=5)、B.6(n=10).其中感染 B.1.1(53.8%)、B.1.351(81.8%)和B.1.524(60.0%)的患者主要为无症状,而感染B(90.0%)、B.1(61.8%)、B.1.1.63(88.9%)、B.1.1.7(83.3%)、B.1.36(60.0%)、.B.1.36.1(70.0%)、B.1.36.16(76.9%)、B.1.5(90.0%)、B.6(90.0%)的患者主要为有症状。与有症状组相比,无症状组患者的感染指标WBC(6.155 vs 5.280,P=0.002)和 LYMPH%(31.30%vs 27.95%,P=0.011)更高,而 NE%(55.65%vs 60.4%,P=0.019)、PCT(0.055 vs 0.108,P=0.021)更低,器官功能指标ALT(21.00 vs 23.53,P=0.029)、CK(53.50 vs 71.00,P=0.025)和 DDI(0.22 vs 85.00,P<0.001)水平更低。感染B.1.351和B.1.524的患者的新冠核酸转阴时间(26天,P=0.085;41天,P=0.007)和住院时间(28天,P=0.085;43天,P=0.004)明显长于其他变异体。结论:(1)人口学和流行病学方面:年轻、基础病(慢性肝病、高血压)较少、器官功能较好和免疫功能较稳定的患者感染新冠病毒后,更多表现为无症状;(2)病毒学方面:感染新冠病毒B.1.1、B.1.351、B.1.524等变异体的患者更容易表现为无症状,其中感染B.1.351、B.1.524后,预后更加不良或复杂,值得更多的关注。

关键词： 免疫抑制性病毒   海南   感染   流行病学   文昌鸡  

摘要： 鸡免疫抑制性疾病通常会引起鸡群免疫力下降、接种疫苗的免疫效果降低,鸡生长迟缓,生产性能降低,给养鸡行业带来巨大的经济损失。兽医临床上常见的免疫抑制性疾病的病毒有马立克氏病病毒(MDV)、鸡白血病病毒(ALV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、网状内皮组织增殖病病毒(REV)、鸡传染性贫血病病毒(CIAV),临床上它们不单单表现为单独感染,同时也有两者或三者间的混合感染的情况出现。这五种免疫抑制性疾病在国内的流行病学调查报道较多,但有关海南的报道却尚未见到。文昌鸡是海南省具有地方特色的优质家禽品种,文昌鸡产业亦是海南省重要的经济支柱之一。因此,本研究采用ELISA和PCR方法开展了海南省文昌鸡的主要免疫抑制性病毒感染现状调查,填补了这5种免疫抑制性疾病感染数据在海南地区的空白,为海南省文昌鸡免疫抑制性疾病的防控提供依据。主要结果如下:(1)海南省文昌鸡的主要病毒性免疫抑病血清学调查本次血清学调查对来自海南省文昌鸡主要养殖地区海口市、文昌市、儋州市、琼海市、澄迈县的15个规模养殖场采集1 764份血清样品通过ELISA方法对REV、ALV、CIAV、IBDV、MDV抗体检测,结果显示,海南省文昌鸡主要饲养地区普遍存在CIAV、ALV-J、REV、ALV-A/B感染,抗体阳性率分别为34.31%、10.42%、7.79%、0.29%;混合感染以CIAV+ALV-J为主,抗体阳性率为6.53%;CIAV、ALV-A/B在小规模鸡场,REV、ALV-J在中规模鸡场的感染较严重,抗体阳性率分别为44.78%、0.93%、11.85%、21.48%;CIAV在商品代蛋鸡,ALV-J、REV在商品代肉鸡的感染最严重,抗体阳性率分别62.62%,20.13%、10.89%,种鸡中ALVA/B感染较少。成年鸡CIAV、ALV-A/B、ALV-J、REV感染情况高于其他生长阶段的鸡,抗体阳性检出率分别为55.24%、14.15%、0.53%和11.43%。CIAV、ALVJ在冬季,REV在夏季的感染最严重,抗体阳性率分别为52.69%,23.12%。CIAV、REV在澄迈县,ALV-J在儋州市的感染最严重,抗体阳性率分别为94.59%、13.33%、13.51%。海南省文昌鸡群IBDV的整体免疫抗体水平较高,抗体总阳性率为94.73%;鸡群MD的抗体水平较低,抗体总阳性率为60.08%。应加强对这两地文昌鸡场的MD疫苗免疫。(2)海南省文昌鸡的主要病毒性免疫抑制病病原学调查本次病原学调查对来自海南省文昌鸡主要养殖地区海口市、文昌市、儋州市、琼海市、澄迈县的15个规模养殖场采集的咽拭子、泄殖腔拭子、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊3 560样品通过PCR方法对MDV、CIAV、ALV-J、IBDV、REV检测,结果表明,这些病毒在海南省文昌鸡群中普遍存在,阳性检出率分别为18.79%、26.12%、41.69%、29.49%、40.73%;鸡群混合感染以REV+ALV-J为主。MDV、REV、ALV-J在小规模养殖场中的感染最严重,CIAV、IBDV在中规模养殖场的感染最严重,阳性率分别为31.98%、43.39%、44.56%、38.81%、49.25%。MDV、CIAV、IBDV在冬季感染较多,REV、ALV-J在春季感染较多,阳性率分别为26.06%、32.51%、48.47%、47.95%、52.29%。CIAV、ALV-J、REV在成年文昌鸡的感染最严重,MDV、IBDV在雏鸡阶段感染最严重,阳性率分别为35.53%、44.16%、48.80%、22.08%、33.96%。MDV、CIAV、ALV-J在商品代肉鸡中的感染最严重,阳性率分别为23.09%、37.07%、44.72%;IBDV在商品代蛋鸡中的感染程度较高,阳性率为42.50%;REV在种鸡群中的感染程度较高为47.92%。(3)文昌鸡的不同类型样品中主要免疫抑制性病毒的检测从海南省文昌鸡的主要养殖地区选出健康状况不佳的134只鸡,采集肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊、咽拭子、泄殖腔拭子、血清样品检测MD、IBD、CIA、RE及ALV的阳性率。REV在肝脏、脾脏阳性检出率最高,均为20.15%;IBDV在肾脏的阳性检出率最高,为53.73%;CIAV在脾脏的阳性检出率最高,为57.46%;ALV-J在肺脏的阳性检出率最高,为61.19%;MDV在肺脏中的阳性检出率最高,为47.76%。上述结果表明,MDV、CIAV、ALV-J、IBDV、REV在海南省文昌鸡群中普遍存在,其感染程度与鸡场规模、季节、鸡的日龄、鸡的种类相关,应加强对海南省文昌鸡MDV、CIAV、ALV-J、IBDV、REV的防控。

关键词： 湖羊   16S rRNA测序   支原体肺炎   精氨酸支原体  

摘要： 湖羊因其优良的性状成为全国各地争相引进的品种,随着近年来大型规模湖羊场的建立,湖羊呼吸系统传染病频发,尤其是羊肺炎,严重制约湖羊养殖业的发展。本研究通过16S r RNA高通量测序,对患有肺炎的湖羊上、下呼吸道以及肺脏的微生物多样性进行分析、榆林市部分县区规模湖羊场呼吸道病原流行病学调查及支原体分离鉴定等3个方面,对榆林市湖羊呼吸道病原进行了研究,结果可为湖羊肺炎的防控提供科学依据。1.对榆林市某规模湖羊场3月龄表现呼吸道感染症状的湖羊无菌剖检后,采集上呼吸道、下呼吸道黏液棉拭子和肺脏组织,提取DNA、通过对16S基因的v4可变区进行PCR扩增、构建文库并上机测序,最后通过OTUs聚类、物种组成分析、物种多样性分析和寻找标志物种等分析了湖羊上呼吸道、下呼吸道肺组织微生物的群落。结果显示,试验所采集的患呼吸道传染病的湖羊上、下呼吸道都具有丰富的微生物类群,且物种数相似。特别是肺组织也同时表现大量的微生物,且发现支原体类微生物占有一定的比例。结果说明本研究所涉及的湖羊可能是支原体感染,患支原体性肺炎并继发其他微生物在分布、生态上出现异常。2.基于肺炎湖羊呼吸道微生物群落分析的结果,本研究分别采集榆阳区、绥德县、定边县、吴堡县、米脂县、清涧县6县区规模湖羊场湖羊鼻拭子483份,通过PCR对绵羊肺炎支原体、山羊支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体丝状亚种、丝状支原体山羊亚种和精氨酸支原体感染情况进行了流行病学调查。结果显示,除了清涧县外其他5个调查的县区均有不同程度的支原体感染,总体而言丝状支原体丝状亚种和绵羊肺炎支原体感染最多,阳性率分别为14.08%和6.21%,丝状支原体山羊亚种1.45%,山羊支原体山羊亚种0.21%,精氨酸支原体0.83%。然而,各县区支原体感染的种类和阳性率有所不同,其中榆阳区阳性率最高,丝状支原体丝状亚种和绵羊肺炎支原体的阳性率达到了44.35%和22.58%;定边县检测到了本研究中所涉及的4种支原体,绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种、丝状支原体丝状亚种、精氨酸支原体的阳性率分别是0.66%、2.33%、2.66%、1.33%;吴堡县和米脂县的湖羊只检测到丝状支原体丝状亚种,阳性率为25%;绥德县只有1例阳性为山羊支原体山羊肺炎亚种所感染,阳性率为5.00%。研究结果表明,在榆林市规模化湖羊场存在较高的支原体感染率。因此,在明确支原体感染情况的基础上,对相应支原体进行分离培养鉴定,将是规模化湖羊场肺炎防控的基础工作之一。3.本研究无菌采集榆林某湖羊场发生肺炎的羔羊肺组织和流行病学调查的阳性样品,经抹片革兰氏染色镜检,PCR检测后进行分离培养、菌体形态和菌落形态等鉴定,并通过PCR检测及测序等对分离物进行了菌株鉴定。结果显示,抹片革兰氏染色镜检未观察到任何细菌,PCR检测仅支原体核酸阳性,其余病原核酸阴性;分离物革兰氏染色阴性,菌体呈多形性,在PPLO固体培养基上形成具有“中心脐”的典型煎蛋样菌落;分离物的PCR种属鉴定结果显示支原体目和精氨酸支原体引物扩增产物与预期一致,且精氨酸支原体引物扩增产物测序结果与Genebank中精氨酸支原体的序列相似性为100%。因此,明确分离出的是精氨酸支原体。本研究通过具有呼吸道感染症状湖羊的上、下呼吸道和肺组织微生物群落分析、规模化湖羊场支原体流行病学调查以及精氨酸支原体的分离鉴定的系统研究,明确了榆林市规模化湖羊场的湖羊呼吸道感染的关键病原之一是支原体,且除了条件性的精氨酸支原体感染外,绵羊支原体、山羊支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体丝状亚种、丝状支原体山羊亚种、精氨酸支原体等均具有较高的致病率。本研究为湖羊呼吸系统传染病的病原学研究奠定了生物学基础,也为榆林市规模化湖羊场呼吸道传染病的防控提供了参考。

关键词： 学生   肺结核   流行特征  

摘要： 目的 掌握近十年青海省学校肺结核的流行病学特征，为完善学校结核病防控措施提供参考依据。方法 收集2013—2022年《传染病报告信息管理系统》和《青海省统计年鉴》中有关资料，分析学生肺结核报告发病的三间分布和就诊延迟情况。结果 2013—2022年青海省共报告肺结核病例69 331例，其中学生病例9 813例，占总数的14.16%；学生发病占比呈上升趋势，由2013年的9.08%上升至2022年的15.26%(χ2=6.223,P<0.001)。2013—2022年发病有明显的集中趋势(Z=9.1757,P<0.05)，发病高峰日在7月30日，流行期为每年的2月27日—12月29日。我省玉树州、果洛州、黄南州学生肺结核占全省总数的74.64%。病原学阳性率由2013年的27.18%上升至2022年的39.56%(χ2=584.449,P<0.001)。就诊延迟比例为44.53%，中位数为54 d。2013—2022年就诊延迟比例逐年下降(χ2=15.517,P<0.001)。结论 2013—2017年青海省学生肺结核疫情呈上升趋势，特别是玉树州、果洛州疫情严重，2018年开始全省学生肺结核疫情呈下降趋势。

关键词： 猪圆环病毒3型   猪传染性胃肠炎病毒   猪流行性腹泻病毒   流行病学调查   遗传进化分析  

摘要： 猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)会导致怀孕母猪流产率增加,仔猪出现呼吸道疾病,腹泻和渗出性皮炎等症状。猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)均为猪肠道冠状病毒,均可以导致猪群腹泻脱水,死亡率增加。成年猪感染TGEV后可以不发病,呈携带状态,并可以持续排毒。生猪买卖和后备母猪跨区域运输过程中会导致疾病传播,这使得猪场更难清除TGEV和PEDV。本研究就PCV3、TGEV和PEDV的流行情况、遗传演化情况及分离鉴定方面进行了研究与探讨。本研究从山东省9个地市(济南市,青岛市,淄博市,潍坊市,临沂市,聊城市,滨州市,菏泽市,日照市)收集了1040份样品进行用PCR扩增检测。结果表明PCV3检出率为2.3%(24/1040),不同季节和不同年龄段的猪群均有检出;TGEV检出率为4.1%(43/1040),主要集中在秋季和种猪群;PEDV检出率为0.2%(3/1040),来自聊城的样品,经检测为TGEV+PEDV混合感染。对PCV3阳性样品扩增其全基因组,获得两株PCV3全基因组序列,S19和BZL。基于全基因组和ORF1遗传进化树表明S19和BZ-L属于PCV3a亚群,两者亲缘关系较远。对PEDV阳性样本扩增其S基因序列,获得两株PEDV的S基因,命名为LC01和LC02。遗传进化树表明LC01和LC02同属于GI-a亚群,与经典疫苗株CV777亲缘关系比较近同属于GI大群,与GII亚群的湖北疫苗株AJ1102亲缘关系较远。将LC01和LC02进行S蛋白氨基酸进行同源性分析,结果表明LC01和LC02的氨基酸同源性为99.9%。与CV777经典疫苗株氨基酸同源性分别为95.8%和95.9%,与湖北疫苗株AJ1102氨基酸同源性分别为92.7%和92.8%,与韩国疫苗株DR13-JQ023162氨基酸同源性99.8%。将TGEV阳性样本接种于PK-15细胞,经传代后分离出一株TGEV毒株,命名为SD01,经PCR检测,未发现PEDV及PDCo V污染。接种48 h后可观察到细胞病变,经电镜观察到有冠状结构的病毒粒子。利用二代测序(NGS)技术获得SD01的全基因组,经Clustal W进行序列比对,评估SD01和38株参考毒株的全基因组、S基因、M基因和N基因,还有非结构基因ORF1a和ORF1b,结果表明,SD01毒株Miller亚群的毒株亲缘关系最近。综上所述,PCV3、TGEV和PEDV在山东省规模化猪场存在不同程度的感染,本研究分析了山东省PCV3、TGEV和PEDV流行株的遗传演化规律。研究结果丰富了山东省的PCV3、TGEV和PEDV流行病学资料,为山东省猪病防控工作提供了参考依据。

关键词： 弯曲菌   分离策略   分割车间   分布特征   传播规律  

摘要： 弯曲菌(Campylobacter)是全球范围内流行的一种人畜共患菌,其中造成感染与传播的多为空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)与结肠弯曲菌(Calmpyobactercoli),二者均可引起消费者食物中毒与胃肠道炎症。弯曲菌的感染症状主要包括腹泻、腹痛、发热、恶心、呕吐等,一般情况下为自限性疾病,但也可引发胃炎及格林-巴利综合征等严重并发症。禽类食品生产销售环节是弯曲菌传播感染的最主要途径。目前世界各地区在分离纯化弯曲菌时额外添加抗生素抑制杂菌生长,但不同地区间抗生素选用具有差异。本文以GB4789.9-2014国家标准为基础,建立针对不同洁净度样品分离纯化弯曲菌的最优抗生素选用;开展对中国华东地区一大型肉鸡屠宰加工企业的弯曲菌流行情况调查;建立弯曲菌在禽类屠宰加工链条的传播模型并初步探究弯曲菌的传播污染范围,旨在为分离弯曲菌提供更优抗生素组合,为弯曲菌在禽类屠宰加工过程流行病学研究与防控提供新思路。一、弯曲菌分离使用抗生素的组合优化研究以GB4789.9-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》国家标准为基础,对添加的六种抗生素(多粘菌素B、甲氧苄氨嘧啶、利福平、放线菌酮、头孢哌酮及两性霉素B)进行分类与组合,包括三抗(多粘菌素B、甲氧苄氨嘧啶、头孢哌酮)、四抗(多粘菌素B、甲氧苄氨嘧啶、利福平、头孢哌酮)和相同六抗。以样品阳性检出与菌落数为标准,探究不同抗生素组合的弯曲菌分离效果。结果显示弯曲菌的生物膜形成能力随抗生素使用增加而降低。针对不同洁净度样品,抗生素选择亦有区别。肛拭样最佳适用抗生素组合为六抗,弯曲菌定性(17.3%)与定量检出(7.64×104CFU/g)(P<0.05)均高于四抗与三抗;擦拭样在四抗培养基中具有最高的检出阳性率(35.6%)(P<0.05)与带菌量(2.33×102CFU/100cm2)(P<0.05);液体样在四抗培养基中具有最高的检出阳性率(38.9%)(P<0.05),三抗有最高的检出带菌量(1.05×102 CFU/mL)(P<0.001),针对车间内不同种类与洁净读样品应选用不同抗生素组合分离弯曲菌。二、禽类加工链弯曲菌流行病学调查与传播特征分析于中国华东地区一大型禽类屠宰企业收集共3050份加工链条样品,包括泄殖腔肛拭样、鸡肉胴体擦拭样及传送带、挂钩、操作工具等环境样品,利用经前一章优化的六抗、四抗与三抗组合CCDA培养基分离弯曲菌,结合分子流行病学技术,探究弯曲菌在屠宰加工链条中的流行与污染情况。使用MATLAB软件对采样数据进行多项拟合,建立弯曲菌的传播污染模型,以描述并预测弯曲菌在屠宰链条及分割环节内的传播特征与污染范围。结果显示22.3%(146/650)产品擦拭样呈弯曲菌阳性,阳性率随加工链条推进逐步升高,分割环节内50.8%(66/130)(P<0.001)产品受弯曲菌污染;定量结果以净膛环节为分界点先升后降,分割环节时带菌量保持在低位2.73×102CFU/100cm2(P<0.001)。传播污染模型显示产品样的弯曲菌污染传播距离与企业链条长度紧密相关,模型预测弯曲菌的传播污染不局限于屠宰链条,企业周边地区亦存在阳性检出可能。19.4%(466/2400)环境样品呈现弯曲菌阳性,阳性样品主要集中于分割环节,高阳性检出点位包括鸡腿盛放框阳性率 73.3%(33/45)(P<0.0001),鸡腿传送带阳性率 86.7%(39/45)(P<0.0001),加工砧板33.3%(10/30)(P<0.05)。环境样品带菌量与鸡肉产品样类似,均经消毒后急剧下降。传播污染模型显示,分割环节内传送带周边工人工作范围内弯曲菌传播污染范围较广,而产品盛放框与加工砧板内弯曲菌向周边污染传播能力显著减弱(P<0.05)。针对传送带周边分离株MLST结果证实,84.8%(28/33)的分离株属同一 ST型,弯曲菌聚集污染现象严重。冷冻储存10天后阳性率显著降低(P<0.05),30天后已无弯曲菌检出;春、秋、冬三季的弯曲菌阳性率与带菌量均保持稳定,季节变化对弯曲菌检出无显著影响。综上结果,应加强对企业周边及分割环节内传送带周边的弯曲菌污染的防控。

关键词： γ-干扰素释放试验   基于结核分枝杆菌抗原皮肤试验   结核潜伏感染   流行病学调查  

摘要： 研究背景:结核病是严重威胁人类健康的重大公共卫生威胁。据估算全球有近四分之一的人感染了结核分枝杆菌并长期处于潜伏感染状态,其中5%-10%的潜伏感染者可能会在一生中发生活动性结核病。针对结核潜伏感染的高危人群开展结核病预防性治疗是实现终结结核病流行战略目标的重要手段之一。然而,目前我国农村社区重点人群的结核潜伏感染负担及其流行特征还有待阐明,迫切需要建立适宜的、本土化的结核潜伏感染检测和预防性干预技术体系。研究方法:本项研究依托“农村社区重点人群结核潜伏感染免疫干预研究”课题,针对我国农村社区重点人群(50-70岁中老年人群、糖尿病患者)开展结核潜伏感染流行病学调查,获得目标人群结核潜伏感染负担及其流行特征,同时进行新型结核潜伏感染检测技术的应用性评价,为未来进一步推动重点人群的结核潜伏感染检测和社区干预提供数据参考。在签署知情同意的基础上,首先采用问卷调查、常规体格检查收集调查对象的基本人口学信息;对每位调查对象进行胸部影像学检查和可疑症状问诊,疑似结核病患者或有肺结核可疑症状者留取三份痰样本进行痰涂片、痰培养及Gene-Xpert检测以排除活动性肺结核;利用γ-干扰素释放试验(Interferon gamma release assay,IGRA)获得目标人群的结核潜伏感染负担;开展基于结核分枝杆菌抗原皮肤试验(Mycobacterium tuberculosis antigen-based skin test,TBST),并以IGRA结果为参照进行性能评价,分析影响两者结果一致性的因素。研究结果:1)农村社区中老年人群结核潜伏感染流行病学调查和感染检测新技术评价:纳入383名50-70岁中老年调查对象,其中未发现活动性肺结核病例,基于IGRA结果的结核潜伏感染率为20.10%(77/383);在该重点人群中,TBST(48小时)的阳性率为11.75%(45/383),TBST(48小时)与IGRA结果的一致率为90.58%(346/382),Kappa 系数为 0.65(95%CI:0.55-0.76)。多因素 Logistic 回归分析结果显示,有吸烟史、肺结核密切接触史者的结核潜伏感染风险更高,调整比值比分别为4.33(95%CI:1.78-10.53)和 3.52(95%CI:1.08-11.45)。2)农村社区糖尿病患者结核潜伏感染流行病学调查和感染检测新技术评价:纳入468名18-65岁糖尿病患者,其中未发现活动性肺结核病例,基于IGRA结果的结核潜伏感染率为15.38%(72/468);TBST 的阳性率为 10.68%(50/468),TBST 与 IGRA 结果的一致率为91.03%(426/468),Kappa 系数为 0.61(95%CI:0.50-0.71);间隔三个月后重复检测,TBST的阳性率为15.84%(64/404),TBST与首次检测IGRA结果的一致率为 94.06%(380/404),Kappa 系数为 0.77(95%CI:0.68-0.86)。研究结论:研究获得了中老年人群和糖尿病患者中基于IGRA结果的结核潜伏感染率。在研究目标人群中TBST和IGRA具有较好的一致性,研究发现皮肤试验的复强效应可提升TBST的阳性率和与IGRA结果的一致性。