关键词:
HCV
基因型
云南本地
境外输入
流行病学
摘要:
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)引起的一种主要经血液传播的疾病,HCV感染可导致慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌,已成为一个重大的公共卫生问题。据统计,全球约有1.7~2.0亿人感染了HCV,我国HCV感染者约占全球HCV感染总人口的14%,2016年,世界卫生组织(WHO)提出了到2030年消除病毒性肝炎的新全球目标。近年来,经济的全球化发展和人群的跨境流动增大了病毒传播和不同基因亚型病毒交流的风险与机会,促进了病毒的流行与传播。云南地处我国西南边陲,与东南亚多个国家接壤,由于特殊地理位置、民族群体多样性以及注射毒品的使用,云南成为HCV流行的主要地区之一,且云南HCV的跨境输入也时常发生。然而,目前对于云南境外输入HCV分子流行特征如何?云南境外输入与云南本地HCV分子流行特征差异如何?少有报道。因此,本文针对云南境外输入和云南本地HCV感染人群进行调查,阐明云南境外输入和云南本地基因型亚型的流行变化特征,比较云南境外输入和云南本地基因型亚型的流行变化特征,以及选择压力、分子传播网络和耐药相关突变的分析,对云南省HCV的监控和预防具有重要的意义,是促使我国实现世卫组织提出的2030年消除丙肝这一战略目标的重要一环。首先,共收集了2017-2019年境外输入云南HCV抗体阳性样本520例,其中52.1%的样本来自东南亚,少部分来自欧美、亚洲北部、南亚及非洲。本研究对E1区和NS5B区分别扩增并测序成功381例和455例,构建了系统发育进化树,根据建树结果进行基因分型,成功对511例样本进行分型。结果显示,3b亚型占比最大有25.24%(129/511),6n和1b分别占比15.66%(80/511)和11.55%(59/511),6xa占比8.61%(44/511),3a占比8.22%(42/511),1a占比7.44%(38/511),未分类的6亚型5.38%(28/511)以及混合感染4.31%(22/511)。2017-2019年三年间,GT3处于相对稳定增长的状态,2a、2b亚型占比相对较少,2a亚型先增后减并在2.19%-6.75%之间波动,1a亚型占比呈现下降趋势,1b亚型有一定上升趋势,6型和混合感染整体有所增长。对未分类的6型样本进行了近全长基因组的扩增,进行全长系统发育进化树分析显示,其中1例与已提交的序列KC844039、LC368421单独成簇,另外3例单独成簇,这几条序列与其他已分类的6亚型均无重组,序列间也无流行病学联系,计算遗传距离也显示符合新亚型命名的要求;因此将这两簇分别命名为6xk和6xl。对已分型的455例样本NS5B区进行耐药分析,结果显示,9.8%(50/455)的1b型患者发生了C316N/H的突变,0.4%(2/455)的1a型患者发生了C316Y/W的突变,均对达塞布韦产生抗性耐药;还有1例1b型和4例3b型患者中发生了S282T的突变,1例6xa患者发生了S282R的突变,一例3a型患者发生了S282T与V321G的联合突变,均对索磷布韦产生强烈的耐药性。其次,根据境外输入HCV样本数量,随机收集了2017-2019年云南地区HCV抗体阳性样本共500例,对E1区和NS5B区分别扩增并测序成功374例和371例,构建了系统发育进化树,根据建树结果进行基因分型,成功对445例样本进行分型。结果显示,3b亚型占比最大为39.8%(177/445),其次2a占17.5%(78/445),1b占12.6%(56/445),3a占12.6%(56/445),6n占9.7%(43/445)和6a占4.3%(19/445)。2017-2019年三年间,GT3占比一直位居第一,GT1有稳定下降的趋势,GT2先增后减呈现波动变化,GT6型和混合感染整体有所增长。对已分型的371例样本NS5B区进行耐药分析,13.2%(49/371)的1b型患者发生了C316N的突变,对达塞布韦产生抗性耐药,5例3b型患者中发现存在对索磷布韦具有很强的耐药性的S282T的突变,此外,在2a和3b亚型中还分别检测到1.1%(4/371)S289L和0.3%(1/371)V321A的突变,对索磷布韦产生抗性耐药。最后,本研究对2017-2019年云南本地与境外输入HCV基因型/亚型流行变化特征进行比较,结果显示2017-2019年间多个基因亚型流行率存在显著差异,发现1a、2a、6xa以及未分类6亚型的流行率存在极显著差异(p<0.001),3a、6n、6v、6xj亚型和混合感染的流行率存在显著差异(p<0.05);云南本地2a、3a、3b亚型占比在这三年一直比境外输入的高,相反,1a亚型和6型境外输入的占比较大,2b亚型仅在2017年境外输入人群中发现。对云南本地和境外输入HCV主要的