关键词： 复方中药   兔   皮肤   细菌性感染   创面修复  

摘要： 在兽医临床上,因争斗、车祸等因素导致的皮肤创面较为多见。创面修复受感染、舔舐、撕咬等多种因素的制约,均可造成创面的延迟修复,为兽医临床诊疗带来困难。现代医学治疗创面虽疗效确实,但存在成本高和安全性等问题。传统医学治疗创面历史悠久且经验丰富,安全性高,弥补了现代医学治疗创面时存在的问题。本试验通过研究外用复方中药制剂促进兔细菌性感染创面修复的作用及其机制,为兽医临床使用中药制剂治疗外科创面提供理论依据。本试验结合传统中兽医理论,以清热解毒、抑菌消炎药为主药,活血化瘀、祛腐生肌药为辅药作为组方原则,选用积雪草、蛇床子、血竭等组成中药组方膏剂。选用新西兰白兔,于背部使用外科手术器械建立缺损创面,然后滴加金黄色葡萄球菌菌液致创面感染,构建细菌性感染创面模型。感染模型建立后按照中药治疗组、创夫灵组、生理盐水组与空白组进行分组并分别用药物治疗,创夫灵为阳性用药组。通过观察治疗后感染创面与计算伤口愈合率、抑菌试验、外周血液血小板与白细胞数量、血清与创面肉芽组织中的蛋白含量、血清与创面肉芽组织中羟脯氨酸含量、血清IL-6等指标的影响及用药后创面组织的病理组织学观察,进一步探讨复方中药制剂促进创面修复的作用机制。结果表明:(1)复方中药制剂应用于创面:创面用药后,肉芽组织生长旺盛,创缘较平整,修复后瘢痕组织轻。用药后第7、14天,中药治疗组和创夫灵组的伤口愈合率与生理盐水组差异显著(P<0.05)。(2)复方中药制剂可减少渗血,提高白细胞吞噬作用,提高创面局部免疫功能:用药后第3、14天,中药治疗组和创夫灵组的外周血液血小板数量与生理盐水组差异显著(P<0.05)。用药后第7天,中药治疗组和创夫灵组的外周血液白细胞数量与生理盐水组差异显著(P<0.05)。(3)复方中药制剂可促进肉芽组织增生,加速成纤维细胞及胶原蛋白的合成:用药后第7天,中药治疗组的血清和创面肉芽组织蛋白、羟脯氨酸的含量与生理盐水组差异显著(P<0.05)。(4)HE染色显示,中药治疗组与创夫灵组的炎性细胞浸润程度随用药时间较生理盐水组减轻,创面修复后上皮生长完整,成纤维细胞与胶原纤维排列致密。(5)复方中药制剂可降低血清中IL-6含量,避免过度的炎症反应:用药后第7天,中药治疗组的血清IL-6含量与生理盐水组差异显著(P<0.05)。复方中药制剂可通过提高兔血清和创面肉芽组织中的蛋白与羟脯氨酸含量,降低血清IL-6含量等来加速细菌性感染创面修复,与创夫灵组对比,中药治疗组能够促进创面修复并显著减轻创面修复后瘢痕增生。

关键词： 蒽贝素,Embelin   多倍体癌细胞   耐药   白花酸藤果   抗癌药物筛选  

摘要： 【目的】细胞的多倍体化普遍存在于癌症的发生、发展中,被认为赋予了癌细胞多种药物抵抗的能力,是临床治疗的一个难题。我们选用在人类癌症中过表达活跃的MYC和BCL-2基因,结合胞质分裂抑制构建多倍体细胞模型,在此细胞模型上对上千种富有抗癌活性的中药提取物进行筛选,致力于选出对多倍体癌细胞特异性杀伤,但对二倍体细胞或人体正常多倍体细胞无毒性的药物,并分析研究其对多倍体细胞致死作用机制。【方法】1.选用MYC和BCL-2双过表达这种频繁见于人类癌症的基因型,构建稳定表达的同源细胞系,之后通过抑制胞质分裂创建多倍体细胞模型。2.在构建的多倍体和亲本二倍体细胞中进行高通量的筛选,得到能够只杀伤多倍体细胞,但对亲本二倍体细胞无明显毒性的中药提取物。3.对筛选出来的中药提取物进行生物活性鉴定。4.我们在多种基因型细胞中对筛选出来的药物进行毒性测试,并把该药物与多种结构相似、功能类似的化合物在模型细胞系中的进行多倍体选择性致死活性对比。5.对筛选出来的中药提取物的作用机制进行研究。【结果】Aurora B激酶抑制剂AZD1152作用后,与RPE-MYC细胞相比,Bcl-2的过表达使71.8%的多倍体RPE-MYC细胞存活下来,并且呈现出大核、双核或多核的多倍体表型。Bcl-2抑制剂YC137和BH3I-2能有效杀伤多倍体RPE-MYC细胞但对二倍体细胞无损伤。其中,YC137杀死了超过90%的多倍体细胞。在对各种细胞毒性药物和激酶抑制剂的毒性测试中只有钙蛋白酶抑制剂ALLN、雷帕霉素和PI3K抑制剂294002能优先杀死多倍体细胞,ALLN、雷帕霉素、294002对多倍体细胞的杀伤率分别为67.6%,39.4%,66.3%,其中294002对二倍体细胞的杀伤率达43.8%。所筛选出的活性药物蒽贝素（Embelin）在多次实验中对多倍体RPE-MYC细胞的抑制率为90.8%,但对二倍体细胞无明显毒性。与之相比,同为抗氧化剂的醌类化合物辅酶Q10和艾地苯醌对多倍体和二倍体细胞都没有杀伤力。在RPE-MYC、RPE-MYC和RPE-MYC等细胞系中无法复制Embelin在RPE-MYC细胞中对多倍体的特异性杀伤效果。Embelin没有在多倍体RPE-MYC细胞中诱导LC3和caspase-3蛋白的活化,也没有诱导细胞色素C从线粒体内膜释放到细胞质中。同为XIAP抑制剂的AZD5582和SM-164对多倍体RPE-MYC细胞有浓度依赖的细胞毒性,在所测试的最高浓度中,AZD5582杀死了80.3%的多倍体细胞,SM-164杀死了70.1%的多倍体细胞,并且它们对二倍体细胞都没有明显的杀伤性。对RPE-MYC细胞进行XIAP蛋白的RNA干扰试验后,多倍体细胞和二倍体细胞都没有观察到明显的死亡。【结论】本研究对临床癌症耐药的治疗创建了新的研究系统,筛选出了能特异性的杀伤多倍体癌细胞的中药提取物Embelin。Bcl-2的过度表达可保护二倍体细胞免受Embelin的细胞毒性影响,但对多倍体细胞无保护作用。Embelin通过非Bcl-2抑制途径对多倍体细胞选择性致死,其作用机制不是通过简单的抗氧化活性,也没有诱导经典的细胞凋亡和自噬,对XIAP蛋白的抑制可能是作用的关键,需要进一步研究。

关键词： 太赫兹   超材料   强耦合   生物传感   Aβ16-22多肽   环偶极子   地沟油   黄曲霉毒素B1  

摘要： 超材料具有能灵活调控电磁波以实现其它材料不具备的独特电磁特性,并且它在众多领域具有潜在的应用前景,受到了科研人员的广泛关注。超材料传感器通常是通过等离子体共振效应实现强局域场,以有效提高传感信号,实现对表面介电环境高敏感检测。超材料传感与传统传感相比具有响应快、灵敏度高、无标记、实时监测和测量简单等诸多优势。石墨烯是由sp杂化的碳原子组成的二维材料,能很好地吸附生物分子,在生物传感方面表现出非凡的潜力。本文基于强耦合的拉比分裂原理设计了一款金属-石墨烯杂化超材料,另外还利用环偶极子共振原理设计了两款超材料共振微结构,并分别对这两种共振机理进行研究。同时还使用标准光刻工艺制备出这三款超材料微结构,并结合太赫兹时域光谱系统作生物传感器件,分别检测了Aβ多肽、地沟油、黄曲霉毒素B1。文章具体研究内容如下:首先,我们结合模拟软件设计了一款由金属光栅与表面石墨烯组成的杂化超材料。该超材料在太赫兹波的激励下,表面的石墨烯能激发出表面等离子体共振,金属光栅能形成异常光学透射效应,这两种共振模式在石墨烯掺杂与金属光栅参数匹配时会发生强耦合,形成一种新的共振模式——拉比分裂。我们从实验上制备出了该杂化超材料,将其应用于Aβ多肽的聚集过程检测。不同聚集状态的Aβ多肽会引起该超材料表面的石墨烯掺杂状态的不同,进而引起石墨烯费米能的变化,这些变化会灵敏地反映在杂化超材料的拉比分裂透射谱上。我们利用分子动力学模拟,提出了π-π键堆叠来解释Aβ多肽聚集过程中石墨烯的费米能级的变化,并通过拉曼光谱验证了我们理论的正确性。其次,我们基于环偶极子共振原理,设计并制备了一款镜像对称的方形双开口环结构环偶极子超材料传感器,该传感器在1.436 THz处产生Q值为16.8的透射谐振谷。对谐振频率处结构表面电流分析表明,该结构能在抑制电偶极子和磁偶极子的同时迅速增强环偶极子。其作为生物传感器,在分析物厚度饱和时灵敏度高达348.8 GHz/RIU,可以灵敏感测表面介电环境微小变化。并从实验上测量了不同的油样,实验结果验证了其对标准食用油和劣质地沟油的良好分辨性,表明该器件在食品安全监测等方面潜在的应用前景。最后,我们同样基于环偶极子共振理论设计了一款镜像对称的双半圆环形高灵敏超材料传感器,其在1.33 THz处形成一个Q值高达26.6的尖锐透射谷。在饱和厚度分析物下折射率灵敏度高达337.5 GHz/RIU。实验中,我们利用该超材料器件检测出了不同浓度的黄曲霉毒素B1,表明其可以在太赫兹领域实现高灵敏的无标记检测,更加丰富了太赫兹超材料传感器件。

关键词： 黄曲霉毒素B1   亚硫酸氢钠   不同体系   延胡索   降解产物解析   延胡索品质  

摘要： 中药材在采收、加工、运输、贮藏过程中极易被黄曲霉菌污染,导致黄曲霉毒素B（Aflatoxin B,AFB）超标,成为制约中药材产业健康发展的共性与卡脖子难题,威胁着中药材的质量安全,更严重威胁着人类健康。亚硫酸氢钠（Sodium bisulfite,NaHSO）是一种弱碱性食品防腐剂,具有阻止微生物的生长和繁殖,有效降解农产品中的AFB的作用。本研究以水体系、甲醇-水体系、延胡索中药材基质中的AFB为研究对象,探明不同介质中NaHSO降解AFB的效果,解析NaHSO降解AFB产物结构特性并做了安全性评价,建立NaHSO降解延胡索中AFB的降解模型,并在酸枣仁、薏苡仁等中药材中进行了模型适用性验证试验,对处理前后延胡索品质进行了一系列研究。 1.使用液相色谱串联三重四极杆质谱联用（Liquid Chromatographic-triple Quadrupole Tandem Mass Spectrometry,LC-QQQ-MS）建立的AFB定量检测方法,对甲醇-水体系、水体系中AFB降解率进行测定。结果表明,NaHSO降解AFB悬浊液存在一定的不稳定性,相比之下,甲醇-水体系中NaHSO降解AFB效果相对稳定。 2.利用NaHSO降解甲醇水中的AFB,将NaHSO百分含量、时间、温度和AFB初始浓度作为影响因素,AFB降解率作为响应值,通过单因素试验和响应面试验来研究NaHSO降解AFB的最佳处理条件。单因素试验表明,NaHSO百分含量、时间和温度均对AFB降解有显著的影响,响应面分析试验优化得出的最佳AFB降解条件为NaHSO百分含量0.74%,处理时间36 h,处理温度为70℃,AFB初始浓度为50 ng/m L,在此条件下AFB降解率为99.72%。利用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱高分辨质谱联用仪（Ultra high performance liquid chromatography tandem quadrupole electrostatic field orbital trap mass spectrometry,UHPLC Q Exactive HF Orbitrap MS）推测降解产物的结构。试验结果表明,NaHSO降解AFB产物分子式为CHOS。NaHSO可使AFB结构中呋喃环C8、C9位置的双键发生加成反应,根据定量构效关系分析,初步判断出NaHSO降解AFB产物的毒性比AFB毒性小。 3.利用NaHSO降解延胡索中的AFB,将NaHSO百分含量、时间和温度作为影响因素,AFB降解率作为响应值,通过单因素试验和响应面试验来研究NaHSO降解延胡索中的AFB的最佳处理条件。试验结果表明三个因素均显著影响AFB降解率,响应面试验得出最佳降解条件为:NaHSO百分含量1.18%、处理时间4.10 h、处理温度53.80℃,在此条件下延胡索中的AFB降解率为93.56%。为了探究该模型在中药材中AFB去除方面的适用性,对中药材酸枣仁、薏苡仁进行模型验证结果表明,该模型不仅适用于延胡索这一种中药材中AFB的降解,同样可用于同具有祛湿作用的酸枣仁、薏苡仁中AFB的降解。 4.在最优降解延胡索中AFB的条件下,评价NaHSO处理前后延胡索品质变化,以验证NaHSO去除中药材延胡索中AFB方法的可适用性。研究表明,相较于未处理的延胡索,NaHSO处理使延胡索中总灰分、醇溶出物、盐酸小檗碱含量分别增加至3.40%、23.73%、0.07%,原阿片碱、盐酸黄连碱、延胡索甲素、延胡索乙素含量分别降低至0.02%、0.10%、0.30%和0.73%,延胡索挥发性风味物质从42种减少到29种,处理后的延胡索酸类、烷烃类、酯类含量增加,吡嗪类、酚类、酮类、醇类挥发性物质含量降低。其中,NaHSO处理后的延胡索总灰分、醇溶出物和延胡索乙素含量均满足《中国药典》（2020版）要求。

关键词： 中药   药品不良反应   中药注射剂   安全用药  

摘要： 中药是中华民族几千年来的传统用药,为全人类的身体健康和生命安全做出了突出贡献。然而随着中药制剂的蓬勃发展,导致的不良反应也逐渐增多,愈发引起人们的关注。本文通过对近五年焦作市中药制剂不良反应报告进行分析,讨论不良反应监测基本情况和相关特点,发现存在的问题,提出合理化建议,以期提高药品不良反应监测水平,为中药制剂临床合理用药提供参考。本文提取了2017—2021年焦作市药品不良反应监测中心收集的2669例中药制剂不良反应报告,对相关的患者信息、用药信息、报告类型、累及器官/系统,以及报告来源等情况进行回顾性分析、讨论。选择报告数较多的中药注射剂,重点分析不良反应发生特点和主要表现,深入探讨中药注射剂不良反应的针对性预防措施以及处理方法。2017至2021年焦作市中药制剂不良反应报告数基本呈逐年上升趋势,五年共收集报告2669例,占全部药品不良反应报告的16.4%,其中新的报告比例达到37.4%,明显高于全部药品。患者男女比例约为1:1.2,年龄以40岁以上中老年为主,占比将近73%。患者既往不良反应、家族不良反应和相关重要信息为“不详”的比例较高,分别为32.3%,60.2%和83.2%。不良反应累及器官/系统中,消化系统、皮肤及其附件、全身性反应排在前三位,主要表现为恶心、呕吐,皮疹、瘙痒。中药制剂不良反应涉及的药物种类以清热剂和理血剂为主,合计达53%。涉及的药物剂型前三位分别是注射剂(包括注射液和粉针剂)、胶囊剂和片剂,占比36.1%,18.6%,15.7%,相应的给药途径以口服给药和静脉滴注为主,合计占比94.5%。报告来源上,医疗机构占比达到约90%,而生产企业只有3%。报告人职业中,医生占比最高,达到67%,药师约20%,而专职ADR监测员只有约1.3%。地区分布上,县域中药制剂不良反应多于市区。中药注射剂不良反应共984例,占全部中药制剂的36.9%,其中严重报告162例,占所有中药制剂严重不良反应的84.4%。主要表现为过敏性休克、全身性反应、呼吸抑制等,有的甚至危及生命。中药注射剂不良反应报告数排在前三位的分别是清开灵注射液,117例;刺五加注射液,91例;注射用血塞通(冻干),88例。引发不良反应/事件的主要原因有药物成分、注射剂的质量、联合用药和使用剂量等。国家药品监督管理局在2018年分别要求对以上中药注射剂的说明书进行修改,增加警示内容,明确使用要求和相关风险点,为临床更加合理、安全用药提供指南。通过分析焦作市中药制剂不良反应监测情况,发现存在监测制度不够完善、不良反应报告不够规范、监测能力有待加强等不足,建议进一步完善相关制度,调动制药企业参与中药制剂上市后再评价研究的积极性。提高不良反应报告质量,使报告内容更加真实、准确、完整,并及时报告。通过不良反应监测,指导临床中药制剂的合理用药,尤其针对重点品种、重点人群和严重不良反应要引起重视,严格按照说明书要求用药,注意监测、报告药品不良反应,及时采取相应措施处理。还要加强宣传和培训工作,从而保障群众用药安全,推动基层不良反应监测水平进一步提高。

关键词： 溃疡性结肠炎   中药制剂   白细胞介素   肠道菌群   免疫球蛋白  

摘要： 随着世界各国人民生活水平的提高,溃疡性结肠炎在人和宠物身上的发病率与死亡率也随之提高,已经被世界卫生组织列为一项重要的公共卫生问题。以往治疗该病的手段主要集中在一下几种:药物治疗、手术切除、营养制剂和生物制剂。但由于溃疡性结肠炎病因的不明确性,症状的复杂多变性,以上治疗手段皆会对患者造成一定的负面影响,严重时会引起其他的并发症,因此越来越多的人开始探寻中药制剂治疗溃疡性结肠炎的新方法。中药制剂治疗病因复杂的疾病具有独特的疗效,其副作用可控、疗效经过千百年的验证,多味药材相组合可以减弱药物毒性的同时,增强君药对疾病的治疗效果。本试验以中兽医理论为基础,研究多种药材相组合对溃疡性结肠炎模型小鼠的治疗效果,力求筛选出效果较好的药味组合,为研究治疗溃疡性结肠炎特效药方作出贡献。试验一:遵循药物配伍禁忌拟定3个中药组方。为了探寻清肠调血组方、健脾祛湿组方、调肝理脾组方对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果。试验将雌性C57BL/6小鼠(6～8周龄,18～20 g)66只,随机分成11组,每组6只。空白对照组(K组)、模型组(S组)、清肠高剂量组(A组)、清肠中剂量组(B组)、清肠低剂量组(C组)、健脾高剂量组(D组)、健脾中剂量组(E组)、健脾低剂量组(F组)、调肝高剂量组(G组)、调肝中剂量组(H组)、调肝低剂量组(I组)。第一周各组适应性饲养,第二周除空白对照组外,每组3%葡聚糖硫酸钠水溶液自由饮水持续7d,建立急性溃疡性结肠炎模型,第三周更换正常饮水,空白对照组和模型组生理盐水灌胃,药物组分别给予不同浓度灌胃,观察记录小鼠临床表现,采集全血分离血清,检测血清中免疫球蛋白G(Ig G),免疫球蛋白A(Ig A),白细胞介素-8(IL-8),白细胞介素-10(IL-10),二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO),D-乳酸的质量浓度变化,同时制作小鼠结肠病理切片。结果表明:模型组相较于空白对照组中D-乳酸、白细胞介素-8(IL-8)、免疫球蛋白G(Ig G)、免疫球蛋白A(Ig A)、二胺氧化酶(DAO)的质量浓度极显著增高(P<0.01),白细胞介素-10(IL-10)质量浓度极显著降低(P<0.01),给药后清肠调血组方、健脾祛湿组方、调肝理脾组方9组小鼠均有不同程度的炎症缓解,D-乳酸、IL-8、Ig G、Ig A、DAO质量浓度均有不同程度下降,IL-10质量浓度上升。说明清肠调血组方、健脾祛湿组方、调肝理脾组方对DSS诱导的溃疡性结肠炎有良好的治疗作用。试验二:探寻拟定的3个中药组方对溃疡性结肠炎小鼠肠道内微生物群落的影响。溃疡性结肠炎的发生往往伴随着结肠肠道菌群丰度和结构的改变,因此利用16Sr RNA扩增子测序技术对小鼠结肠内容物中菌群的分布进行分析。结果表明:经过3个中药组方制剂的干预后,溃疡性结肠炎模型小鼠结肠菌群结构得到恢复,可增加部分有益菌如Patescibacteria(P<0.05)、Muribaculaceae(P<0.05)、Lactobacillus(P<0.05)、Prevotellaceae UCG001(P<0.05)的丰度,减少部分有害菌如Verrucomicrobiota(P<0.05)、Desulfobacterota(P<0.05)、Lachnospiraceae NK4A136group(P<0.05)、Campilobacterota(P<0.05)、Actinobacteriota(P<0.05)、Bacteroidaceae(P<0.05)、Tannerellaceae(P<0.05)的丰度。

关键词： 聚集诱导发光材料   功能化水凝胶   双功能纳米粒子   免疫层析  

摘要： 食品中危害物质的快速检测对预防食源性疾病和保障食品安全具有重要意义。荧光传感检测相较于传统检测方法具有灵敏度高、信号响应迅速以及选择性好等优势。聚集诱导发光材料(Aggregation-induced emission luminogens,AIEgens)由于具有易于修饰、在聚集态荧光效率高等特性已被广泛应用于传感检测、生物成像、生物医药和公共安全领域。特别是AIEgens具有荧光背景低、斯托克斯位移大和光学稳定性好等优点使其在农兽药残留、重金属离子检测中得到广泛应用。本研究利用AIE材料优异的光物理性能制备了AIEgens琼脂糖水凝胶(TPE-RB-functionalized hydrogel,TR-FC hydrogel)和等离子体-荧光双功能纳米粒子(Au-AIE Nanoparticles,Au-AIENPs)两种功能化材料。首先,利用琼脂糖水凝胶丰富的氢键和交联的纤维网络促进了水凝胶与周围环境物质的交换,从而提升了AIEgens与目标物的反应效率,同时水凝胶密闭的空间又为AIEgens提供了物理支撑,达到了抵抗外界环境因素干扰的效果;其次,通过微乳液法,利用相分离原理制备了Au-AIE双功能材料,实现了油胺金纳米粒子(oleylamine coated gold nanoparticles,OA-Au NPs)和AIEgens在空间上的两相分离,从而有效地避免了Au NPs组分对AIEgens荧光特性的干扰,制备了荧光、比色性能双优的多功能检测探针,利用该探针制备的免疫层析试纸条可根据不同应用场景灵活选择读取模式,并且两种信号可相互佐证,有效地提高了检测的准确性。首先,使用AIEgens(TPE-RB)结合琼脂糖水凝胶制备TR-FC hydrogel探针,建立了高灵敏检测水环境中Hg的快速检测方法。水凝胶中的纤维结构不仅可以作为AIEgens的固定网络促进其聚集发光,同时也可以通过构建内部亲水空间,提高亲水性待测物与疏水染料分子的反应效率。该方法在Hg浓度介于0.195μM～12.5μM时表现出良好的线性关系,且满足回归方程y=0.9484ln(x)+2.3237(R=0.9918)。该方法检测Hg的检出限(Limit of detection,LOD)为0.152μM,灵敏度相较于游离的TPE-RB探针提高了4倍,且TR-FC hydrogel探针与水体中其他常见金属离子无交叉反应,对Hg检测具有较好的特异性。该方法检测污水中Hg的平均回收率为82.54%～109.59%,变异系数(Coefficient of variation,CV)为2.51%～12.17%,表明具有可接受的回收率和精密度。其次,通过微乳液法将OA-AuNPs和AIEgens(TPETPAFN)共组装制备出具有“Janus”结构的等离子体-荧光双功能的Au-AIENPs,其中AIEgens优先聚集形成荧光核,OA-Au NPs分布在PMAO中形成半月牙形的等离子体壳。OA-Au NPs和AIEgens组分在纳米粒子中表现出良好的空间分离状态,实现了比色和荧光信号之间的平衡,并减少了信号间的相互干扰。通过以Au-AIENPs为探针构建了比率型荧光免疫层析方法(Au-AIENPs-RFLFIA),实现了玉米样本中AFB裸眼定性以及仪器荧光定量双模式检测。该方法检测玉米基质中AFB的定量范围为0.01～5 ng/m L,四参数拟合方程为y=3.55-3.32/(1+(x/2.09)^0.83)(R=0.9967),定量检出限(quantitative Limit of Detection,q LOD)和可视化检出限(visual Limit of Detection,v LOD)分别为0.0076 ng/m L和0.02 ng/m L。进一步,我们将Au-AIENPs-RFLFIA与传统非比率型比色-荧光试纸条(Au-AIENPs-CFLFIA)进行裸眼检测性能的比较,同时与AIENPs-RFLFIA进行定量检测性能的比较。结果显示,与传统Au-AIENPs-CFLFIA相比,Au-AIENPs-RFLFIA试纸条T线荧光随着AFB浓度的增加呈现由红色到橙色再到绿色的色相变化规律,其v LOD值比传统Au-AIENPs-CFLFIA显著提高62倍;与AIENPs-RFLFIA相比,该方法的定量检测范围拓宽了2倍,检测灵敏度提高1.92倍。此外,Au-AIENPs-RFLFIA试纸条对4种常见的霉菌毒素无明显交叉反应,平均加标回收率为95.72%～102.2%,CV为8.75%～12.56%,说明Au-AIENPs-RFLFIA试纸条定量检测玉米基质中AFB具有良好的特异性和精密度。

关键词： 小儿手足口病   热毒宁注射液   中药制剂   网状Meta分析  

摘要： 目的:系统评价热毒宁注射液联合西药治疗组、喜炎平注射液联合西药治疗组、小儿豉翘清热颗粒联合西药治疗组、痰热清注射液联合西药治疗组、炎琥宁注射液联合西药治疗组、蒲地蓝口服液联合西药治疗组、蓝芩口服液联合西药治疗组及甘露消毒丹联合西药治疗组八种中药制剂联合西药对比西药的有效性和安全性，并通过网状Meta分析对其治疗小儿手足口病的功效优劣对比排序，为临床医生治疗小儿手足口病提供参考依据。　　方法:利用中国学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库(WanfangData)、维普数据库(VIP)、中国生物医学文献服务系统数据库(SinoMed)、中国科学引文数据库(CSCD)、CochraneLibrary、WebofScience及PubMed等中英文数据库进行检索，筛选到2023.01.31公布的临床研究，收集喜炎平注射液联合西药、热毒宁注射液联合西药、小儿豉翘清热颗粒联合西药、痰热清注射液联合西药、炎琥宁注射液联合西药、蒲地蓝口服液联合西药、蓝芩口服液联合西药、甘露消毒丹联合西药的任意一种方案治疗儿童手足口病的随机对照试验，结局指标以临床有效率及不良反应发生率为主要结局指标，次要结局指标为退热时间、皮疹消退的时间、口腔疱疹的消退时间、入院时间等，运用Stata16进行直接Meta分析，然后用ADDIS1.6.6软件对八种中药制剂与西药联合治疗组和西药组进行网状Meta分析。　　结果:共纳入195项临床研究，23532例受试者，直接Meta分析结果显示在提高临床总有效率，降低退热时间，减少皮疹、口腔疱疹消退时间和缩短住院时间等疗效指标上，中药制剂联合西药治疗较单纯常规西药治疗更有优势，间接比较的网状Meta分析结果提示不同中药制剂联合西药的功效优劣排序为:①总有效率方面:热毒宁注射液联合西药＞炎琥宁注射液联合西药＞痰热清注射液联合西药＞喜炎平注射液联合西药＞蒲地蓝消炎口服液联合西药＞蓝芩口服液联合西药＞小儿豉翘清热颗粒联合西药＞甘露消毒丹联合西药＞西药;②缩短退热时间方面:热毒宁注射液联合西药＞喜炎平注射液联合西药＞小儿豉翘清热颗粒联合西药＞痰热清注射液联合西药＞蓝芩口服液联合西药＞蒲地蓝消炎口服液联合西药＞炎琥宁注射液联合西药＞甘露消毒丹联合西药＞西药;③缩短口腔疱疹消退时间方面:蓝芩口服液联合西药＞小儿豉翘清热颗粒联合西药＞热毒宁注射液联合西药＞痰热清注射液联合西药＞喜炎平注射液联合西药＞蒲地蓝消炎口服液联合西药＞炎琥宁注射液联合西药＞甘露消毒丹联合西药＞西药;④缩短皮疹消退时间方面:喜炎平注射液联合西药＞蓝芩口服液联合西药＞热毒宁注射液联合西药＞蒲地蓝消炎口服液联合西药＞小儿豉翘清热颗粒联合西药＞痰热清注射液联合西药＞炎琥宁注射液联合西药＞甘露消毒丹联合西药＞西药;⑤缩短住院时间方面:喜炎平注射液联合西药＞热毒宁注射液联合西药＞炎琥宁注射液联合西药＞蓝芩口服液联合西药＞小儿豉翘清热颗粒联合西药＞痰热清注射液联合西药＞西药。　　不良反应发生率的比较中，小儿豉翘清热颗粒联合西药组及炎琥宁注射液联合西药组分别低于西药组，其比较存在统计学意义OR=0.39，95％CI(0.16，0.91)、OR=0.47,95％CI(0.27，0.82)，其他组间比较没有统计学意义。　　结论:在提高临床总有效率，降低退热时间，减少皮疹、口腔疱疹消退时间，缩短住院时间等疗效指标上中药制剂联合西药治疗小儿手足口病较单纯常规西药治疗更有优势。运用直接Meta分析和网状Meta分析，根据整合的随机对照实验直接证据和间接证据的结果，可进一步得出热毒宁注射剂联合西药的疗效最显著，可为临床用药首选方案。口服液方面，小儿豉翘清热颗粒、蒲地蓝消炎口服液及蓝芩口服液疗效较显著。

关键词： 霉菌毒素   AFB1   吸附剂   血清生化指标  

摘要： 黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是常见的霉菌毒素之一,是由黄曲霉、寄生曲霉和假溜曲霉产生的二级代谢产物。AFB1的毒性主要体现在肝肾毒性,食用含有AFB1的食物和饲料,不但会降低饲料的营养价值,还会诱发肿瘤和癌症,抑制免疫系统活性,继而引发营养代谢性和中毒性疾病,严重者还会流产甚至死亡,为养殖业带来巨大经济损失。吸附剂法是目前最为广泛使用的AFB1脱毒方法之一,可以通过减少次生代谢产物的产生而最大程度的保留饲料中原有的营养成分。但是市场霉菌毒素吸附剂种类繁多,质量参差不齐,行业内也没有统一的评价标准。本研究旨在采用体内体外相结合的方法对市场上常见的多种霉菌毒素吸附剂进行吸附效果评价,根据体外不同环境下的吸附特性以及细胞中对AFB1所致细胞毒性的保护作用筛选出吸附能力较好的吸附剂,最后对小鼠进行体内试验,探究吸附剂对AFB1致动物机体损伤的保护作用。本研究结果如下:1.吉林省饲料样本AFB1污染情况调查本研究对2021-2022年间吉林省9个地级市32个中小型养殖场收集饲料样本283份,其中AFB1检出阳性样本263份,检出率为92.93%;玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)和脱氧雪镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)分别检出阳性样本238份和247份,检出率分别为84.1%和87.28%;伏马毒素B1(Fumonisin B1,FB1)和镰刀菌属(T-2 toxin,T-2)分别检出阳性样本205份和209份,检出率分别为72.44%和73.85%;AFB1超标样本53份,超标率为18.53%;ZEN和DON的超标样本分别为36份和34份,超标率分别为12.72%和12.01%;FB1和T-2毒素超标样本分别为29份和28份,超标率分别为10.25%和9.89%。吉林省地区霉菌毒素检出率普遍偏高,其中AFB1检出率与超标率最为严重。2.不同霉菌毒素吸附剂对AFB1的体外吸附效果评价体外吸附试验结果发现:蒙脱石与活性炭的吸附性能最好,酸碱耐受性强,吸附性质较为稳定;细胞试验中将蒙脱石与多种生物吸附剂1:1配比后发现其与吸附剂E配比对AFB1致BRL-3A细胞损伤的保护效果最好,可有效降低细胞LDH释放水平。3.吸附剂对AFB1致动物机体损伤的保护作用本试验通过建立体外小鼠模型,测定空白组、溶剂对照组、AFB1组、AFB1+吸附剂组、吸附剂组小鼠的生长性能与血液生化指标,并制作病理切片,结果表明吸附剂可以有效抑制AFB1导致的ALT、AST和AKP活力上升,维持体内T-GSH含量与GSH-PX活力,缓解AFB1致小鼠的肝脏损伤。以上结果表明,吉林省地区饲料样本AFB1检出率与超标率最为严重,筛选出的吸附剂蒙脱石与吸附剂E可以有效吸附AFB1并抑制其细胞毒性,对小鼠进行体内试验,可以有效抑制AFB1导致的小鼠肝脏损伤。本研究为市场上吸附剂的选择提供一定的科学理论依据,并为预防动物生产中的AFB1中毒提供一定参考思路。