关键词： 暗纹东方鲀   肠上皮细胞   皮质醇   氧化应激   细胞凋亡   脂代谢  

摘要： 应激反应对暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)养殖业危害极大,而皮质醇(cortisol)是判断鱼类应激反应的重要标志物。肠道是鱼体与外界环境接触的媒介,肠道生理状态能反映鱼体的应激水平,但目前肠道在鱼类响应应激反应中的作用不详。本研究以暗纹东方鲀肠上皮细胞为对象,分别采用胰蛋白酶和DMEM培养基、胰蛋白酶和1640培养基、Ⅰ型胶原酶和DMEM培养基、Ⅰ型胶原酶和1640培养基4种方法对其进行原代培养,旨在建立暗纹东方鲀原代肠上皮细胞体外培养方法,并在此基础上探讨皮质醇对暗纹东方鲀肠上皮细胞氧化应激、细胞凋亡和脂代谢的影响。利用CCK-8法检测肠上皮细胞活力,透射电镜观察皮质醇处理后细胞内线粒体的形态结构,荧光定量PCR(qRT-PCR)检测氧化应激相关基因、细胞凋亡相关基因及脂代谢相关基因在肠上皮细胞内的表达模式,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡等。结果显示,在4种培养方法中,采用胰蛋白酶消化和DMEM培养基进行培养的肠上皮细胞增殖率最高,贴壁情况最佳;与对照组相比,当皮质醇浓度高于2000 nmol/L时,肠上皮细胞活力显著下降(P<0.05);透射电镜显示,所有皮质醇处理组肠上皮细胞内线粒体结构发生改变,线粒体数量增加;随皮质醇处理浓度的升高,肠上皮细胞内氧化应激相关基因(sod、cat和gsh-px)及促凋亡基因(caspase-3、caspase-7、caspase-9、bax和p53)表达量和凋亡指数均显著上升,抗凋亡基因bcl-2表达量显著下降(P<0.05);脂肪合成相关基因(g6pd、6gpd、pparγ、fas和acc)表达量显著下降,脂肪分解相关基因(hsl、pparα、lpl和cpt-1)表达量显著上升(P<0.05);甘油三酯和总胆固醇含量显著下降,游离脂肪酸含量显著上升(P<0.05)。结果表明,皮质醇能够促进暗纹东方鲀肠上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡,同时促进脂肪的分解并抑制脂肪的合成。本研究以期为暗纹东方鲀抗应激养殖提供一定的参考资料。

关键词： 网络药理学   益气甘露方   糖尿病  

摘要： 目的基于网络药理学方法筛选益气甘露方的有效成分、作用靶点及信号转导通路,探讨益气甘露方治疗糖尿病的潜在作用机制。方法筛选益气甘露方潜在活性成分及其对应靶点,应用Cytoscape 3.9.1软件对成分和靶点进行网络构建与分析。在GeneCards、TTD等数据库中筛选糖尿病相关靶点,取药物有效成分靶点与疾病靶点交集,在Metascape数据库中进行基因注释的GO分析和信号通路的KEGG富集分析。结果通过筛选得到益气甘露方活性成分(口服生物利用度(OB)≥30%且类药性(DL)≥0.18)157项,药物与疾病共同靶点247项,有效成分主要为槲皮素、山柰酚、7-O-甲基异木豆醇等,主要调节的通路为脂质与动脉粥样硬化信号通路,除此之外,还有PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等。结论益气甘露方可能是通过调控脂质与动脉粥样硬化信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等调节血糖代谢。

关键词： 高血压   糖尿病,2型   血脂异常   慢性病共病   “三高”防治   初级卫生保健   专家共识  

摘要： 高血压、2型糖尿病、血脂异常被统称为“三高”,常同时存在于同一个体中,显著增加了患者的住院和死亡风险,以及相关疾病负担。因此,有必要对三者进行共同风险管理和规范治疗。基层医疗卫生机构是慢性病防治的“主战场”,现有临床证据对“三高”人群的基层预防、治疗及管理具有重要启示,但目前国内外尚无适用于基层的“三高”共管规范、共识和指南。北京高血压防治协会等4家学/协会组织基层医务人员,并邀请心血管、内分泌、药学及公共卫生等诸多领域专家/学者共同参与,广泛征询基层医务人员临床实践需求,在整合与评价“三高”基层防治相关证据的基础上,经过多轮讨论、修订与投票表决,形成了包含21条推荐意见的“三高”基层防治专家共识。本共识的推荐意见旨在提高基层医务人员的“三高”防治意识和能力,为基层医疗卫生机构开展“三高”防治提供科学的策略支持,为实施具有基层特色的“三高”共管奠定坚实基础。

关键词： 衰弱   口腔衰弱   患病率   老年人   口腔衰弱指数-8   Meta分析  

摘要： 背景人口老龄化加剧,老年人健康备受关注;口腔衰弱作为老年人衰弱的新表型,其患病率直接关系到老年人生活质量。全面了解老年人口腔衰弱现状,对于制订有效的预防和干预措施具有重要意义。目的系统评价老年人口腔衰弱的患病率。方法计算机检索中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台(Wanfang Data)、维普网(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、Web of Science、Embase、CINAHL及Cochrane Library数据库中老年人口腔衰弱患病率的相关研究,检索时限为建库至2024-04-19。由2名研究者独立对文献进行筛选、信息提取及质量评价,采用Stata 14.0软件对纳入文献进行Meta分析。结果共纳入19篇横断面研究,总样本量为11776例,偏倚风险质量评分为6~9分,均为中等或高质量。Meta分析结果显示,老年人口腔衰弱的总患病率为29.5%(95%CI=24.1%~35.2%),口腔衰弱前期总患病率为47.9%(95%CI=40.5%~55.4%)。亚组分析结果显示,老年人口腔衰弱患病率随年龄增长递增,使用口腔衰弱指数-8筛查的老年人口腔衰弱患病率更高(P<0.05)。结论老年人口腔衰弱总患病率较高,应重点关注我国高龄老年人的口腔健康状况,选择适宜的筛查评估工具并尽早采取干预措施。

关键词： 地塞米松   玻璃体内注射   黄斑水肿   糖尿病视网膜病变   体层摄影术,光学相干   治疗结果  

摘要： 目的观察玻璃体内注射Ozurdex对不同光相干断层扫描(OCT)分型的难治性糖尿病黄斑水肿(diabetic macular edema,DME)患者的治疗效果。方法选择2018年6月—2020年6月于本院眼科行眼底检查并确诊为难治性DME患者38例(41眼),根据不同OCT特征分为弥漫性黄斑水肿型(DRT)组、囊样黄斑水肿型(CME)组和浆液性视网膜脱离型(SRD)组,对所有患眼按需行玻璃体腔内注射Ozurdex治疗,并在治疗前及治疗后第1、3、6个月行最佳矫正视力(BCVA)检查和OCT检测。对比三组患者治疗前后患眼BCVA、黄斑中央厚度(CFT)及外界膜(ELM)完整性、椭圆体带完整性及高反射灶(HRDs)数量。结果治疗后第1、3、6个月,三组患者BCVA较治疗前均显著提高(F组内=15.334~42.187,P<0.05);DRT、CME组治疗后第3个月CFT较治疗后第1个月显著降低(F组内=4.009、7.946,P<0.05),三组患者治疗后第3个月CFT均显著低于治疗后第6个月(F组内=5.591~12.498,P<0.05)。治疗后第1、3、6个月,三组患者间△BCVA、△CFT相比均有显著差异(F组间=7.020~20.553,P<0.05),其中SRD组改善最明显,其次为CME组,DRT组改善最小。三组患眼各时间点HRDs数量分段患眼构成比相比无明显差异(P>0.05);每组患眼治疗后第1、3、6个月HRDs数量分段患眼构成比与治疗前相比均有显著差异(H=23.645~39.117,P<0.001)。所有患眼治疗后第6个月ELM及椭圆体带完整的患眼数量较治疗前增加(χ^(2)=15.814、8.264,P<0.05)。结论Ozurdex可持续缓解不同OCT分型难治性DME患者黄斑水肿,明显改善其视功能,减少炎症物质产生,其中对SRD患者的改善尤为明显。

关键词： 菟丝子   骨关节炎   芝麻素   核因子κB信号通路   环氧合酶2   网络药理学   分子对接   炎症反应  

摘要： 背景:菟丝子具有补肝肾、益精髓的功效,而骨关节炎的主要病机为肝肾亏虚,推测菟丝子与骨关节炎之间有一定的联系。目的:基于网络药理学和分子对接的分析手段挖掘骨关节炎和菟丝子之间的潜在联系,对中药本草菟丝子的作用机制进行合理的推测与验证。方法:先在中草药数据库TCMSP中筛选菟丝子的有效活性成分和作用靶点,另在疾病数据库GeneCards、OMIM、TTD中收集骨关节炎的相关基因;取交集后进行一系列分析,并筛选出核心基因;通过对核心基因的富集分析选择菟丝子作用于骨关节炎的通路,通过分子对接验证核心基因的作用,并依此选择合适的有效活性成分进行实验验证。结果与结论:①筛选出11种菟丝子的有效活性成分,菟丝子和骨关节炎有66个交集靶点基因,后续筛选出12个核心基因,包括肿瘤坏死因子、白细胞介素1B、TP53、RACα丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、血管内皮生长因子A、基质金属蛋白酶9、前列腺素过氧合酶2、胱天蛋白酶3、表皮生长因子、过氧化物酶体增生激活受体γ、白细胞介素10、血管细胞黏附因子1;②对核心基因进行富集分析后,选择经典炎症通路核因子κB信号通路进行后续菟丝子缓解骨关节炎炎症的分析验证;根据各活性成分和通路核心基因前列腺素过氧合酶2进行分子对接后得到的结果,选择亲和力最高的芝麻素进行后续细胞实验验证,结果证实了菟丝子的有效成分芝麻素可以通过抑制白细胞介素1β诱导的核因子κB信号通路降低环氧合酶2的表达;③结果表明,菟丝子的活性有效成分芝麻素通过抑制白细胞介素1β诱导的核因子κB信号通路降低环氧合酶2的表达,达到改善骨关节炎炎症的作用,证实了菟丝子在骨关节炎方面的治疗效果。

关键词： 糖尿病肾病   TRPC阳离子通道   线粒体自噬   肾炎,间质性   疾病模型,动物   小鼠,近交C57BL  

摘要： 目的探讨瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)对糖尿病肾病(diabetickidneydisease,DKD)小鼠肾小管间质炎症的影响及其机制。方法将6周龄雄性C57BL/6J小鼠36只随机分为6组,每组6只。对照组(A组)和DKD组(B组)分别腹腔注射0.1mmol/L柠檬酸盐缓冲液和10g/L链脲佐菌素(后简称给药);DKD+生理盐水干预组(C组)和DKD+线粒体自噬激活剂干预组(D组)在B组基础上分别灌胃生理盐水和10mmol/L尿石素A;DKD+阴性对照慢病毒转染组(E组)和DKD+TRPC6敲降慢病毒转染组(F组)在B组基础上分别尾静脉注射阴性对照慢病毒和TRPC6敲降慢病毒。测定各组小鼠给药后第12周时的全血空腹血糖(FBG)水平、尿微量白蛋白肌酐比(ACR)和血尿素氮(BUN)水平,PAS染色观察小鼠肾小管损伤情况并进行评分,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测小鼠肾组织中炎性因子(IL-1β、MCP-1、TNF-α)mRNA水平,免疫组织化学染色观察小鼠肾组织中TRPC6蛋白表达水平,蛋白免疫印迹检测小鼠肾组织中TRPC6、LC3B、P62、PINK1、Parkin相对表达量,透射电镜观察小鼠肾小管细胞中线粒体自噬体数量变化。将HK-2细胞分为高糖+TRPC6siRNA+DMSO干预组(G组,TRPC6siRNA转染+35.0mmol/L葡萄糖+0.06%DMSO)和高糖+TRPC6siRNA+线粒体自噬抑制剂干预组(H组,TRPC6siRNA转染+35.0mmol/L葡萄糖+12μmol/L千层纸素A),RT-qPCR技术检测细胞中炎性因子(IL-1β、MCP-1、TNF-α)mRNA的水平。结果给药后第12周时,B组小鼠全血FBG水平、ACR、BUN水平、肾小管损伤评分、肾组织炎性因子mRNA水平及TRPC6、P62蛋白表达水平均显著高于A组(t=2.77~13.61,P<0.05),肾组织LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ及PINK1、Parkin蛋白表达水平显著低于A组(t=3.33~14.63,P<0.05),肾小管细胞中线粒体自噬体数量减少;D组小鼠ACR、BUN水平、肾小管损伤评分、肾组织炎性因子mRNA水平及P62蛋白表达水平显著低于C组(t=2.40~23.50,P<0.05),肾组织LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ及PINK1、Parkin蛋白表达水平显著高于C组(t=5.74~12.50,P<0.05),肾小管细胞中线粒体自噬体数量增多;F组小鼠ACR、BUN水平、肾小管损伤评分、肾组织炎性因子mRNA水平及TRPC6、P62蛋白表达水平均显著低于E组(t=2.45~7.09,P<0.05),肾组织LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ及PINK1、Parkin蛋白表达水平显著高于E组(t=7.91~13.18,P<0.05),肾小管细胞中线粒体自噬体数量增多;H组细胞的炎性因子mRNA水平显著高于G组(t=5.40~7.27,P<0.05)。结论TRPC6可通过上调自身表达,抑制肾小管细胞线粒体自噬,从而加重DKD小鼠的肾小管间质炎症。TRPC6抑制药物有希望用于DKD治疗。

关键词： 脑性瘫痪   舒筋健脑方   细胞凋亡   缺血缺氧脑损伤   大鼠  

摘要： 背景:围产期缺血缺氧性脑损伤是脑性瘫痪发生的最常见原因之一。舒筋健脑方是北京中医药大学东直门医院骨科治疗脑瘫、改善脑部供血的经验方剂。目的:探讨舒筋健脑方改善脑性瘫痪缺血缺氧的作用机制。方法:采用64只新生7 d龄SD大鼠,随机分为6组,对照组、模型组各12只,米诺环素组、舒筋健脑方低、中、高剂量组各10只。除对照组外,其余各组建立新生大鼠缺血缺氧脑瘫模型。造模成功后的药物组大鼠分别进行米诺环素、舒筋健脑方各剂量[4,8,16 g/(kg·d)]灌胃,每日1次,持续1周。给药前后测量各组大鼠的体质量,检测行为学变化,苏木精-伊红染色观察大鼠脑组织海马CA1区组织形态,免疫组化和Western Blot检测大鼠脑组织Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平。结果与结论:①体质量:与模型组比较,舒筋健脑方中、高剂量组大鼠体质量得到显著增加(P<0.05);②行为学:与模型组比较,米诺环素组大鼠有效延长了悬吊时间(P<0.05),舒筋健脑方中、高剂量组大鼠有效延长了悬吊时间、缩短了倾斜板实验时间、提升了Longa评分(P<0.05);③组织形态:药物组大鼠脑组织仅少量神经细胞坏死形成,细胞排列较整齐,细胞结构较为完整,只部分细胞核变小;④免疫组化和Western Blot结果:与模型组比较,米诺环素组、舒筋健脑方中、高剂量组Bax和Caspase-3的表达减少(P<0.05),舒筋健脑方中、高剂量组Bcl-2表达增加(P<0.05),米诺环素组、舒筋健脑方各剂量组Bcl-2/Bax蛋白表达增加(P<0.05),蛋白表达量随舒筋健脑方的剂量增加而增加,且舒筋健脑方高剂量组与米诺环素组作用差异无显著性意义(P>0.05);⑤结果说明,舒筋健脑方治疗缺血缺氧脑瘫大鼠的机制可能是提升抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制促凋亡蛋白Bax的表达,降低Caspase-3的蛋白表达,最终抑制脑瘫大鼠海马组织细胞凋亡;舒筋健脑方在一定范围内,剂量越高治疗效果越好,且高剂量使用疗效不亚于米诺环素。

关键词： 腹腔镜胃袖状切除术   肥胖   2型糖尿病   脂肪胰  

摘要： 目的:探究腹腔镜胃袖状切除术(LSG)治疗肥胖合并2型糖尿病及脂肪胰的临床效果。方法:回顾性分析2021年1月至2022年10月行LSG治疗的63例肥胖合并2型糖尿病及脂肪胰患者临床资料,分析手术前后减重效果、代谢指标及胰腺功能指标变化情况,统计术后12个月患者2型糖尿病、脂肪胰及其他合并症缓解情况。采用SPSS 25.0分析数据。物理指标、血糖和血脂代谢指标等计量资料以(x±s)表示,采用配对样本t检验;合并症情况等计数资料以[例(%)]表示。P<0.05为差异有统计学意义。结果:与术前比较,术后6个月、12个月患者体重、体重指数(BMI)、多余体重减轻百分比(EWL%)、腰围、臀围、收缩压、舒张压等物理指标及空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)等血糖、血脂代谢指标呈下降趋势,且术后12个月各指标水平显著低于术后6个月(P<0.05);与术前比较,术后6个月、12个月患者胰岛素抵抗指数(Homa-IR)明显降低,胰岛β细胞功能(Homa-β)水平明显升高,且术后12个月Homa-IR显著低于术后6个月,术后12个月Homa-β水平明显高于术后6月(P<0.05)。至术后12个月,2型糖尿病的缓解率为71.4%,合并症脂肪胰、高血压、高血脂症缓解率分别达到了82.5%、77.8%、81.8%。结论:LSG治疗肥胖合并2型糖尿病及脂肪胰安全有效,可达到明显的减重效果,同时可改善血糖、血脂等代谢情况及胰腺功能,且术后多数患者可达到糖尿病缓解和脂肪胰缓解。

关键词： 生物制剂   类风湿性关节炎   依那西普   英夫利昔单抗   甲氨蝶呤片   托珠单抗   阿达木单抗   培塞利珠单抗   阿巴西普单抗   网状Meta分析  

摘要： 目的:临床中治疗类风湿性关节炎的生物制剂多种多样,其疗效及安全性差异尚不明确,文章旨在比较不同生物制剂治疗类风湿性关节炎的有效性及安全性的差异。方法:检索中国知网、维普、万方、中国生物医学文献系统数据库、PubMed、Cochrane图书馆、Web of Science和Embase数据库的文献,收集各数据库建库至2022-10-01符合要求的关于类风湿性关节炎生物制剂治疗的随机对照试验。运用EndNote软件筛选文献,RevMan 5.3软件对纳入的文献进行质量评价;采用Stata 14.2软件对ACR20(美国风湿学会20%缓解率)、ACR50(美国风湿学会50%缓解率)、ACR70(美国风湿学会70%缓解率)、红细胞沉降率及不良反应指标进行直接Meta分析及网状Meta分析。结果:共纳入符合要求的文献39篇,5篇低风险文献,4篇含高风险文献,剩余30篇含有风险未知偏倚,共13种治疗措施。网状Meta分析结果:①在ACR20方面,英夫利昔单抗联合甲氨蝶呤(OR=5.54,95%CI:1.33-23.01,P<0.05)、阿巴西普+甲氨蝶呤片(OR=3.21,95%CI:1.13-9.10,P<0.05)、托珠单抗(OR=2.95,95%CI:1.61-5.44,P<0.05)的治疗效果均优于甲氨蝶呤片,且排名靠前;ACR20概率排序结果为:英夫利昔单抗+甲氨蝶呤片>阿巴西普+甲氨蝶呤片>托珠单抗>培塞利珠单抗>依那西普+甲氨蝶呤片。②在ACR50方面,依那西普联合甲氨蝶呤片(OR=4.04,95%CI:2.13-7.66,P<0.05)、英夫利昔单抗联合甲氨蝶呤片(OR=4.79,95%CI:1.19-19.26,P<0.05)、托珠单抗联合甲氨蝶呤片(OR=3.54,95%CI:1.36-9.22,P<0.05)治疗效果优于甲氨蝶呤片,且排名靠前;ACR50概率排序结果为:依那西普+甲氨蝶呤片>英夫利昔单抗+甲氨蝶呤片>托珠单抗+甲氨蝶呤片>托珠单抗>培塞利珠单抗+甲氨蝶呤片。③在ACR70方面,英夫利昔单抗联合甲氨蝶呤片(OR=8.00,95%CI:2.31-27.69,P<0.05)、依那西普联合甲氨蝶呤片(OR=4.26,95%CI:2.51-7.21,P<0.05)、托珠单抗+甲氨蝶呤片(OR=3.51,95%CI:1.82-6.80,P<0.05)的治疗效果优于甲氨蝶呤片;ACR70概率排序结果为英夫利昔单抗+甲氨蝶呤片>依那西普+甲氨蝶呤片>托珠单抗+甲氨蝶呤片>培塞利珠单抗>阿达木单抗+甲氨蝶呤片。④在红细胞沉降率方面,依那西普联合甲氨蝶呤片(SMD=-9.23,95%CI:-16.55至-1.92,P<0.05)治疗效果优于依那西普及甲氨蝶呤片(SMD=14.59,95%CI:7.28-21.91,P<0.05)。红细胞沉降率概率排序结果为依那西普+甲氨蝶呤片>英夫利昔单抗+甲氨蝶呤片>依那西普>阿达木单抗+甲氨蝶呤片>甲氨蝶呤片。⑤在不良反应方面,安慰剂(OR=0.62,95%CI:0.39-0.99,P<0.05)优于英夫利昔单抗和培塞利珠单抗(OR=0.44,95%CI:0.25-0.78,P<0.05)。不良反应概率排序结果为安慰剂>英夫利昔单抗>依那西普+甲氨蝶呤片>培塞利珠单抗>依那西普。结论:基于39篇随机对照试验的文献证据表明,英夫利昔单抗联合甲氨蝶呤片(高级强推荐)在临床中可作为治疗类风湿性关节炎首选,有效性及安全性相对较好,依那西普联合甲氨蝶呤片(高级强推荐)可作为次选。