关键词:
树鼩
地塞米松
链脲佐菌素
2型糖尿病
摘要:
本实验分为两部分,第一部分为高脂高糖饲料联合地塞米松诱导树鼩糖脂代谢异常动物模型;第二部分为小剂量链脲佐菌素多次注射诱导树嗣2型糖尿病动物模型。 第一部分目的用高糖高脂饲料+地塞米松(dexamethasone, DEX)联合诱导树鼩糖代谢和脂代谢紊乱,为建立实验性2型糖尿病树鼩模型提供前期基础。方法14只雄性中缅树鼩,随机分为高糖高脂组(HGF,n=6)和高糖高脂+DEX组(HGF+DEX,3mg/kg, h.i, n=8),于给药前后分别测定空腹血糖(FBG)、体重、甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),糖化血红蛋白(HbAlc);成模实验动物取胰腺,肾脏,肝脏等组织做常规HE染色,光镜下观察其病理变化。结果HGF组无一成膜,HGF+DEX组给药后第3周空腹血糖(FBG)就显著升高,维持两周后下降,但第7周又升高。同时发生脂代谢紊乱,糖耐量异常且两组体重都下降。HGF+DEX组的树鼩胰腺常规HE染色发现胰岛数量明显减少,体积变小,胰岛β细胞数量减少,肿胀;部分肾小管上皮细胞萎缩、脂肪变性,肾小管管腔扩张,钙化,并可见蛋白管型,肾间质充血;肝细胞不同程度脂肪变性。结论高糖高脂+地塞米松连续多次腹腔注射可诱发树鼩糖代谢、脂代谢紊乱。 第二部分目的探索链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)诱导树鼩2型糖尿病动物模型的方法。方法22只雄性中缅树鼩,随机分为正常对照组(NC, n=6)、STZ组(120mg/kg, i.p,n=8)和DEX+STZ组(n=8)。连续观察15周,测定FBG、体重、TG和TC;在血糖明显升高并维持两周以上时做口服葡萄糖耐量试验(OGTT)。将FBG≥10.0mmol/L并维持两周以上且血脂与本组给药前相比有显著差异者视为成膜动物。并于实验结束时取成模实验动物胰腺,肾脏,肝脏等组织做常规HE染色,光镜下观察其病理变化。结果正常对照组(NC)组无一成膜;STZ组成膜率为100%,一只动物在OGTT实验中由于血糖过高而死亡(第7周),死亡率为12.5%(1/8)。成模树鼩具有胰岛素抵抗、高血糖、血脂紊乱的T2DM临床特征,高血糖持续时间最长、最稳定(到实验结束模型稳定至少80 d)。光镜下观察病理切片,FBG≥10.0mmol/L的树鼩胰腺常规HE染色中胰岛数量明显减少,胰岛萎缩,体积变小,胰岛界限不清晰;肾脏组织切片可见肾间质充血,肾小管上皮细胞水肿变性,有淋巴细胞浸润;肝脏最典型的变化是脂肪变性。结论以120mg/kg剂量腹腔注射STZ多次后能够快速诱导树鼩形成T2DM,是一种较好的制备树鼩T2DM的方法。