关键词： 地中海贫血   基因型   育龄人群   少数民族   河池  

摘要： 目的 了解河池地区育龄人群地中海贫血基因类型和民族分布特征。方法 采用Gap-PCR和PCR-反向点杂交法,对2019年1月至2021年12月在河池市人民医院医学生殖中心就诊的河池户籍育龄人群血液样本进行地贫基因检测,并对结果进行统计学分析。结果 1166份样本检测结果显示,地贫基因阳性率为27.27%(318例),其中α-地贫基因占18.87%(220例),β-地贫基因占6.52%(76例),α/β-地贫基因占1.89%(22例)。α-地贫以--SEA/αα(34.71%)、-α^(3.7)/αα(32.23%)和αα^(CS)/αα(16.94%)为主;β-地贫以41-42M/N(44.9%)和17M/N(43.88%)为主。送检样本中共有壮族812例,地贫基因阳性率为29.43%(239例);汉族205例,地贫基因阳性率为20.00%(41例);毛南族48例,地贫基因阳性率为33.33%(16例);瑶族46例,地贫基因阳性率为19.57%(9例);壮族、毛南族人群阳性率与汉族人群相比,差异具有统计学意义(P<0.05),瑶族人群阳性率与汉族人群相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 河池地区壮族、毛南族育龄人群地贫基因阳性率高,与汉族人群阳性率相比具有显著性差异。

关键词： 地中海贫血   异基因造血干细胞移植   芦可替尼   移植物抗宿主病   儿童  

摘要： 目的:评价芦可替尼预防儿童干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)的有效性和安全性。方法:收集2020年3月-2021年3月期间本院完成的22例非亲缘供者和单倍体相合同胞供者造血干细胞移植的重型地中海贫血患儿,移植后+30到+100 d口服芦可替尼5 mg/d预防GVHD,观察治疗后患者急性GVHD、慢性GVHD,CMV、EBV病毒感染状况。结果:22例患者全部植入成功,5例患者诊断为急性GVHD,3例为II度以下皮肤GVHD,2例为II度肠道GVHD例,经治疗后痊愈,无死亡病例。全部患者随访时间超过21周,累计慢性GVHD 4例,其中局限性肝脏GVHD 3例,肺部GVHD 1例,经积极治疗后获得缓解。8例患者出现EBV copies升高(>3×10^(3)/ml),3例患者出现CMV copies数增加,给予减停免疫抑制剂、抗病毒治疗后恢复。没有患者发生CMV感染性疾病和EBV阳性的淋巴组织增殖异常,无移植相关的死亡。结论:对于替代供者移植的儿童患者,预防性应用芦可替尼可有效地减少GVHD的发生和严重程度,不影响造血恢复,改善了地贫儿童的移植后生存状况。

关键词： 异尾双链荧光探针   多重不对称聚合酶链反应   非缺失突变   点突变   地中海贫血  

摘要： 目的 建立可同时检测3种α-地中海贫血(简称地贫)非缺失突变(αWS、αQS、αCS)和8种β-地贫基因点突变[CD26(G>A)、CD41/42(-TCTT)、nt29(A>G)、IVS-Ⅱ-654(C>T)、nt28(A>G)、CD71/72(+A)、CD17(A>T)、CD27/28(+C)]的异尾双链荧光探针杂交法,并评价其临床应用价值。方法设计目标区域的聚合酶链反应(PCR)引物和异尾双链荧光探针,对PCR反应体系和反应条件进行优化。采用地贫核酸检测国家参考品评估异尾双链荧光探针杂交法的检测性能(准确性、特异性、灵敏度)。采用异尾双链荧光探针杂交法和PCR-反向点杂交法同时检测200份已知地贫基因型的临床样本,评估2种方法检测结果的符合率。结果 对于检测范围内的11种点突变样本,异尾双链荧光探针杂交法检测结果与国家参考品说明书标示的突变类型的符合率为100%;检测范围外的其他点突变或缺失突变类型均未检出。采用异尾双链荧光探针杂交法检测1.0、2.5、5.0、10.0 ng/μL的α-地贫Hb CS点突变参考品和β-地贫CD41/42、IVS-Ⅱ-654点突变参考品,结果均与国家参考品说明书中标示的突变类型一致。异尾双链荧光探针杂交法与PCR-反向点杂交法检测结果的符合率为100%。结论 异尾双链荧光探针杂交法仅需1步加样,闭管检测,操作简单,无污染,来检测时间较短,具有一定的临床应用潜力。

关键词： 地中海贫血   铁过载   螯合剂  

摘要： 地中海贫血(Thalassemia)是由于珠蛋白链比例失衡而产生异源四聚体引起的溶血性贫血。严重地贫生存依赖于定期输血,这反过来又会导致输血铁过载和由铁毒性引起的继发性多器官损伤。现将有关铁过载在不同类型地贫中的机制、如何诊断与量化,以及处理方案综述如下,本文希望能为地中海贫血进一步的临床诊疗提供参考。

关键词： 贫血疾病   血液检验   地中海贫血   缺铁性贫血  

摘要： 探究在贫血疾病患者的检验工作中,开展血液检验所取得的价值。方法 此研究需要借助回顾性方式进行,2021年7月至2022年7月是开展本研究的具体时段,选取我院贫血患者300例,分组就需根据患者的贫血类型来进行;其中组1是确诊的地中海贫血患者,组2是确诊的缺铁性贫血患者,每组患者均为150例,后将同时段内的体检健康者150例纳入对照组,对三组对象均开展血液检验工作。结果 (1)地中海贫血患者与体检健康者相比较,前者的RBC、RDW水平较高(P<0.05)。(2)与健康者比较,缺铁性贫血患者的RBC、MCV、MCH及Hb、MCHC水平较低(P<0.05)。(3)缺铁性贫血与地中海贫血比较,前者RBC、Hb水平较低(P<0.05)。结论 将血液检验应用于贫血疾病患者的检验工作中具有显著效果,更具备临床推广价值。

关键词： 地中海贫血   年龄   基因型   血液学表型  

摘要： 目的:了解本地区人群中地中海贫血基因型分布特点,分析β-地中海贫血杂合子血液学表型与年龄的关系。方法:选取2017年6月至2021月6月于成都医学院第一附属医院检测地贫基因疑似病例1 351例,采用PCR-反向斑点杂交法检测常见α、β地中海贫血基因类型,收集确诊病例的MCV、MCH、MCHC、Hb数据。β-地中海贫血杂合子患者按照年龄分为0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组,比较各组间血液学表型的差异。结果:在1 351例检测标本中,确诊地中海贫血523例(38.71%),其中13种基因型α-地贫260例(19.25%),12种基因型β-地贫252例(18.65%),9种基因型α复合β地贫11例。MCV、MCH在0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组呈明显上升趋势,MCHC在0-18岁组最高,Hb在> 50岁组最低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:本地区α-地中海贫血以--^(SEA)/αα基因型为主,β地中海贫血以CD41-42/N、IVS-II-654/N基因型为主,且在β-地中海贫血杂合子中,MCV、MCH在0-18岁组最低、在> 50岁组最高,年龄对地中海贫血初筛中血液学参数的影响,为临床诊疗过程中提供了一定的参考价值。

关键词： 地中海贫血   髓外造血   椎旁肿物   先天性溶血性疾病  

摘要： 目的探讨地中海贫血伴纵隔旁脊柱旁髓外造血的诊断、鉴别诊断及治疗。方法分析地中海贫血伴脊柱纵隔旁髓外造血一例并进行相关文献回顾。结果影像学检查考虑间皮瘤,患者未诉不适,为进一步明确诊断,在CT引导下穿刺,病理结果为髓外造血。结论若在血液病患者中发现多发对称性纵隔脊柱旁肿块,应考虑髓外造血在鉴别诊断中。治疗原发病、放射治疗及手术切除可视患者临床症状进行选择。

关键词： 地中海贫血   造血干细胞移植   CMV感染   预后  

摘要： 目的探讨移植后CMV感染对儿童重型β地中海贫血造血干细胞移植术后生存预后的影响。方法回顾2013年9月—2019年9月诊断重型β地中海贫血并接受异基因造血干细胞细胞移植的257例患者资料,通过定量PCR方法监测移植后CMV感染,采用Log-Rank及Cox回归,分析CMV对移植后的生存预后影响。结果随访中位时间29个月,有71例(27.6%)发生CMV感染。CMV感染组与无感染组中aGVHD发生率分别为47.9%和25.3%(P=0.001),可逆性后部脑白质病变发生率分别为16.9%和4.8%(P=0.002),出血性膀胱炎发生率分别为36.6%和21.5%(P=0.013),合并EB病毒感染者分别为29.6%和12.9%(P=0.002)。CMV组与无感染组的5年OS分别为83.6%和95.2%(P=0.004),TFS分别为83.6%和93.5%(P=0.021),TRM分别为16.4%和4.9%(P=0.004),GR分别为0%和1.7%(P=0.302)。Cox回归多因素分析提示CMV感染是影响移植后OS、TFS、TRM的独立危险因素。结论儿童重型β地中海贫血患者行造血干细胞移植后,CMV感染是影响OS、TFS、TRM的独立危险因素。

关键词： 地中海贫血   CRISPR/Cas9   同义突变   单碱基突变  

摘要： 目的 建立一种高效构建β-地中海贫血CD17(A>T)点突变基因型HEK293T细胞系的方法。方法 利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑技术,即无痕基因组编辑(consecutive re-Guide or re-Cas steps to erase CRISPR/Cas-blocked targets, CORRECT),通过电转染CRISPR/Cas9质粒诱导HEK293T细胞HBB基因切割,同时以引入有CD17(A>T)点突变和同义突变碱基(G>T)的单链寡核苷酸(singlestranded oligo DNA nucleotides, ssODNs)作为同源模板进行重组,经单克隆筛选、测序验证获得β-珠蛋白基因(HBB)点突变CD17(A>T)基因型HEK293T细胞系。结果 利用“CORRECT”技术成功获得一株β-地贫CD17(A>T)基因型点突变的HEK293T细胞系,同义突变的引入减少Cas9蛋白对靶点不准确的再编辑,提高单碱基突变效率。结论 通过“CORRECT”技术可以高效获得点突变的293T细胞系,对单碱基突变疾病模型的细胞系及动物模型的建立具有重要意义。

关键词： 地中海贫血   基因突变   罕见突变  

摘要： 目的研究福建闽南地区地中海贫血(又称地贫)的罕见基因突变类型。方法收集2017年11月至2022年5月厦门大学附属成功医院来自于福建闽南地区的38例因血液学检测的结果与常规基因突变测定结果不相符、可能是罕见的地贫类型的样本,其中男16例,年龄5~47岁;女22例,年龄15~56岁,运用跨越断裂点聚合酶链反应和DNA测序法进行一一鉴定。结果本研究检出了地贫罕见基因突变21例,其中包括了罕见的α珠蛋白基因突变6种,分别是8例泰国型缺失(--T HAI)、2例中国香港型缺失(HKαα)、2例菲律宾型(--FIL)、1例CD 30(-GAG)、1例CD 122 CAC>CAG,WSM和1例αα/αααanti4.2,其中,2例--FIL来源于一对母子;罕见β珠蛋白基因突变6种,分别为1例CD56 GGC>GAC、2例IVS I-129 A>G、1例同时检出CD54 GTT>GTC和Terminal CD+32 A>C两种突变、1例113A>G(Poly A(A>G)AATAAA>AATAAG)、1例越南型-HPFH(Vietnamese HPFH)缺失型β地贫,其中CD54 GTT>GTC突变为首次报道。结论本研究通过测定的几种较罕见地贫基因加以了分析,对福建闽南地区地贫基因突变的种类加以了补充,可为地贫基因的检测诊断提供必要的分子信息。