关键词： 地中海贫血   缺铁性贫血   糖化血红蛋白   联合指标   诊断  

摘要： 目的:分析糖化血红蛋白联合MCV、MCH、RDW-SD诊断地中海贫血的价值,寻找可靠且简单易行的指标,建立筛查地中海贫血的诊断模型。方法:收集2020年1月至2022年12月来自于右江民族医学院附属医院的520例地中海贫血患者(采用gap-PCR技术联合PCR-RDB技术确诊)作为疾病组,选取我院同期就诊者676例作为对照组,其中271例为缺铁性贫血患者,405例为健康体检人群;所有研究对象采用电阻抗法、HPLC检测红细胞参数和糖化血红蛋白,分析每个研究对象的详细临床资料及相关检查结果,比较各组间一般情况、糖化血红蛋白、红细胞参数的差异性和相关性,筛选出有统计学差异的相关指标,使用二元Logistics回归分析,建立糖化血红蛋白与红细胞参数联合检测地中海贫血的诊断模型,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,比较单项指标、联合指标间的曲线下面积(Area under the curve,AUC),评估相关指标对诊断地中海贫血的价值。结果:(1)地中海贫血组的RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC均低于健康组(P<0.05),RDW-SD、RDW-CV、Hb A、Hb A均高于健康组(P<0.05);地中海贫血组的RBC、Hb、HCT、Hb A高于缺铁性贫血组(P<0.05),RDW-SD低于缺铁性贫血组(P<0.05);各组间的Hb A差异无明显统计学意义(P>0.05)。(2)地中海贫血组中Hb A与RBC、RDW-CV呈正相关(P<0.05),与Hb、MCV、MCH呈显著负相关(P<0.01);Hb A与Hb、MCHC呈正相关(P<0.05),与RDW-CV、RDW-SD呈显著负相关性(P<0.01);Hb A与红细胞参数均无明显相关性。(3)地中海贫血组与健康组比较:RBC、Hb、MCH等是地中海贫血的保护因素(OR<1、P<0.05),RDW-CV、Hb A是地中海贫血的独立危险因素(OR>1、P<0.05);地中海贫血组与缺铁性贫血组比较:RBC、MCV、RDW-SD等是地中海贫血的保护因素(OR<1、P<0.05);MCH、RDW-CV、Hb A是地中海贫血的独立危险因素(OR>1、P<0.05)。(4)单项指标ROC曲线结果。将健康组赋值为0,地中海贫血组赋值为1:Hb A对地中海贫血的最佳截断值为1.35%,灵敏度82.5%,特异度70.7%,AUC=0.830,P<0.001;Hb A对于地中海贫血的最佳截断值为1.85%,灵敏度93.7%,特异度16.6%,AUC=0.546,P<0.05;Hb A对地中海贫血的最佳截断值为6.05%,灵敏度为99.3%,特异度为19.5%,AUC=0.542,P<0.05;MCV对于地中海贫血的最佳截断值为82.55 f L,灵敏度95.1%,特异度81.9%,AUC=0.911,P<0.001;MCH对地中海贫血的最佳截断值为26.85 pg,灵敏度97.5%,特异度86.3%,AUC=0.946,P<0.001;RDW-CV对地中海贫血的最佳截断值为14.05%,灵敏度85.7%,特异度90.8%,AUC=0.933,P<0.001;单项指标的AUC由大到小的排序为:MCH>RDW-CV>MCV>Hb A>Hb A>Hb A;将缺铁性贫血组赋值为0,地中海贫血组赋值为1:MCV、MCH、RDW-CV的AUC分别为0.536、0.511、0.508,灵敏度分别为:88.1%、86.9%、87.1%,特异度分别为23.6%、28.4%、22.1%,差异均无统计学意义(P>0.05);RDW-SD对鉴别地中海贫血与缺铁性贫血的最佳截断值为41.05 f L,灵敏度50.0%,特异度79.0%,AUC=0.640,P<0.001;Hb A鉴别地中海贫血与缺铁性贫血的最佳截断值为1.25%,灵敏度80.8%,特异度44.3%,AUC=0.668,P<0.001。(5)联合指标ROC曲线结果。联合指标(串联)诊断地中海贫血:MCV+RDW-CV联合指标(模型1)的灵敏度为81.5%,特异度为98.3%,AUC=0.958,P<0.001;MCV+MCH+RDW-CV联合指标(模型2)的灵敏度为79.4%,特异度98.8%,AUC=0.970,P<0.001;MCV+RDW-CV+Hb A联合指标(模型3)的灵敏度76.4%,特异度98.6%,AUC=0.960,P<0.001;建立的三个模型的AUC由大到小的排序为:模型2>模型3>模型1。模型1、2、3的AUC均高于MCH的检测结果(P<0.05),模型 2与模型1、3的AUC差异有统计学意义(P<0.05);联合指标在鉴别地中海贫血与缺铁性贫血中的价值,结果

关键词： 地中海贫血   基因诊断   三代测序   光学图谱技术  

摘要： 研究背景:地中海贫血(下文简称:地贫)是世界上最常见的遗传性疾病之一,是由珠蛋白基因上的点突变和缺失导致。精准的地贫基因分型是开展遗传咨询和产前诊断的基础。目前,我国所设计的常规地中海贫血基因检测方法及试剂仅纳入了常见的20多种突变类型。传统的筛选方法都有局限性,只能检测范围有限的基因突变,遇到罕见的地贫突变可能产生错误的结果,在临床诊断中会导致误诊。第三代测序基于长读单分子测序,具有长测序长度和高检测精度特点,能够同时检测在珠蛋白基因上的点突变和复杂拷贝数变异。在本研究中,我们收集了 628例患者生物学样本,使用第三代测序的单分子实时(Single Molecule Real-Time,SMRT)测序,发现了 15种罕见突变,以及用Bionano光学图谱技术鉴定了一种含有24个额外HBA2基因的串联重复突变。研究方法:在这项研究中,对收集的628例地中海贫血病患者样本进行了血红蛋白检测和血常规分析,同时进行的地中海贫血筛查及分子诊断。最终我们将628例患者DNA样本全部被送往一个独立实验室进行SMRT测序。其中遇到一例具有高拷贝数的串联重复突变使用光学图谱进行检测。随后对获得的罕见突变样本的表型进行分析和阐述。实验结果:在628例病患中,使用SMRT及光学图谱检测出576例(91.72%)患者有α-地贫突变,17例(2.71%)患者有β-地贫突变,35例(5.57%)患者有α合并β地贫突变。其中,SMRT检测出31种变异类型,光学图谱技术鉴定1种串联重复突变。共检测出1289个阳性等位基因。总共发现了另外15种罕见的和1种新发具有临床意义的变异。对含有HBA2重复突变的家系进行qPCR和反相液相色检测,发现重复突变中的HBA2基因并不发挥作用,并且还导致α珠蛋白基因mRNA表达水平下降以及α/β珠蛋白肽链比例下降。总结与讨论:结果表明,SMRT在检测α-珠蛋白基因三倍体、罕见缺失和确定顺式或反式构型方面等具有很大优势。SMRT是一种全面、一步到位的地中海贫血筛查和诊断方法,尤其是用于检测罕见的地中海贫血突变,为更好地预防和控制地中海贫血提供了参考。对含有24个额外HBA2基因的串联重复突变进行家系分析和体外分子实验,进一步阐明该突变与表型之间的关系。该病例报告强调了珠蛋白基因座结构组织在基因活性中的重要作用,这将为研究红系发育过程中的远端增强子和珠蛋白基因启动子通讯提供新的线索。

关键词： 香港型地中海贫血   基因检测   血液学表型   第三代测序  

摘要： 目的:香港型地中海贫血及合并α-或β-地中海贫血的基因型和血液学表型的分析目前鲜有报道。本研究旨在探讨香港型地中海贫血及其合并其他不同类型地中海贫血的血液学表型,分析其基因型与血液学表型的关系,为医生提供更准确的遗传咨询和产前诊断。方法:对2015年1月至2021年12月在桂林医学院附属医院行地中海贫血基因筛查的患者进行血细胞分析、血红蛋白电泳及常规地中海贫血基因检测,对怀疑为香港型地中海贫血的样本采用巢式PCR、多重连接依赖探针扩增(Multiple connection-dependent probe amplification,MLPA)技术、第三代测序(third-generation sequencing,TGS)技术确定地中海贫血基因突变类型。根据地中海贫血基因分型及三代测序结果分组。使用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析,计量资料表示为均数±标准差(±s),两组间比较用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:共检出HKαα病例34例,其中HKαα/αα20例,HKαα/αα复合β/β6例,HKαα/αα复合β/β2例,HKαα/-α复合β/β1例,HKαα/-α2例,HKαα/αα1例,HKαα/--2例。与正常组相比,HKαα/αα组的RBC、HGB、MCV、MCH、MCHC值差异无统计学意义(P>0.05)。HKαα/αα复合β地贫组和β地贫组两组比较,RBC、HGB、MCV、MCH、MCHC值的差异无统计学意义(P>0.05)。HKαα/-α和HKαα/αα基因型的个体表现为静止型α-地中海贫血,而基因型为HKαα/--的个体仅表现为轻型α-地中海贫血。HKαα/αα、HKαα/-α与β-地中海贫血联合表现出明显的β-地中海贫血血液学特征。结论:1、HKαα基因携带者的血液学特征与正常组相同。2、当Gap-PCR结果显示为-α/αα,而患者血液学各项指标正常且无任何临床表现时,需警惕HKαα/αα。3、HKαα基因突变合并地中海贫血的血液学特征及遗传咨询与相应的地中海贫血相似,HKαα基因突变不会加重地中海贫血的临床表现。4、第三代测序是一种可靠、高效、准确检测HKαα型地中海贫血的方法,可广泛应用于临床。

关键词： 重型β地中海贫血   铁过载   生活质量   儿童  

摘要： 【目的】　　本研究通过磁共振（MRI）技术评估重型β地中海贫血患者心脏、肝脏铁过载情况，并采用中文版儿童生活质量普适性核心量表4.0版本（PedsQL4.0）调查患者的生活质量;旨在研究心脏、肝脏铁过载与生活质量的相关性，并探讨影响生活质量的因素。　　【方法】　　1.最终纳入55名诊断为重型β地中海贫血的患者作为研究对象，所有患者均完成心脏、肝脏MRIT2*检查，根据心脏和肝脏铁过载的发生情况分为四组：正常组（心脏、肝脏均未发生铁过载）;铁过载组（心脏、肝脏均发生铁过载）;心脏组（心脏发生铁过载但肝脏未发生铁过载）;肝脏组（肝脏发生铁过载但心脏未发生铁过载）。同时测定血清铁蛋白，并对心脏T2*值、肝脏T2*值、血清铁蛋白三者进行相关性分析。　　2.本研究选择在我国应用广泛，使用人数较多的PedsQL4.0作为评估工具，通过问卷星平台发放调查问卷对患者的生活质量进行评估，收集整理PedsQL4.0整体以及所包含四个维度：生理功能维度、情感功能维度、社会功能维度、学校表现维度的得分情况。　　3.研究重型β地中海贫血患者心脏、肝脏铁过载程度与生活质量的相关性以及与生活质量的四个维度：生理功能维度、情感功能维度、社会功能维度、学校表现维度的相关性;并分析正常组、铁过载组、心脏组、肝脏组四个组的重型β地中海患者生活质量是否存在差异。　　4.收集所有患者的临床资料，通过评估患者临床资料对生活质量是否存在影响，找出存在影响的临床资料并将它们与生理功能、情感功能、社会功能、学校表现四个维度进行相关性分析，同时将与生活质量存在相关性的MRIT2*值和这些因素进行相关性分析。　　【结果】　　1.本研究55例重型β地中海贫血患者的心脏铁过载与肝脏铁过载的发生率不均衡，其中正常组（心脏、肝脏均未发生铁过载）的患者3例（5.5%），铁过载组（心脏、肝脏均发生铁过载）的患者16例（29%）;心脏组（心脏发生铁过载但肝脏未发生铁过载）的患者0例（0%）;肝脏组（肝脏发生铁过载但心脏未发生铁过载）的患者36例（65.5%）。相关性分析显示：血清铁蛋白与心脏T2*值存在负相关性（P＜0.05），相关系数为-0.562*;血清铁蛋白与肝脏T2*值存在负相关性（P＜0.05），相关系数为-0.398*;心脏与肝脏T2*值无相关性（P＞0.05）。　　2.本研究共收集到55份有效问卷，重型β地中海贫血患者生活质量的最小分值为33.28分，最大分值为95.94分。四个维度的得分情况为：生理功能得分最小值为34.38分，最大值100.00分;情感功能得分最小值为30.00分，最大值100.00分;社会功能得分最小值为25.00分，最大值100.00分;学校表现得分最小值为15.00分，最大值100.00分。　　3.本研究发现心脏T2*值与生活质量总体水平存在正相关性（P＜0.05），相关系数为0.313**，此外心脏T2*值与生理功能维度也存在正相关性（P＜0.05），相关系数为0.445**。而肝脏T2*值与生活质量及四个维度均无相关性（P＞0.05）。同时发现血清铁蛋白与生活质量总体水平不存在相关性（P＞0.05），但血清铁蛋白与生理功能维度存在负相关性（P＜0.05），相关系数为-0.395**。在进行组间差异性比较时发现：正常组与铁过载组的患者生活质量及生理功能维度存在差异性（P＜0.05）;正常组与肝脏组的患者的生活质量及四个维度均不存在差异性（P＞0.05）;而肝脏组与铁过载组患者的生活质量存在差异性（P＜0.05），差异体现在生理功能维度、情感功能维度和学校表现维度（P＜0.05）。　　4.通过分析患者的临床资料，发现以下因素与患者生活质量存在相关性（P＜0.05）：与照顾者的关系（父亲/母亲/其他亲属）、照顾者的教育程度（小学/初中、高中/大学及以上）、家庭人均月收入（＜1000元/1000元~3000元/＞3000元）、是否有外貌改变的焦虑、是否受到歧视或不公平对待;这些因素与生活质量的相关性主要体现在情感功能，社会功能，学校表现这三个维度上;同时将与生活质量存在正相关的心脏T2*值和这些因素进行相关性分析，发现心脏T2*值与以上因素均不存在相关性（P＞0.05）。　　【结论】　　1.本研究发现重型β地中海贫血患者心脏铁过载与肝脏铁过载的发生率不均衡，且心脏与肝脏T2*值无相关性，说明通过肝脏的铁过载程度来预测心脏的铁过载程度是不可靠的。　　2.心脏T2*值与患者生活质量存在正相关性，心脏T2*值越大即心脏铁过载程度越低的患者生活质量越好;而肝脏铁过载程度与患者生活质量无明显相关性。同样证实发生肝脏铁过载的患者与未发生肝脏铁过载的患者生活质量无差异;而同时发生心脏、肝脏铁过载的患者与仅发生肝脏铁过载的患者生活质量存在差异，说明对生活质量产生影响的是心脏

关键词： 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱   地中海贫血   基因突变   分子诊断  

摘要： 背景与目的:地中海贫血是一组常见的遗传性溶血性疾病,其分子病理学机制是由珠蛋白基因缺陷引起α/β珠蛋白肽链比例失衡,导致无效红细胞生成和慢性溶血性贫血。临床上主要分为α-地贫和β-地贫两种类型,其临床表型具有明显的异质性,严重程度从接近正常到需要终身输血不等。目前,临床上地贫暂无有效治疗手段,控制此病公认的最有效措施是通过人群筛查和对高风险夫妇的胎儿进行产前诊断以避免重型地贫患儿出生。由于引起α-和β-地贫的突变类型多,临床亟需一种检测通量高,检测速度快,操作简便的地贫基因快速分型方法以促进地贫防控工作的开展。本研究是采用MALDI-TOF核酸质谱平台,建立一种同步检测中国人群α-和β-地中海贫血基因突变热点新方法,以满足我国地中海贫血防治人群筛查和分子诊断的需求。方法:以中国人群地中海贫血突变热点(α-地贫:4种缺失突变,3种点突变,β-地贫:21种点突变)为靶点,设计特异性PCR引物扩增HBA2/HBB基因和4种缺失截短序列,并针对每个突变设计核酸质谱单碱基延伸探针。经PCR引物和单碱基延伸探针的有效性和特异性验证,以及检测体系中PCR引物和添加剂等组分的优化后,建立了基于MALDI-TOF质谱的α-和β-地中海贫血突变检测新方法。应用此方法检测28例和394例已知基因型样本评价其灵敏度和准确性,并通过对9例和19例已知基因型样本的检测评价批内重复性和批间稳定性,同时收集2835例临床样本使用此方法与传统gap-PCR和RDB平行检测而进行临床应用评价。结果:经反应体系PCR引物和单碱基延伸探针的有效性和特异性验证,以及体系组分优化,建立了中国人群地中海贫血突变热点的MALDI-TOF核酸质谱检测新方法。方法学评价结果显示其灵敏度和准确性均达100%,体系的检测限至15.62 ng/μL gDNA,并具有很好的重复性和稳定性。2835例临床应用评价结果显示本方法与传统方法检测结果一致,说明本方法能对地中海贫血中国人群的突变热点进行快速基因分型,能满足大规模人群筛查和常规分子诊断的需求。结论:本研究建立了一种基于MALDI-TOF核酸质谱的地中海贫血基因分型新方法,可同时对中国人群中28种α-/β-地中海贫血基因突变热点进行快速分析。此方法具有操作简单,成本低,通量高的优点,适用于大规模人群筛查和临床常规分子诊断。同时,本研究的TASP-SBE策略可为基于MALDI-TOF核酸质谱平台的基因检测方法学研发提供借鉴和参考。

关键词： 糖代谢异常   铁过载   胰岛素抵抗指数   糖化血红蛋白HbAc1   重型β地中海贫  

摘要： 目的:了解本地区重型β地中海贫血铁过载患者血糖及糖代谢异常情况及探讨可能的发病机制。方法:研究对象共收集2015年01月01日至2022年10月01日期间在右江民族医学院附属医院经地中海贫血基因检测诊断为重型β地中海贫血患者102例,测定其血清铁蛋白(Serum Ferritin,SF)、空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG)、糖负荷后2h血糖,空腹胰岛素(Fasting Serum Insulin,FINS)、糖化血红蛋白(Glycated Hemoglobin,HbAc1)等指标。通过公式计算出胰岛素抵抗指数(Homa Insulin Resistance Index,HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(Homeostatic Model of Membrane Island Beta Cell Function,HOMA-β)。研究对象按年龄构成分为4组:0～岁组,5～岁组,10～岁组,18及以上岁组。按血清铁蛋白浓度分组:SF<2500μg/L组;2500μg/L≤SF<5000μg/L组;SF≥5000μg/L组。其中39名重型地中海贫血患者再根据是否发生糖代谢异常分为重型β地中海贫血未发生糖代谢异常和重型β地中海贫血发生糖代谢异常组。对各分组间血糖相关临床指标进行比较。采用K个独立样本非参数检验及两两比较比较各组间各临床指标之间的差异。采用pearson correlation相关分析血清铁蛋白(SF)与血糖相关临床指标之间的相关分析。采用多重线性逐步回归分析评估血糖相关临床指标对SF的影响,并建立回归方程。结果:(1)102名重型地中海贫血患者不同年龄分组间性别、SF、空腹血糖的比较差异无统计学意义(P>0.05);不同SF分组间年龄、性别的比较差异无统计意义(P>0.05),不同SF分组间空腹血糖的比较差异无统计意义(P<0.001)。SF≥5000组与SF<2500组、2500≤SF<5000组间空腹血糖比较均有统计统计学意义(P<0.001).SF≥5000组空腹血糖(7.45mmol/L)大于SF<2500组空腹血糖(5.29mmol/L)。2500≤SF<5000组与SF≥5000组比较差异有统计学意义(P<0.05),SF≥5000组空腹血糖(7.45mmol/L)大于2500≤SF<5000组空腹血糖(6.20mmol/L)。(2)39例患者中,发生糖代谢异常33例(84.6%占总体人数的32.4%),其中糖耐量减低26例(66.6%,占总体人数的25.5%),糖尿病6例(15.4%占总体人数的5.9%)。重型β地中海贫血患者糖代谢异常的发病率随着血清铁蛋白浓度逐渐升高,2500μg/L≤SF<5000μg/L时糖代谢异常患病率为75%,占总体人数的11.8%;SF≥5000μg/L时糖代谢异常患病率为95.2%,占总体人数的19.6%,其中糖尿病患病率为28.5%,占总体人数的5.9%。(3)重型β地中海贫血患者的糖化血红蛋白(HbAc1)并不能很好的反应患者的糖代谢状态,常规切点糖化血红蛋白(HbAc1)≥6.5%对各年龄组及各血清铁蛋白分组糖代谢异常的检出率均不高。(4)在血清铁蛋白浓度逐渐升高的情况下,各组间空腹血糖、胰岛素抵抗指数、胰岛细胞功能指数比较差异有统计学意义(P>0.05)。SF≥5000 ug/L组空腹血糖(6.07 mmol/L)高于2500 ug/L≤SF<5000 ug/L组空腹血糖(4.58 mmol/L);SF≥5000 ug/L组胰岛素抵抗指数(3.33)高于2500 ug/L≤SF<5000 ug/L组胰岛素抵抗指数(2.60);2500 ug/L≤SF<5000 ug/L组胰岛细胞功能指数(208.58)高于SF≥5000ug/L组胰岛细胞功能指数(72.56)。而各组间年龄、糖负荷后2h血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白比较差异无统计学意义(P>0.05),但糖负荷后2h血糖、空腹胰岛素的值在组间呈逐渐增高趋势。(5)血清铁蛋白(SF)与空腹血糖、糖负荷后2h血糖、胰岛素抵抗指数呈正相关,相关程度都达统计学意义(P<0.01),与胰岛细胞功能指数呈负相关,相关程度达统计学意义(P<0.01)。结论:(1)重型β地中海贫血铁过载患者发生血糖代谢异常风险偏高,发生率随着铁过载程度逐渐升高,需提高临床重视。(2)重型β地中海贫血铁过载患者糖代谢异常的潜在机制可能与铁过载导致胰岛素抵抗及胰岛素分泌功能的下降相关。

关键词： 克罗恩病   地中海贫血   临床特征   全外显子测序  

摘要： 目的:克罗恩病(Crohn’s disease,CD)是由免疫、环境、微生物等因素在遗传易感个体上组合所引起的肠道炎症性疾病,地中海贫血是一种常染色体隐性遗传病。临床上CD合并地中海贫血患者少见,目前国内外相关研究较少。本研究旨在分析CD合并地中海贫血患者的临床特征、鉴定其致病基因位点,为CD合并地中海贫血研究提供可参考的临床和基因资料。方法:1、回顾性纳入2016年1月-2021年1月于中南大学湘雅医院门诊及住院部就诊新确诊的CD患者。根据CD患者是否合并贫血分为CD非贫血组与CD贫血组。在CD贫血组中去除未进行地中海贫血筛查或基因诊断的患者后,再根据是否合并地中海贫血分为CD非地中海贫血组与CD地中海贫血组。基于完全随机设计下重复测量的方差分析研究,最终纳入48例CD患者,包括CD非贫血组16例,CD非地中海贫血组16例,CD地中海贫血组16例。收集所有患者的一般资料及确诊时基线第0周、治疗后第14周、治疗后第52周的临床资料、实验室检查结果及内镜资料。比较三组患者的基线临床特征及对药物治疗的反应。2、提取11例CD地中海贫血组患者的外周血基因组DNA,采用全外显子测序技术进行基因测序,经数据筛选及生物信息学分析过滤得到致病基因及位点,使用Sanger测序验证患者CD和地中海贫血的致病位点。结果:1、(1)CD非贫血组、CD非地中海贫血组及CD地中海贫血组基线时的男女比例、吸烟人数、合并肛周病变人数存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。CD非地中海贫血组与CD地中海贫血组的贫血均为轻中度小细胞低色素性贫血,两组贫血程度无统计学差异(P=1.000)。CD地中海贫血组的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、低密度脂蛋白水平显著低于其他两组患者(P<0.05),红细胞分布宽度水平显著高于其他两组患者(P<0.001)。(2)CD地中海贫血组患者中分别有43.8%、46.7%、57.1%的患者在基线、治疗后第14周、治疗后第52周处于临床缓解期,与其他两组患者无明显差异(P>0.05)。(3)CD地中海贫血组患者的血红蛋白与CD非地中海贫血组相比,在基线(P>0.05)、治疗后第14周无明显差异(P>0.05),在第52周时两组差异具有统计学意义(P=0.045)。2、(1)CD合并地中海贫血患者中已知IBD致病基因检测阳性率为90.9%(10/11)。在已检出的IBD致病基因中,自身免疫性疾病相关基因检出率最高,达42.9%(9/21),包括STXBP2、HPS6、MANBA、TYK2、IL6ST、TNFAIP3、UBA7、TNFSF18、IL19;上皮屏障功能有关基因检出率为23.8%(5/21),包括IFIH1、NOD2、COL7A1、TTC37、BSN;免疫缺陷相关基因检出率为14.3%(3/21),包括RAG2、DOCK8、LRBA;免疫调节相关基因检出率为4.8%(1/21),仅PLCL1。(2)仅在1例患者中检出β-地中海贫血致病基因条带11p15.5附近的免疫调节相关基因突变,即SIGIRR(c.1031T>G)。结论:1、(1)CD合并地中海贫血患者的低密度脂蛋白水平比其他CD患者低。(2)CD合并地中海贫血患者的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量有助于在临床中识别CD合并地中海贫血的患者。2、CD合并地中海贫血患者中已知IBD相关致病基因检出率达90.9%,包括自身免疫性疾病、上皮屏障功能、免疫缺陷等相关基因。图7幅,表15个,参考文献64篇

关键词： β-地中海贫血   β-珠蛋白   Sanger测序   基因型   表型分析  

摘要： 背景与目的：β-地中海贫血（β-地贫）是β-珠蛋白基因突变导致的β-珠蛋白链合成不足或者缺如所引起的溶血性贫血病。目前已经发现的β-地贫突变类型大约有300多种，而且每年都会有不少β-地贫新发突变被发现。随着β-珠蛋白基因突变的日益增多，常见的β-地贫基因的检测技术已经无法满足β-地贫检测的需求，目前存在部分β-地贫无法被常规β-地贫基因检测所识别，我们将此类β-地贫称为罕见β-地贫。由于罕见β-地贫基因携带者不能通过常规β-地贫基因技术检测，部分临床症状较轻的携带者在产前诊断与遗传咨询中常会出现误诊或者漏诊。这些基因携带人群婚配可能会孕育β-地贫基因的纯合子或者双重杂合子，导致中间型或者重型β-地贫患儿的出生，对社会与患儿家庭都是一个沉重的负担。　　β-地贫的突变类型具有明显的民族和地域特异性。贵州是β-地贫高发区，对罕见β-地贫的诊断与分析对贵州地区的β-地贫遗传诊断与产前咨询都是非常必要的。本研究对就诊于贵州省人民医院血液学表型疑似β-地贫且常规β-地贫基因突变检测结果为阴性的受检者进行β-珠蛋白基因分析，鉴定并分析罕见的β-地贫突变的基因型，以丰富贵州地区β-地贫基因突变谱，为β-地贫的诊断与遗传咨询提供依据。　　方法：收集2020年1月至2022年3月在贵州省人民医院产前诊断中心就诊的地贫筛查人群的全血样本，进行血液学参数分析及血红蛋白电泳筛选出血常规符合小细胞低色素性贫血特征（MCVlt;80fl、MCHlt;27pg）且血红蛋白电泳结果示HbA2gt;3.5%的样本。对这批血液学表型疑似β-地贫的样本采用Gap-PCR及反向斑点杂交法，筛选出常规β-地贫基因检测结果为阴性的受检者样本21例，应用PCR技术扩增β-珠蛋白基因全长，用Sanger测序技术对扩增产物进行双向测序。测序结果与β-珠蛋白基因参考序列进行比对分析，查找是否存在罕见突变类型。　　结果：在21例疑似β-地贫患者中发现17例罕见β-地贫基因携带者，共7种突变类型：CD53(-T)、CD5(-CT)、CD8(-AA)、-88(Cgt;A)、Cap+22(Ggt;A)、IVSII-705（Tgt;G）、HBB:c.*129Tgt;A，均表现为轻型β-地贫的临床表型，其中CD53(-T)为贵州地区苗族特有突变;Cap+22(Ggt;A)、-88(Cgt;A)首次发现于中国人群;CD8(-AA)、CD5(-CT)、IVSII-705(Tgt;G)、HBB:c.*129Tgt;A首次发现于贵州人群。　　结论：1、本研究发现17例罕见β-地贫基因携带者，共计7种罕见β-地贫基因型，其中贵州苗族人群特有的β-地贫基因突变1种，中国人群中首次发现的β-地贫基因突变2种，贵州人群中首次发现的β-地贫基因突变4种。2、本研究拓展了贵州人群β-地贫基因突变谱，为本地β-地贫的遗传咨询提供了更多的支持依据。