关键词： 地中海贫血   高通量测序   基因突变   产前诊断  

摘要： 目的分析黔西南地区孕妇地中海贫血(地贫)的基因突变类型分布、基因频率及特有基因型数据。方法2019年1月—2020年10月20209例孕妇人群,于孕11~38周时采集外周静脉血,采用高通量二代测序技术(NGS)结合跨越断裂点的PCR技术(Gap-PCR)检测血红蛋白地贫基因。结果20209例样本中共检测出地贫基因突变2854例,地贫基因携带率为14.122%;其中α-地贫基因突变1954例,共56种类型(其中有12种类型为新发现的致病性不清楚的变异体,统归为不确定型,基因频率为1.726%),基因频率前3位依次为-α^(3.7)(39.646%)、--^(SEA)(25.398%)、α^(CS)(14.159%);β-地贫基因突变749例,共52种类型(其中有17种类型为新发现的致病性不清楚的变异体,统归为不确定型,基因频率为5.507%),基因频率前三位依次为β^(CD 17(A>T))(40.529%)、β^(CD 41/42(-TTCT))(27.753%)、β^(IVS-II-654(C>T))(7.159%);αβ-复合型地贫突变151例,共45种类型,以αα/-α^(3.7)&β^(CD 17(A>T))/βN多见(36例,构成比23.841%)。结论黔西南州地区α-地贫基因突变类型主要为αα/-α^(3.7),β-地贫基因突变类型主要为β^(CD 17(A>T))/β^(N),并发现多种致病性尚不清楚的新发基因和罕见突变类型,具有地区特异性。

关键词： 血常规检测   地中海贫血   缺铁性贫血   鉴别诊断   诊断效能  

摘要： 目的分析血常规检测用于鉴别诊断地中海贫血以及缺铁性贫血的价值。方法回顾性分析2021年1月至2021年12月南阳市中心医院收治的疑似地中海贫血患者共80例设为A组,纳入同时段本院收治的疑似缺铁性贫血患者共80例设为B组,另纳入同时间段本院100例健康体检者作为C组,三组均接受血常规检测,将基因检测、骨髓铁染色结果当作诊断地中海贫血以及缺铁性贫血的金标准,分析联合各项血常规检测指标对地中海贫血以及缺铁性贫血的诊断效能,统计A组中α-地中海贫血、β-地中海贫血患者的突变基因型,并比较A、B组确诊地中海贫血和缺铁性贫血患者与C组血红蛋白(HB)、红细胞(RBC)、红细胞和血红蛋白比值(RBC/HB)、平均红细胞比容(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)及红细胞体积分布宽度(RDW)水平。结果A组基因检测确诊地中海贫血阳性43例,阴性37例;联合血常规指标显示地中海贫血阳性42例,阴性38例。联合血常规指标对地中海贫血的诊断准确度、敏感度、特异度分别为96.25%、95.35%、97.30%。B组骨髓铁染色缺铁性贫血阳性37例,阴性43例;联合血常规指标显示缺铁性贫血阳性36例,阴性44例。联合血常规指标对缺铁性贫血的诊断准确度、敏感度、特异度分别为93.75%、91.89%、95.35%。A组确诊患者HB、MCV、MCH、MCHC水平低于C组,RBC/HB水平高于C组,差异有统计学意义(P<0.05);B组确诊患者HB、MCV、MCH、MCHC水平低于C组,RBC、RBC/HB、RDW水平高于C组,差异有统计学意义(P<0.05);A组确诊患者HB、RBC水平高于B组确诊患者,RDW水平低于B组确诊患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血常规检测用于鉴别诊断地中海贫血以及缺铁性贫血的价值较高,其中HB、RBC以及RDW三项指标能作为两类疾病鉴别诊断的重要参考指标。

关键词： β-地中海贫血   潮州地区   基因类型  

摘要： 目的:了解潮州地区β-地中海贫血的基因突变类型及构成比,为制定符合潮州地区实际情况的地中海贫血防控策略提供参考,同时为地中海贫血的遗传诊断和产前筛查提供准确的理论依据,以降低重症地中海贫血儿的出生率,提高潮州地区新生儿的出生质量。方法:地中海贫血基因检测样本收集自2018年1月至2020年12月期间在潮州市中心医院进行地中海贫血筛查的1511名志愿者。采用跨越式断裂点PCR(Gap-PCR)技术和反向点杂交法(Reverse Dot Blot)分别对提取的DNA样本进行检测,分析潮州地区β-地中海贫血的基因突变类型。结果:在1511份DNA样本中,检出β-地中海贫血样本220份,共有12种β-地中海贫血基因突变类型,其中αα/αα,β/654M和αα/αα,β/41-42M基因型最多,这两类基因型患者分别占β-地中海贫血患者总数的36.82%和30.00%。结论:潮州地区β-地中海贫血基因突变类型具有多样性。本研究可为地中海贫血的遗传诊断和产前筛查提供理论依据,并为潮州地区开展β-地中海贫血诊断和研究提供思路。

关键词： 胎儿   α-地中海贫血   大脑中动脉   收缩期峰值流速  

摘要： 目的探讨大脑中动脉收缩期峰值流速(MCA-PSV)对胎儿珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血,简称地贫)的预测价值。方法选取2021年1-9月于该院进行产前检查的夫妇双方,将经血液学检查为α-地贫基因携带者,经基因诊断证实为α-地贫胎儿的40例孕妇作为观察组,另选取同期在该院进行产前检查排除α-地贫健康胎儿的40例孕妇作为对照组。两组均采用彩色多普勒超声诊断仪测量MCA-PSV水平。比较对照组和观察组不同严重程度α-地贫胎儿的MCA-PSV水平,分析MCA-PSV水平与α-地贫胎儿的相关性;以基因诊断结果作为金标准,计算MCA-PSV水平预测重型α-地贫的效能。结果重型α-地贫MCA-PSV>中间型α-地贫>轻型α-地贫>对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);将MCA-PSV水平作为自变量,将是否发生α-地贫作为因变量,Pearson相关分析结果显示,MCA-PSV水平与α-地贫呈正相关(r=0.624,P<0.05);MCA-PSV水平预测重型α-地贫的灵敏度为75.00%(6/8),特异度为84.38%(27/32),阳性预测值为54.55%(6/11),阴性预测值为93.10%(27/29)。结论α-地贫胎儿的MCA-PSV水平异常升高,MCA-PSV水平与胎儿α-地贫的严重程度呈正相关,可为预测胎儿α-地贫的严重程度提供重要参考依据,临床应用简便易行。

关键词： 重型地中海贫血   造血干细胞移植   感染   移植物抗宿主病   生存率  

摘要： 背景:异基因造血干细胞移植是目前治疗重型地中海贫血的主要方法,但影响移植预后的危险因素尚不明确。目的:分析重型地中海贫血患儿异基因造血干细胞移植后常见并发症分布及死亡原因,探讨预后影响因素,为提高患儿生存率提供参考。方法:选择2013年9月至2019年9月在广州市妇女儿童医疗中心血液肿瘤科诊断为重型地中海贫血并同意接受异基因造血干细胞移植的257例患者,男172例,女85例,移植时中位年龄6岁,采用单因素比较存活患者组与死亡患者组接受移植时的基本资料及移植后并发症差异,总生存率采用Kaplan-Meier法分析,总生存率比较采用Log-rank检验。采用多因素Cox回归分析影响生存的因素。结果与结论:中位随访时间为29个月,无一例失访。①单因素分析结果显示,存活患者和死亡患者在危险度分级方面存在统计学差异(P=0.033),危险度分级高的患者移植后死亡风险增多;多因素分析结果显示,危险度分级和重症肺炎是重型地中海贫血患者造血干细胞移植后影响总生存率的独立危险因素(P<0.05)。②20例死亡患者中,重症肺炎伴呼吸衰竭13例,肠道Ⅳ度急性移植物抗宿主病2例,血小板低下致颅内出血1例,血小板低下伴急性肺出血1例,脓毒血症伴休克1例,重症肌无力1例。③17例死于移植后1年以内,3例患者因重症肺炎死于移植后1年以上。④移植后死亡患者闭塞性细支气管炎的发生率显著高于存活患者(P<0.0001)。⑤结果表明,感染及重度移植物抗宿主病是目前影响重型地中海贫血患者造血干细胞移植治疗后生存率的主要原因。移植后并发闭塞性细支气管炎的患者死亡风险增高。

关键词： 地中海贫血   铁过载   HFE突变基因  

摘要： 地中海贫血是一种常见的常染色体隐性遗传病,是由某个或多个珠蛋白基因异常引起一种或一种以上珠蛋白肽链合成减少或缺乏的溶血性贫血。地中海贫血长期的慢性溶血、贫血状态导致人体出现铁过载情况,从而引起心脏、肝脏、内分泌腺体、骨骼等多个组织器官功能障碍。已有相关研究表明HFE基因突变与地中海贫血铁代谢情况相关,本文主要从HFE基因突变机制、HFE突变基因与地中海贫血铁过载的关系来阐述H63D、C282Y和S65C三种类型HFE基因突变在地中海贫血中的研究进展,为后续祛铁治疗提供新的诊疗思路。

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血液检验   红细胞平均体积   血红细胞分布宽度  

摘要： 目的 研究血液检验对缺铁性贫血（IDA）与地中海贫血（THAL）的诊断鉴别作用。方法 选取2020年3月-2022年3月吉水县人民医院收治的80例贫血患者为研究对象，其中IDA患者40例设为IDA组；THAL患者40例设为THA组。另选取同期40例体检健康者设为健康组，3组均接受血液检测，比较其血红蛋白浓度（HGB）、红细胞计数（RBC）、红细胞平均体积（MCV）、血红细胞分布宽度（RDW）指标，分析其鉴别诊断价值。结果 IDA组、THAL组与健康组的HGB、RBC、MCV、RDW指标比较，差异有统计学意义（P<0.05）;IDA组HGB、RBC水平低于THAL组，MCV、RDW水平高于THAL组，差异有统计学意义（P<0.05）；经ROC曲线分析，HGB、RBC、MCV诊断IDA与THAL的AUC值比较，差异无统计学意义（P>0.05）；而RDW诊断IDA的AUC值大于THAL，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 血液检验对缺铁性贫血及地中海贫血具有积极检出作用，其HGB、RBC、MCV、RDW参数变化对二者诊断具有重要指导意义，且RDW鉴别作用最为显著。

关键词： 医疗器械   毛细管电泳仪   地中海贫血   图像处理   电泳缓冲液  

摘要： 医疗器械的发展水平对一个国家的医疗卫生事业起着至关重要的作用,也是提高人民生活水平的重要一环,国内医院使用的医疗设备大多从国外采购,价格昂贵且后期维护不便。本文通过对毛细管电泳仪核心技术进行研究,研发一台检测仪器以及与仪器适配的缓冲液,用于筛查地中海贫血病,打破相关仪器和试剂一直被国外企业垄断的局面,为国内医疗器械的发展注入一份力量。首先,毛细管电泳仪机械结构搭建。结合毛细管电泳的原理和地中海贫血病的致病特征,提出仪器的设计方案,使用三维绘图软件对仪器机械结构进行建模。其次,毛细管电泳仪控制系统设计。以STM32F407为主控器件,利用PID算法对散热风扇进行反馈控制,利用PWM波对移杯系统步进电机进行控制,选用高压电源实现0～50k V直流电压的输出,利用图像处理技术中的高斯滤波对CCD相机采集的电泳图像数据进行优化处理,利用Qt软件开发毛细管电泳用户软件界面。然后,毛细管电泳仪实验条件优化。主要包括毛细管内径大小、光源的选择、电泳电压的大小、进样量以及缓冲液p H,针对仪器容易出现毛细管堵塞问题提出了解决方案。最后,通过实验突破性地研发出毛细管电泳缓冲液,并以基因检测为“金标准”的成人血液样本进行电泳检测。检测结果表明:自研毛细管电泳仪以及电泳缓冲液对阴性血样、α-地中海贫血血样和β-地中海贫血血样检出效果良好,在毛细管电泳法筛查地中海贫血病方面具有较高的应用价值。

关键词： 第三代测序技术   地中海贫血   罕见变异   基因检测   产前诊断  

摘要： 目的:通过对比第三代测序技术与常规技术和高通量测序技术的地中海贫血基因检测结果,评估第三代测序技术在地中海贫血基因检测与产前诊断中的临床应用价值和可行性;对研究过程中检出的罕见变异进行血液学表型分析,为临床遗传咨询提供参考依据;总结江西地区基于第三代测序技术检出的地中海贫血变异类型,丰富本地区地中海贫血基因突变谱。方法:1、选取2019年10月至2022年10月于江西省妇幼保健院就诊的地中海贫血筛查阳性的402例受检者,采用第三代测序技术进行地中海贫血基因检测,其中319例同步选用常规技术(Gap-PCR、PCR-RDB)、余下83例同步选用高通量测序技术进行地中海贫血基因检测,对比第三代测序技术与这两种技术的基因检测结果与阳性检出率,并对研究过程中检出的罕见变异进行血液学表型分析,统计分析第三代测序技术检出的本地区地中海贫血变异类型。2、连续纳入2020年1月至2020年12月期间因夫妻双方携带同型地中海贫血基因于江西省妇幼保健院采用常规技术(Gap-PCR、PCR-RDB)进行地中海贫血产前诊断的40例高风险家庭,采用第三代测序技术回顾性分析孕妇羊水基因型,与常规技术基因检测结果进行对比。结果:1、402例地中海贫血筛查阳性的受检者中,第三代测序技术分别较常规技术(319例)/高通量测序技术(83例)多检出4.08%/2.41%的受检者携带地中海贫血基因,并多检出18种/4种基因变异类型。此外,对两种技术之间基因检测结果不一致的18例/4例样本采用Gap-PCR、Sanger测序进行验证,验证结果均与第三代测序技术检测结果相符,并对第三代测序技术额外检出的罕见变异携带者的血液学表型进行了分析。此外,第三代测序技术在402例受检者中,共检出47种变异类型,包括31种地贫变异类型。在检出的地中海贫血变异类型中,除临床常见的23种α-、β-地中海贫血变异外,第三代测序技术还额外检出5种致病性明确的α-、β-地中海贫血罕见变异、3种中性多态性位点以及5种未知致病性的变异。2、40例进行地中海贫血产前诊断的高风险家庭中,第三代测序技术与常规技术均准确检出30例胎儿携带地中海贫血基因,两种技术的阳性检出率及基因检测结果均完全一致。结论:1、在地中海贫血基因检测中,第三代测序技术较常规技术和高通量测序技术有更高的阳性检出率,可额外检出表型多样的罕见变异、复杂结构变异,准确区分HBA1/2高度同源基因,对临床地中海贫血基因检测具有重要价值。但检出的许多罕见变异的致病性尚不明确,须待进一步家系分析,给临床遗传咨询带来了巨大的挑战。2、在地中海贫血产前诊断中,第三代测序技术的检测准确性为100%,其可同时检测α、β珠蛋白基因全长,检测范围较常规技术更加广泛、全面,且无须提取羊水DNA和进行PCR扩增,减少了操作可能带来的污染,简化了流程,有望应用于地中海贫血产前诊断。

关键词： 罗沙司他   重组人促红细胞生成素   慢性肾衰竭   地中海贫血   铁代谢  

摘要： 目的:观察低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(罗沙司他胶囊)对慢性肾衰竭合并地中海贫血患者的临床效果及铁代谢指标变化的特点。方法:本研究为随机对照研究,选取海南医学院第二附属医院2020年8月至2022年8月收治的慢性肾衰竭同时合并有地中海贫血患者86例为研究对象,随机分成r Hu EPO组、罗沙司他组。r Hu EPO组给予重组人促红细胞生成素治疗,罗沙司他组给予罗沙司他胶囊治疗,经过12周治疗,对比两组4周、8周、12周的贫血指标包括:红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HB)、红细胞比积(HCT),铁代谢指标包括:总铁结合力(TIBC)、血清铁(SI)、铁蛋白(SF)、转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白饱和度(TSAT),对比两组治疗前后炎症指标包括白细胞数(WBC)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞沉降率(ESR)并记录不良反应发生情况。使用t检验及重复测量方差分析的统计学方法进行分析。结果:两组患者一般基线临床资料、治疗前临床化验指标无统计学意义(P<0.05);两组患者观察4周、8周、12周RBC、Hb、HCT均升高,随着治疗时间呈上升趋势(P<0.05),罗沙司他组RBC、Hb、HCT与r Hu EPO组相比,升高幅度相差增大(P<0.05)。罗沙司他组4周、8周、12周TIBC、SI、Tf、TSAT均升高,且呈上升趋势(P<0.05),SF呈下降趋势(P<0.05);r Hu EPO组4周、8周、12周SF、Tf、TSAT与治疗前数值相比,无显著差异(P>0.05);r Hu EPO组患者4周、8周TIBC、SI水平与治疗前数值相比,无显著差异(P>0.05),12周TIBC、SI水平与治疗前数值相比,较前升高(P<0.05);两组间相比,随着治疗时间延长,罗沙司他组患者TIBC、SI、Tf、TSAT水平升高与r Hu EPO组相差增大(P<0.05),罗沙司他组SF的下降幅度与r Hu EPO组相差增大(P<0.05)。罗沙司他组12周hs-CRP、ESR与治疗前相比较显著下降(P<0.05);r Hu EPO组hs-CRP、ESR治疗前后相比无明显差异(P>0.05)。罗沙司他组总不良反应发生率明显低于r Hu EPO组(P<0.05)。结论:慢性肾衰竭合并地中海贫血患者,总体存在铁利用障碍;罗沙司他能够有效地提高慢性肾衰竭合并地中海贫血患者的血红蛋白、提高铁的利用,改善炎症状态,且疗效优于r Hu EPO,总体不良反应发生率低于r Hu EPO。