关键词： 脾梗死   脾脓肿   地中海贫血   门静脉血栓   个性化护理  

摘要： 笔者总结1例脾脓肿伴地中海贫血患者并发门静脉血栓的围手术期管理经验,旨在为相关治疗提供参考。该患者经多学科全程管理,落实集束化抗感染方案,进行个性化血栓管理,关注患者心理健康,做好延续性护理,协助居家管理。患者经一系列治疗和围手术期管理后,病情好转,入院后42 d顺利出院。

关键词： β-地中海贫血   基因治疗   基因编辑技术   CRISPR/Cas9  

摘要： β-地中海贫血(β-地贫)是一种全球性的单基因遗传病,目前针对该病的治疗方法除造血干细胞移植外都是对症治疗,无法达到根治效果。基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病,达到根治疾病的目的。近年,随着基因编辑技术的发展,基因治疗越来越成熟完善,在β-地贫治疗中的应用也变得广泛。目前,基因编辑技术发展经历了4个阶段,分别为ZFN技术、TALEN技术、CRISPR/Cas9技术以及单碱基编辑技术。本综述将总结上述4种基因编辑技术在β-地贫治疗中的原理、研究、优缺点以及局限性,旨在优化β-地贫的治疗策略。

关键词： 地中海贫血   罕见α-地中海贫血   血红蛋白H病  

摘要： 目的分析血红蛋白(Hb)H病胎儿及患者的血液学、基因型的关系以及相关自然病程发展过程。方法采集2010-2022年在广西壮族自治区妇幼保健院就诊的1252例Hb H病胎儿及患者血样(包括174例胎儿脐带血,1062例>2岁患者外周血,16例罕见基因型Hb H病患者外周血),进行血液学及常规地中海贫血(地贫)基因型分析;另选择0~2岁Hb H 3.7、Hb H 4.2、Hb H CS和Hb H WS病患儿(n=278),采集外周血,检测红细胞发育变化趋势。采用多重探针杂交技术、微阵列比较基因组杂交技术联合一代Sanger测序对疑似罕见地贫患者进行基因突变检测。结果1062例>2岁的Hb H病患者中,基因缺失型(--/-α)占62.34%(662/1062),其中Hb H 3.7(--^(SEA)/-α^(3.7))、Hb H 4.2(--^(SEA)/-α^(42))较为常见,分别占42.28%(449/1062)和19.11%(203/1062);非基因缺失型(--/ααT或αTα/ααT)中,以Hb H CS(--^(SEA)/ααCS)、Hb H WS(--^(SEA)/ααWS)以及α^(CS)α/α^(CS)α为主,分别占16.85%(179/1062)、16.48%(175/1062)、1.98%(21/1062)。81.12%(537/662)的基因缺失型Hb H病患者表现为轻、中度贫血,Hb H病检出率范围为75%~80%。非基因缺失型中,Hb H WS病患者主要表现为轻度贫血(90%的患者血液Hb浓度>95 g/L),而Hb H CS和Hb H QS(--^(SEA)/ααQS)病患者则主要表现为中、重度贫血,患者外周血均能检出Hb H且含量普遍高于其他类型Hb H病患者。除Hb H CS和Hb H QS复合β-地贫时Hb A2值未显著升高外,其他类型Hb H病患者复合β-地贫时Hb A2值均升高(>3.5%)。各种类型Hb H病患者复合β-地贫时,均未检出Hb H峰。红细胞发育变化趋势检测结果显示,Hb H病患者红细胞计数较正常同龄人升高,而Hb、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)均低于正常同龄人(均P<0.05),并在6个月至1岁时降到最低;贫血程度严重的Hb H CS病患者,其MCV值升高明显(P<0.001)。Hb H病胎儿脐带血的检测结果显示,α^(CS)α/α^(CS)α胎儿宫内贫血严重,其次为Hb H QS和Hb H CS病胎儿;脐带血中Hb Bart’s含量与贫血严重程度呈负相关(rs=-0.58,P<0.001);Hb H病复合β-地贫时,胎儿贫血情况未见明显改善,Hb Bart′s含量未见明显变化(均P>0.05)。此外,基因缺失型罕见Hb H病患者中,以Hb H 21.9(-α21.9kb/--^(SEA))、Hb H 2.4(-α^2.4)/--^(SEA))常见;非基因缺失型罕见Hb H病患者中,ααAmsterdam-A1/--^(SEA)和ααHb G-Georgia/--^(SEA)均为首见。结论不同类型之间及相同类型在不同发育时期的Hb H病患者临床表现具有异质性。当Hb H病患者复合β-地贫时,基因缺失型患者表型有所改善,而非基因缺失型患者未见明显改变。相较于正常人,Hb H病患者血液Hb、MCV、MCH均降低且红细胞生理变化更为急剧。

关键词： 二次移植   单倍体造血干细胞移植   植入失败   急性白血病   地中海贫血   移植物抗宿主病   环磷酰胺   抗胸腺细胞球蛋白  

摘要： 目的探讨急性白血病患者首次单倍体造血干细胞移植后植入失败的二次移植治疗策略。方法2例急性白血病患者首次单倍体造血干细胞移植的2例供者均伴有地中海贫血,分别采集CD34+细胞2.57×10^(6)/kg和1.99×10^(6)/kg,首次单倍体造血干细胞移植植入失败。二次移植更换为非地中海贫血供者,分别采集CD34+细胞4.28×10^(6)/kg和5.75×10^(6)/kg,采用减低剂量氟达拉滨(Flu)+白消安(Bu)+抗胸腺细胞球蛋白(ATG)预处理方案行二次移植。结果2例患者二次移植中性粒细胞和血小板植入时间分别为+12 d和+10 d、+10 d和+10 d。截止至末次随访时间(分别为二次移植+1062 d、+265 d),2例患者原发病均完全缓解,无明显移植并发症。结论减低剂量预处理的二次移植能够成功治疗急性白血病单倍体造血干细胞移植植入失败。

关键词： 地中海贫血   基因型   重庆地区   儿童  

摘要： 目的:探讨重庆地区儿童地中海贫血基因检测阳性情况、基因型及分布特征。方法:对2011年1月至2022年12月重庆医科大学附属儿童医院就诊的28287例经血液学筛查疑似地中海贫血儿童进行常见α和β地中海贫血基因突变位点检测,分析检出率和地中海贫血携带者检出构成比的变化趋势及基因型分布情况。结果:在28287例疑似地中海贫血儿童中,共检测出15249例地中海贫血患者,阳性率为53.91%。α、β、αβ地中海贫血阳性率分别为22.41%(6340例)、30.43%(8609例)和1.06%(301例),中重型地贫阳性率为2.47%(698例)。2011年至2022年间随年龄增加各组α地中海贫血携带者检出构成比的线性回归k值分别为-0.002、0.004、0.006、0.010、0.012,而β地中海贫血分别为0.011、0.004、0.002、-0.001。共检出21种α地中海贫血基因型,其中α地中海贫血主要基因型为--SEA/αα,占比69.58%。共检测出46种β地中海贫血基因型,其中β地中海贫血主要基因型为CD17/βN、CD41-42/βN及IVS-Ⅱ-654/βN,占比分别为31.75%、27.92%、25.21%,一共为84.88%。结论:重庆地区儿童地中海贫血常见基因突变位点检测阳性率较高,中重型比例也较高。2011年至2022年间α地中海贫血携带者随年龄段增大检出率升高,而β地中海贫血降低,表明部分β地中海贫血患者基因诊断时间较晚。重庆地区儿童地中海贫血基因型集中在--SEA/αα、CD17/βN、CD41-42/βN及IVS-Ⅱ-654/βN,与重庆地区成人一致,与广东、广西等地贫高发区有差异。这些结果对于本地区地中海贫血的干预和预防具有重要意义。

关键词： 异常血红蛋白电泳   地中海贫血   缺铁性贫血   甲状腺功能异常   红细胞体积增大   异常血红蛋白病  

摘要： 目的:探讨血红蛋白电泳结果异常的可能原因。方法:收集成都医学院第一附属医院2018年9月至2021年7月5696例患者的血红蛋白电泳结果,并对异常结果及临床意义进行分析。结果:486例患者结果异常(占8.53%),其中300例HbA2增高,135例HbA2降低,44例单独F增高,7例有异常血红蛋白条带。486例患者中,地中海贫血基因阳性246例(阳性率50.62%),其中α地中海贫血29例,β地中海贫血208例,α合并β地中海贫血9例。在HbA2升高的患者中,68.67%为β地中海贫血引起,3.00%为α合并β地中海贫血引起,9.33%疑为红细胞体积增大引起,6.33%疑为甲状腺功能异常引起,12.67%疑为检测方法的不确定性引起。在HbA2降低的患者中,21.48%为α地中海贫血引起,60.00%为缺铁性贫血引起,8.15%疑为甲状腺功能异常引起,10.37%疑为检测方法的不确定性引起。F单独升高的患者,地中海贫血基因检测结果均为阴性,40.91%疑为红细胞体积增大引起,27.27%疑为遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症引起,29.55%疑为部分孕妇特殊生理状况引起,2.27%疑为甲状腺功能亢进引起。7例患者检测到异常血红蛋白条带,其中4例血红蛋白D,2例血红蛋白E,1例血红蛋白J。结论:地中海贫血、缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血与非重型再生障碍性贫血等红细胞体积增大的贫血、甲状腺功能异常、遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症、异常血红蛋白病、检测方法的不确定性均是血红蛋白电泳结果异常的重要原因。在临床工作中应综合分析患者的各项指标来判断可能的原因。

关键词： β-地中海贫血   β-珠蛋白基因突变   显性突变  

摘要： 目的:对2例罕见的显性β-地中海贫血患儿的基因突变与临床特征进行分析和比较。方法:筛查2022年1—12月在广西医科大学第一附属医院进行地中海贫血检查的病例。采用血细胞分析仪进行血常规检查,高效液相色谱法(HPLC)进行血红蛋白(Hb)分析;跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)、荧光PCR熔解曲线法(FCMA)和DNA测序进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因分析。结果:发现2例罕见β-地中海贫血患儿。病例1为先证者,男性,2岁,检出β-珠蛋白基因CD28(CTG>CGG,HBB:c.86T>G)杂合子,临床表现为中度贫血,血常规结果显示红细胞计数(RBC)3.42×10^(12)/L,Hb 73.00 g/L,红细胞平均容积(MCV)69.00 fL,红细胞平均血红蛋白(MCH)21.30 pg,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)308.00 g/L和红细胞体积分布宽度(RDW)22.00%;Hb分析示HbA_(2)4.80%,Hb F 7.60%。病例2为其姐姐,也是CD28(CTG>CGG)突变杂合子,中度贫血,血常规结果示RBC 5.25×10^(12)/L,Hb 88.00 g/L,MCV 54.70 fL,MCH 16.80 pg,MCHC 307.00 g/L和RDW 17.20%;Hb分析示HbA_(2)5.20%,Hb F 1.10%。结论:首次在中国人群中发现罕见β-珠蛋白基因CD28(CTG>CGG)(HBB:c.86T>G)突变导致显性β-地中海贫血,临床表现为中度贫血,提示在临床诊疗和遗传咨询中要重视此类型突变。

关键词： β-地中海贫血   随州   孕妇   基因检测   基因型   血常规参数  

摘要： 目的:探讨湖北随州地区孕妇β-地中海贫血基因型分布特征及其血常规参数变异情况。方法:收集进行地中海贫血筛查的孕妇2772例,对β-地中海贫血血液学表型阳性者进行β-地中海贫血基因检测。将检出β-地中海贫血基因突变的孕妇纳入β-地中海贫血组,并按1∶1比例随机选取非地中海贫血孕妇纳入非地中海贫血组。比较β-地中海贫血组与非地中海贫血组血常规参数。比较β+突变和β0突变孕妇血常规参数。结果:2772例接受地中海贫血筛查的孕妇中,经血常规参数分析初筛阳性362例(13.06%),进一步血红蛋白(Hb)电泳分析发现β-地中海贫血血液学表型阳性91例(3.28%)。β-地中海贫血基因检测发现82例(2.96%)存在β-地中海贫血基因突变,其中4种β+突变(IVS-Ⅱ-654、CAP、-28、-29)共37例(45.12%),5种β0突变(CD71-72、CD27-28、CD41-42、CD17、CD14-15)共45例(54.88%),占比最高的3种基因型分别是IVS-Ⅱ-654(36.59%)、CD41-42(23.17%)和CD17(18.29%)。β-地中海贫血组中红细胞分布宽度(RDW)≥15%、Hb<110 g/L、平均红细胞体积(MCV)<82 fl、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)<27 pg以及MCV<82 fl和(或)MCH<27 pg的孕妇比例显著高于非地中海贫血组(均P<0.05)。β+突变组RDW显著低于β0突变组,而Hb、MCV和MCH显著高于β0突变组(均P<0.05)。结论:湖北随州地区孕妇β-地中海贫血基因型复杂多样,以IVS-Ⅱ-654和CD41-42突变为主,且不同基因型的血液学参数具有显著差异,联合血液学筛查具有一定的经济效益。

关键词： 外周血干细胞   动员   采集   不超过20公斤   重型地中海贫血  

摘要： 目的评价体重不超过20公斤(kg)的重型地中海贫血(TM)患儿外周血干细胞(PBSCs)动员和采集的安全性和有效性。方法回顾性分析2013年1月至2020年12月本中心170例体重不超过20 kg的TM患儿的PBSCs动员和采集数据。通过采集过程中不良反应的发生情况评估安全性,通过采集的CD34细胞数评估有效性。结果对170例体重不超过20 kg的TM患儿进行171次PBSCs采集,平均年龄(4.98±1.53)岁,平均体重(17.30±2.18)kg。第1次采集成功率99.41%(169/170),获得的平均CD34^(+)细胞数为(5.88±4.23)×10^(9)/kg。对于体重≤20 kg的TM患儿,采集前血红蛋白(Hb)至少在60 g/L是安全可行的。粒细胞集落刺激因子(G⁃CSF)动员最常见的不良反应是骨痛,发生率为7.65%(13/170),高于本院健康儿童供者;采集中最常见的不良反应是股静脉穿刺部位疼痛(6.47%,11/170)和进液低压(2.92%,5/170)。所有患儿均未发生与PBSCs动员、中心静脉导管(CVC)放置或单采手术相关的严重并发症。结论体重≤20 kg的TM患儿通过***血细胞分离机采集PBSCs是安全且有效的。

关键词： 融合基因   地中海贫血   基因检测   Gap-PCR法   高通量测序技术  

摘要： 目的探讨目前分子诊断常规方法在α-地中海贫血融合基因检测中的应用。方法通过缺口PCR(gap-PCR)、PCR-导流杂交法、反向点杂交法等常规临床地中海贫血基因检测试剂盒以及高通量测序技术检测昆明市妇幼保健院2020年1月1日至12月31日婚育体检中心1例α_(2)珠蛋白融合基因样本。结果PCR-导流杂交法在-α^(4.2)突变位点有弱显影;反向点杂交法在-α^(4.2)突变位点有明显显影,gap-PCR法未出现-α^(4.2)缺失型阳性电泳条带,gap-PCR法见融合基因条带;α2珠蛋白基因测序结果显示有7个融合基因突变位点。结论Gap-PCR法可初步检测α-地中海贫血融合基因,高通量测序技术可准确检测α-地中海贫血融合基因突变位置。