摘要： 脊髓灰质炎是由脊髓灰质炎病毒引起的严重危害儿童健康的急性传染病,脊髓灰质炎病毒有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种血清型,主要侵犯中枢神经系统的运动神经细胞,以脊髓前角运动神经元损害为主.患者多为1岁～6岁儿童,主要症状是发热,全身不适,严重时肢体疼痛,发生分布不规则和轻重不等的弛缓性瘫痪,俗称小儿麻痹症.目前尚无特异的治疗脊髓灰质炎病毒感染的药物,接种脊灰疫苗是预防该病最经济有效的手段.随着口服脊灰减毒活疫苗推广,全球消灭脊灰行动取得了令人瞩目的成绩,我国也于2000年实现无脊灰目标,但我国周边其他国家仍然存在脊灰野病毒病例,存在野病毒输入与传播的风险,因此脊灰疫苗的预防接种尤为重要.

关键词： 脑卒中后   磁刺激   经颅直流电刺激   帕金森病   中国康复理论与实践   卒中后抑郁   脊髓灰质炎后综合征   镜像疗法  

关键词： poliovirus   2C   晶体结构   锌指   抗病毒  

摘要： 脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)是脊髓灰质炎的病原体,可侵犯中枢神经系统,损害脊髓前角运动神经细胞。PV属于微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus,EV),它的基因可以编码一个约250 kDa的前体蛋白(polyprotein)。病毒前体蛋白被自身的蛋白酶2A和3C切割形成11个成熟的具有功能的蛋白,其中包括4种结构蛋白(衣壳蛋白):VPO,VP1和VP3,以及7种非结构蛋白:2A,2B,2C,3A,3B,3C和3D。非结构蛋白2C及其前体蛋白2BC介导了病毒感染的细胞中膜组分的变构与基于膜结构的病毒复制复合物的组装,此外,还参与了包括病毒的脱衣壳、天然免疫逃逸和病毒衣壳的形成等病毒生命周期中的重要过程。2017年关洪鑫博士等解析了EV71 2C 116-329的结构,这项研究成果填补了多年来2C结构信息方面的空缺。本课题成功解析了 PV2C116-329的2.55A的高分辨率晶体结构,这是我们继EV71后解析的第二个微小核糖核酸病毒科的2C蛋白结构。解析的2C蛋白结构当中包含三个subdomain:ATPase结构域,锌指结构域和一个长的C末端两亲性α螺旋(或pocket binding domain,PBD)。其中ATPase结构域和锌指结构域之间的疏水氨基酸形成了一个疏水性的“口袋(pocket)”。这两个结构的不同之处在于锌指结构的构造,EV71的锌指有三个配体,而PV的锌指结构有四个配体。与EV712C蛋白的结构相似的是,PV 2C的C末端两亲性α螺旋通过疏水相互作用与相邻的一个2C蛋白的疏水性“口袋”相互结合,在晶体中同样是以多聚体的形式存在;与此同时分子筛柱层析的实验结果表明PV2C在溶液中是以四聚体的形式存在的。我们挑选了参与构成三个结构域的关键氨基酸进行单点突变,检测其突变体的ATPase酶活性,结果表明这种寡聚化形式是2C蛋白发挥ATPase活性的结构前提。我们知道AAA+ATPase超家族的蛋白通常会形成环状六聚体结构来行使功能,2C蛋白属于该家族成员,并且电镜学研究也表明2C蛋白可以形成环状结构,因此我们推测PV 2C也会形成环状六聚体结构。我们以SV40 Large TAntigen(LTAg)的六聚体为模版,参考EV71 2C 116-329的六聚体模型,模拟构建了 PV2C的六聚体模型。并且我们以该模型为模版,把之前发现的所有的与功能相关的位点以及抑制剂抗性位点都定位到了这个六聚体模型上,这便为进一步深入探讨2C的功能提供了重要的结构生物学基础,同时这个研究成果也将为设计靶向2C抑制剂研发提供了重要的科学依据。

关键词： 减毒活疫苗   OPV   IPV   脊髓灰质炎病毒   疫苗接种  

摘要： 这几年,国内每隔一段时间就会出现疫苗风波,一些妖魔化疫苗的言论就乘机随之传播开了。最近在网上流传一个说法,说是一位经济学家说的,据说中国疫苗接种非常落后,还在用减毒活疫苗,而国外十几年前就全部改成灭活疫苗了,安全性好太多了。很多人问我是不是真的如此?经济学家对疫苗的了解未必比一般人强。但是很多人在科学问题上不听专业人士的,却相信名人。不管是经济学家、电视主持人还是所谓

关键词： 婴儿痉挛症   预防接种   分析  

摘要： 1 基本情况 患儿,女,2016年5月9日出生,散居儿童.第二胎第二产,37周剖腹产,出生体重3500克,无窒息抢救史,Apgar评分1分钟9分,5分钟10分.出生后满月以及3月龄健康检查均无异常.出生后接种卡介苗1剂、乙肝疫苗2剂、脊髓灰质炎疫苗减毒活疫苗1剂,接种后无不良反应.否认传染病、外伤手术、血液制品使用史;否认药物、食物过敏史.父母体健、非近亲结婚.母亲孕期血糖偏高(空腹5.7mmol/L),给予控制饮食后好转.无“癫痫”家族史,无家族性遗传病或传染病史.

关键词： 脊髓灰质炎   免疫策略   卫生经济学评价  

摘要： 目的评价浙江省2016年实施脊髓灰质炎(脊灰)疫苗免疫新策略后的成本效益。方法以浙江省2016年人口为基数,以不接种策略为参照,采用成本效果比(CER)、效益成本比(BCR)和净收益(NB)等指标比较脊灰疫苗免疫新策略和原策略的成本效益,并通过调整疾病成本、疫苗价格、贴现率和接种成本进行敏感性分析。结果脊灰疫苗免疫新策略的CER发病为1∶5.27(例/万元),CER死亡为1∶181.37(例/万元),BCR为12.26,NB为79 666.22万元;原策略的CER发病为1∶3.29(例/万元),CER死亡为1∶113.39(例/万元),BCR为19.58,NB为82 317.53万元。敏感性分析结果显示,原策略和新策略的卫生经济学评价效果一致,BCR变化幅度≤25%;疾病负担变化引起的BCR变化最大,疾病负担(80%~120%)调整后,原策略BCR变化在15.66~23.50之间,新策略BCR变化在9.81~14.71之间。结论实施脊灰疫苗免疫新策略是现阶段全球消灭脊灰的客观要求,新策略的成本效益略低于原策略,但仍具有较好的卫生经济学意义。

关键词： 脊髓灰质炎   二价脊髓灰质炎减毒活疫苗   基础免疫   疫苗效果   疫苗效价  

摘要： 目的了解二价脊髓灰质炎(脊灰)减毒活疫苗(b OPV)引入前后北京市2014年和2016年不同基础免疫程序免疫效果和疫苗效价。方法 2014年和2016年脊灰疫苗基础免疫程序分别为3剂三价脊灰减毒活疫苗(t OPV)全程免疫和1剂脊灰灭活疫苗(IPV)与2剂二价脊灰减毒活疫苗(b OPV)序贯免疫,分别在北京市两个区选择完成基础免疫后4-8周的婴儿,采集血标本以检测脊灰病毒中和抗体,同时采集不同疫苗储运环节的疫苗标本以检测疫苗效价。结果 2014年和2016年分别调查儿童72人和68人。2014年基础免疫后Ⅰ、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体阳性率分别为98.61%和100%,抗体滴度(1∶)[中位数(四分位数间距)]分别为1 536(1 024-1 536)、1 536(512-1 536);2016年基础免疫后Ⅰ型、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体阳性率均为100%,抗体滴度(1∶)分别为1 024(512-1 536)、1 536(1 024-1 536)。2014年和2016年Ⅰ、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体分布均有显著性差异(Ⅰ型:χ2=8.77,P=0.038;Ⅲ型:χ2=16.76,P=0.001)。2014年t OPV的平均效价为6.1±0.1Lg CCID50/剂,2016年b OPV的平均效价为6.9±0.2Lg CCID50/剂(t=-7.76,P<0.001)。结论新疫苗b OPV引入后,IPV-b OPV序贯免疫程序的基础免疫效果与引入前的t OPV全程和IPV-t OPV序贯免疫程序效果一样好;疫苗储运各环节疫苗效价均合格,冷链运转良好。

关键词： 脊髓灰质炎   环境监测   污水   肠道病毒  

摘要： 目的通过对2013-2015年黑龙江省多地环境污水的持续监测,分析脊灰病毒在外环境中的流行变化趋势,对疫苗衍生株及野病毒的流行做出预警。方法选择哈尔滨市污水厂、双城市污水厂作为长期固定监测点,另选定多处季节监测点,每月在污水厂入水口(未经过处理)采集1L污水作为样本。浓缩后在L20B、RD、HEp-2等三种细胞上培养,鉴定Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊灰病毒或非脊灰肠道病毒。结果共采集污水样本94份,其中检测到脊灰病毒的污水有51份,阳性率为54.3%。分离出脊灰病毒208株,其中Ⅰ型22株,Ⅱ型95株,Ⅲ型87株,混合型4株;疫苗高变异株共18株,Ⅱ型脊灰疫苗衍生株1株;非脊灰肠道病毒分离到243株。结论脊灰病毒在复制过程中易发生重组和变异,减毒位点的突变可能引起病毒毒力回升。环境监测可以提早发现脊灰病毒的变化趋势,持续的外环境监测可以对疾病暴发做出预警。

关键词： 聚合酶链式反应和限制性内切酶酶切技术作突变分析   脊髓灰质炎病毒   疫苗   荧光标记   突变率  

摘要： 目的使用CY5荧光标记引物建立定量检测I型Sabin株脊髓灰质炎病毒480-A和525-C突变率的MAPREC。方法提取I型Sabin株脊髓灰质炎病毒样品RNA,反转录合成c DNA后,进行非对称PCR扩增以生成单链DNA,之后采用CY5荧光标记引物进行一步扩增反应以合成双链产物,以DNA内切酶Dde I和Nci I酶切后电泳分离,获取荧光信号,计算样品的突变率。检测4个国际标准品(100%DNA突变标准品、IS DNA标准品、LMVR标准品和HMVR标准品)的突变率,重复5次,验证方法的准确性和精密度,并进行初步应用。结果使用CY5荧光标记引物,建立了定量检测I型Sabin株脊髓灰质炎病毒480-A和525-C突变率的MAPREC。100%DNA突变标准品、IS DNA标准品、LMVR标准品以及HMVR标准品的标示值分别为100.00%、2.00%、1.84%、2.56%,检测结果分别为95.09%、2.06%、1.45%、1.92%,各标准品的实验间CV值均<15%。I型Sabin株口服脊髓灰质炎减毒活疫苗工作种子、单次收获液和原液的突变率为1.05%~1.22%,批间一致性良好。结论初步建立了基于荧光素标记的MAPREC,可以代替同位素法进行I型Sabin株脊髓灰质炎病毒突变率的定量检测。

关键词： 急性弛缓性麻痹   非脊髓灰质炎肠道病毒   分子流行病学  

摘要： 目的了解非脊髓灰质炎(脊灰)肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)的型别分布及分子进化特征。方法对2011-2014年从云南省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例中分离到的148株NPEV进行VP1完整编码区核苷酸的扩增与序列测定。所获得的云南地方株基因序列与各基因型原型株进行核苷酸与氨基酸同源性比较,并与Gen Bank中选取的代表株构建系统进化树。结果在148株NPEV分离株中,肠道病毒(Enterovirus,EV)A组(EV-A)、EV-B、EV-C分别占31.1%(46株,8个血清型)、64.9%(96株,27个血清型)、4.1%(6株,3个血清型);基因进化树显示,各种血清型病毒株与对应原型株及代表株聚集;除埃可病毒10型(E-10)和EV-C96型外,云南地方株与原型株位于不同分支。在4年的流行过程中,同一个型别的分离株之间的遗传变异程度最高的是EV-C96、E-18和E-5,分别达到21.5%、21.3%和20.4%。结论云南省存在EV多个型别的循环,需持续性监测和探索EV分子流行病学和进化规律。