关键词： 脊髓灰质炎病毒   运动神经细胞   接种不良反应   中枢神经系统   OPV   免疫规划   预防接种   神经毒性  

摘要： 脊髓灰质炎病毒可以引起脊髓灰质炎, 俗称"小儿麻痹症",常侵犯中枢神经系统,损害脊髓前角运动神经细胞,导致肢体松弛性麻痹,多见于5岁以下儿童,属于急性传染病,需通过接种疫苗进行预防[1]. 脊髓灰质炎病毒按抗原性不同可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,由于Ⅱ型成分自2015年宣布根除,且它可以在复制中经历基因的改变,导致其神经毒性回升而引起脊髓灰质炎疫苗相关病例(VAPP), 根据世界卫生组织(WHO)《全球消灭脊髓灰质炎终结战略计划2013—2018》[2],在国家统一部署下, 山西省从2016年5月起使用二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bOPV)代替三价脊髓灰质炎减毒活疫苗(tOPV),同时引入至少一剂次脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)[3].在bOPV应用于免疫规划过程的初始阶段, 对适龄儿童接种bOPV后的不良反应情况进行监测并开展预防接种安全性评价是非常有必要的[4],本研究对接种bOPV后的不良反应调查数据进行分析,为指导疫苗的安全使用提供参考.

关键词： 脊髓灰质炎   脊灰疫苗   野病毒   常规免疫   OPV   接种率   补充免疫活动   糖丸  

摘要： 20世纪60年代起,我国开始推广接种口服脊灰减毒活疫苗(OPV),也就是大家熟知的“糖丸”。通过提高常规免疫的接种率并开展脊灰疫苗补充免疫活动,我国的脊灰发病数大幅下降。上海市最后1例本土野病毒病例发生于1987年,我国自1994年以来已无本土野病毒引起的脊灰病例,并于2000年通过世界卫生组织认证,实现了无脊灰目标。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   密码子   密码子使用偏好性   自然选择  

摘要： 目的 分析Ⅰ型脊髓灰质炎病毒(简称脊灰病毒)基因密码子使用偏好性。方法 从NCBI基因数据库(GenBank)检索并筛选出40条Ⅰ型脊灰病毒株的基因信息,计算其相对同义密码子使用度(RSCU)值、有效密码子数(ENc)值。将Ⅰ型脊灰病毒基因中碱基C和G位于第三位的密码子占所有密码子的百分比[(C+G)3%]与ENc值进行关联性分析,绘制散点图,并与(C+G)3%标准曲线进行比较。采用主成分分析法对Ⅰ型脊灰病毒基因密码子的RSCU值进行分析,并利用分析获得的主因子绘制散点图,观察不同时间和地域的Ⅰ型脊灰病毒基因密码子使用偏好性。结果 Ⅰ型脊灰病毒基因密码子AGA、AGG、CCA、UCA和GUG的RSCU值均≥1.5,密码子GCG、CGA、CGG、CGC、UCG和ACG的RSCU值均≤0.5。Ⅰ型脊灰病毒的ENc平均值为53.633。40株Ⅰ型脊灰病毒毒株均位于(C+G)3%标准曲线以下。2009年之前分离出来的毒株均位于图的下方,2009年之后分离于不同国家或地区的毒株分别聚集于图的一处。结论 Ⅰ型脊灰病毒在AGA、AGG、CCA、UCA、GUG等密码子的使用上偏好性较强,在GCG、CGA、CGG、CGC、UCG、ACG等密码子的使用上偏好性较弱。Ⅰ型脊灰病毒在密码子使用偏好性上处于较弱水平。自然选择在Ⅰ型脊灰病毒基因密码子使用偏好性上起主要作用,不同时间和地域的Ⅰ型脊灰病毒基因密码子使用模式差异较大。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   疫苗   减毒   神经毒力   序列分析   RNA   动物实验  

摘要： 目的研究PCR和限制性内切酶突变分析(mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage,MAPREC)技术和猴体神经毒力试验(monkey neurovirulence test,MNVT)评价同一批Ⅰ型Sabin株脊髓灰质炎(脊灰)病毒神经毒力的结果差异.方法采用MAPREC技术,检测Ⅰ型Sabin株脊灰病毒神经毒力关键位点480和525位点突变率;采用MNVT病理切片分析,评价Ⅰ型Sabin株脊灰病毒神经毒力.结果 MAPREC检测待测样品核酸480和525位点突变率均值为0.460%,低于高突变参考品的1.288%.MNVT切片结果分析表明,有效猴病变分值差合格.结论对同一批样品,MAPREC与MNVT分析结果一致.

关键词： 脊髓灰质炎病毒疫苗   口服   脊髓灰质炎病毒   药物稳定性  

摘要： 目的评价口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的稳定性.方法将3批疫苗直立和倒立分别于-20℃以下存放30个月、(5±3)℃存放15个月、开瓶后(5±3)℃(直立)存放28 d、(25±2)℃存放5周、(37±2)℃存放5 d,另外将疫苗冻融7次,检测病毒滴度及其他疫苗稳定性主要指标.结果疫苗于-20℃以下存放30个月、(5±3)℃存放15个月、开瓶后(5±3)℃存放28 d、(25±2)℃存放4周、(37±2)℃存放4 d,以及冻融6次,总病毒滴度≥每0.1毫升6.18 lg半数细胞培养感染量(50%cell culture infective dose,CCID50)、Ⅰ型病毒滴度≥6.0 lgCCID50/0.1 ml、Ⅲ型病毒滴度≥5.6 lgCCID50/0.1 ml,均符合标准要求(总病毒和Ⅰ、Ⅲ型病毒滴度应分别不低于6.12、6.0、5.5 lgCCID50/0.1 ml).疫苗于(37±2)℃放置2 d的热稳定性试验显示,病毒滴度下降≤0.50 lgCCID50/0.1 ml,符合标准要求(不高于0.50 lgCCID50/0.1 ml).其他各项稳定性指标检查也均合格.结论口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗在本研究条件下稳定性良好.

关键词： 脊髓灰质炎病毒疫苗   灭活   D抗原   解吸附剂  

摘要： 目的建立并初步验证吸附DTaP-脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)(DTaP-IPV)的D抗原检测预处理解吸附方法.方法选用4种不同解吸附剂,在相同条件下对DTaP-IPV进行解吸附,用间接ELISA检测IPV D抗原.根据各型D抗原的检测结果,确定最适解吸附剂和解吸附条件,并对建立的方法进行初步验证.结果对分别用4种解吸附剂处理的同批疫苗检测D抗原显示,乙二胺四乙酸二钠(ethylenediamine tetraacetic acid disodium,EDTA-2Na)解吸附剂和200 g/L柠檬酸三钠解吸附剂的解离效果好于另2种解吸附剂.进一步对解离效果较好的2种解吸附剂进行作用时间和温度研究显示,EDTA-2Na解吸附剂于25℃处理16~20 h的解离效果最好,IPVⅠ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原的回收率分别为102%、101%、103%.建立的方法的重复性和中间精密度良好,经该法解吸附的DTaP-IPV的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原检测结果的变异系数均小于10%.结论建立的解吸附方法能有效解吸附DTaP-IPV,可用于DTaP-IPV D抗原检测预处理.

关键词： Sabin株   脊髓灰质炎   疫苗   渗透压  

摘要： 目的分析Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)渗透压的摩尔浓度。方法选取本所2016~2018年1季度生产的92批次Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)[inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strains(Vero cells),sIPV],采用渗透压摩尔浓度测定仪检测其渗透压摩尔浓度,并对检测数据进行正态性检验。结果 2016~2018年生产的92批sIPV渗透压摩尔浓度数据符合正态分布(P> 0. 05),渗透压摩尔浓度均值为330. 38 mOsmol/kg,标准差为9. 38 mOsmol/kg。生产初期(2016年)与现阶段(2017~2018年)生产的sIPV渗透压摩尔浓度差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 sIPV渗透压摩尔浓度变化趋于稳定状态,本研究为该产品渗透压摩尔浓度限度标准的制定提供了实验依据。

关键词： 环境监测   Ⅱ型疫苗衍生脊髓灰质炎病毒   无脊髓灰质炎状态  

摘要： 目的对新疆维吾尔自治区外环境污水中分离到的1株Ⅱ型疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Vaccine derived poliovirus,VDPV)进行鉴定和分析。方法 2018年4-9月对新疆乌鲁木齐市每月定期采集的环境污水标本进行病毒分离,对脊灰病毒(Poliovirus,PV)分离株采用实时荧光定量RT-PCR方法进行型内鉴定,对非疫苗类似株PV进行VP1区核苷酸序列分析。结果 2018年4-9月共采集乌鲁木齐市环境污水标本12份,从6份标本中分离到54株PV,其中4月份1株PV鉴定为Ⅱ型VDPV,与中国既往发现的Ⅱ型VDPV序列和GenBank中Ⅱ型VDPV序列均不同源。连续3个月的环境污水监测没有发现遗传学相关的VDPV,该Ⅱ型VDPV最终分类为来源不确定的VDPV。启动Ⅱ型VDPV事件的三级应急响应后,后期的连续监测未再检测到Ⅱ型PV,应急响应终止。结论新疆环境污水中检出Ⅱ型VDPV表明环境监测对于维持无脊灰的重要性,为及时发现VDPV和脊灰野病毒的输入提供了预测预警。

关键词： 脊髓灰质炎病毒I型   抗体检测   胶体金试纸条  

摘要： 目的:为研制快速检测脊髓灰质炎病毒I型抗体的胶体金试纸条.方法:以辛酸-硫酸铵沉淀法纯化脊髓灰质炎病毒I型单克隆抗体,用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,胶体金标记单抗,再结合脊灰病毒抗原形成复合物,固定于金标垫上,将鼠抗人IgG和羊抗鼠IgG分别包被于试纸条的T(检测线)处和C(质控线)处,应用该试纸条进行性能检测.结果:以已知的脊灰病毒I型阳性血清作为检测样品,试纸条检测的灵敏度为180;特异性试验证明该试纸条与甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、麻疹病毒抗体阳性血清没有交叉反应;检测结果与脊灰病毒I型疫苗抗体检测试剂盒(ELISA)试验的符合率为86.7%.结论:该试纸条检测脊灰病毒I型的抗体水平具有较好的特异性与灵敏性,适用于大规模临床血清抗体水平检测,具有良好的应用前景.

关键词： 脊髓灰质炎灭活疫苗   脊髓灰质炎减毒活疫苗   免疫效果  

摘要： 目的 评价首剂脊髓灰质炎(脊灰)灭活疫苗(IPV)与二价口服脊灰减毒活疫苗(bOPV)序贯基础免疫程序的效果。方法 采用分层随机抽样方法选取重庆市脊灰基础免疫适龄儿童,分为实验1组(SG1)、实验2组(SG2)、对照组(CG),分别按Salk株IPV(IPVSalk)-bOPV-bOPV、Sabin株IPV(IPVSabin)-bOPV-bOPV、三价口服脊灰减毒活疫苗(tOPV)-bOPV-bOPV序贯程序完成3剂脊灰疫苗基础免疫,其中SG1和SG2组IPV从2018年8月1日开始接种,CG组tOPV于2016年4月1-30日接种,在基础免疫完成后1-3个月检测儿童血清脊灰中和抗体。结果 SG1、SG2、CG组分别纳入儿童335名、358名、334名。完成脊灰疫苗基础免疫后,各组I型脊灰抗体保护率分别为99.70%、99.70%、98.50%(Fisher精确概率法,SG1与CG:P=0.12;SG2与CG:P=0.11;SG1与SG2:P=1.00),II型分别为83.28%、74.58%、98.80%(χ^2=49.34,P=0.00;χ^2=85.59,P=0.00;χ^2=7.84,P=0.01),III型分别为99.40%、100%、97.90%(Fisher精确概率法,P=0.11;P=0.01;P=0.23)。结论 实验组儿童I型和III型脊灰中和抗体保持较高水平,首剂IPV与bOPV序贯免疫程序效果良好。