关键词： 氯化铯   蔗糖   碘克沙醇   密度梯度离心   空心颗粒   实心颗粒   纯化  

摘要： 目的比较3种不同密度梯度离心方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。方法选择蔗糖密度梯度离心、氯化铯密度梯度离心、Optiprep(碘克沙醇溶液)密度梯度离心方法,对脊髓灰质炎病毒进行纯化,抽取离心之后的蛋白条带,通过计算蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察,评价其对病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。结果病毒液经蔗糖、氯化铯和Optiprep 3种介质超速离心,均能分离空心颗粒和实心颗粒。氯化铯密度梯度离心法蛋白回收率优于Optiprep及蔗糖密度梯度离心法;Optiprep密度梯度离心法蛋白纯度优于氯化铯及蔗糖密度梯度离心法。结论通过蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察初步评价了3种方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒和实心颗粒的分离效果,为脊髓灰质炎病毒分离纯化提供了参考。

关键词： 脊髓灰质炎   脊髓灰质炎病毒   消灭   封存   泄露   认证  

摘要： 在消灭特定型别野生脊髓灰质炎(脊灰)病毒后,源自保存脊灰病毒设施泄漏的病毒,会增加已经消灭病毒在人群中重新传播的风险。中国目前尚未制定封存脊灰病毒的完整方案,封存工作的进展滞后于全球的要求。为了在中国最大程度地降低脊灰病毒泄露的风险,相关权威机构需要依据国家法规和部门规章,登记清册脊灰病毒并评价工作质量,建立机制,定期更新持有Sabin株脊灰病毒或潜在感染性材料清单;销毁非必需设施保存的Ⅱ型Sabin株脊灰病毒和潜在感染性材料;重点关注必需设施持有的脊灰病毒,建立国家脊灰病毒封存监管机构认证的必需设施。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   北京协和医学院   顾方舟   中国医学科学院   人的生命   浙江宁波   无脊髓灰质炎   科技攻关  

摘要： 顾方舟是我国病毒学家,脊髓灰质炎疫苗研发生产的拓荒者、科技攻关的先驱者,为实现我国全面消灭脊髓灰质炎奉献了一生。他研发的脊髓灰质炎疫苗“糖丸”,护佑了几代中国人的生命健康,使中国进入无脊髓灰质炎时代。顾方舟,1926年6月生,浙江宁波人,中国医学科学院北京协和医学院原院校长、研究员。1955年,江苏南通暴发大规模的脊髓灰质炎疫情,随后疫情迅速蔓延。顾方舟临危受命,开始了脊髓灰质炎疫苗的研究工作。

关键词： 脊髓灰质炎   免疫成功率   抗体水平   监测  

摘要： 目的了解北京市顺义区脊髓灰质炎疫苗基础成功率和抗体水平。方法采用随机抽样的方法抽取3个乡镇街道作为调查点,选择符合条件的47例儿童,采用微量中和实验法测定脊髓灰质炎中和抗体,中和抗体≥1∶4判断阳性。结果47例儿童的脊灰Ⅰ型、Ⅲ型抗体阳性率均为100%,脊灰病毒中和抗体平均滴度分别为Ⅰ型1∶512(1∶512~1∶1024)、Ⅲ型1∶512(1∶512~1∶1024)。Ⅰ型和Ⅲ型脊灰病毒中和抗体分布差异无统计学意义(P>0.05),不同调查点、男女和是否及时接种的Ⅰ型、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体平均滴度的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论引入bOPV后IPV-b OPV序贯免疫程序的基础免疫效果良好。

关键词： 无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗   免疫   感染   保护效果  

摘要： 目的观察候选无细胞百白破-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)在大鼠中的免疫保护效果,为疫苗临床前研究提供依据。方法将候选疫苗DTaP-sIPV、无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP-IPV/Hib)、吸附无细胞百白破-b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP/Hib)、百日咳疫苗效力参考品(全细胞疫苗,wP)按0、30、60 d 3剂免疫程序免疫Wistar大鼠,检测各组大鼠每剂免疫后的血清中各组分抗体水平。在免疫完成后3周,用百日咳18323株通过气雾攻击的方式感染大鼠。在感染后的第3、7、14、21和28天检测各组白细胞数、肺部菌落克隆形成数以及百日咳疫苗组分抗体变化水平。结果候选疫苗组3剂次免疫完成后PT抗体几何平均滴度(GMT,log2)为16.74,FHA抗体GMT为18.44,PRN抗体GMT为10.75,DT抗体GMT为17.34,TT抗体GMT为17.84,针对3种Sabin脊髓灰质炎病毒株(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型)的抗体的GMT分别为7.57、8.41和9.70,均达到100%阳转。候选疫苗抗原组分抗体除了PRN和I型IPV外,其他组分抗体水平均与疫苗对照组相比无显著性差异。在基础免疫完成后3周对大鼠进行百日咳杆菌气雾攻击,各疫苗组均表现较好的保护效果,白细胞水平都呈现平稳状态,虽然在肺部也检测到少量细菌定植,但各疫苗组间差异不明显,且在感染后第28天都清除至检测限;而空白对照组在肺部则检测到了大量细菌定植,且在感染后第28天都并未清除至检测限,百日咳特异性的FHA和PRN抗体在感染后的第14天也出现了相应的升高。结论候选疫苗在Wistar大鼠模型上具有较好的免疫保护效果。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   全球监测   基因学   免疫学   野生型   全球范围   病毒学   尼日利亚  

摘要： 继野生型脊髓灰质炎病毒2型(WPV2)之后,WPV3也已在全球范围被消灭,全球监测到的最后1例WPV3感染病例于2012年发生在尼日利亚。脊髓灰质炎病毒包含3个免疫学特异的野生型:WPV1、WPV2和WPV3,虽然感染后症状完全相同,但各型间存在基因学和病毒学差异。

关键词： 色谱法,离子交换   脊髓灰质炎病毒疫苗,灭活   阴离子交换树脂类  

摘要： 目的研究Sabin株脊髓灰质炎病毒(Sabin strain polio virus,sPV)纯化的离子交换层析(ion exchange chromatography,IEC)条件。方法在不同层析条件下对sPV凝胶层析粗纯液进行IEC,设定的层析参数分别为介质Q Sepharose FF或Eshmuno Q、上样量30%或40%柱体积、流速(150±5)或(240±8)cm/h。分别检测各型sPV纯化液的D抗原含量、蛋白浓度、病毒滴度、宿主细胞蛋白残留量和Vero细胞DNA残留量,计算D抗原回收率和比活。结果Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原回收率均明显高于Q Sepharose FF IEC。在上样量40%柱体积、流速(150±5)cm/h条件下,Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原比活均高于Q Sepharose FF IEC,差异均有统计学意义(Ⅰ型:t=4.23,Ⅱ型:t=5.73,Ⅲ型:t=4.18,P值均<0.05),而且前者的宿主细胞蛋白残留量(Ⅰ型:t=8.29,Ⅱ型:t=7.89,Ⅲ型:t=8.18,P值均<0.05)和Vero细胞DNA残留量(Ⅰ型:t=4.23,Ⅱ型:t=4.56,Ⅲ型:t=4.78,P值均<0.05)均低于后者,差异均有统计学意义。结论用IEC纯化sPV时,以Eshmuno Q代替Q Sepharose FF可增加上样量和流速,从而缩短IEC时间,提高纯化效率。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒   监测   诊断   处理  

摘要： 讨论脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例的监测、诊断、处理方法与预防脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例发生的策略。根据此病例的个案调查、预防接种相关信息、临床诊断、治疗与脊髓灰质炎实验室病毒检测等方面的资料进行分析。脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例监测、诊断、处理仍需改进,须严格把握Ⅰ+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗接种禁忌证,进一步改进消灭脊髓灰质炎免疫策略,预防脊髓灰质炎疫苗低变异株病毒病例的发生。

关键词： 全球   脊髓灰质炎病毒   疫苗供应   封存与认证   第十八次会议  

摘要： 2019年10月15日,WHO-UNICEF与IPV/OPV生产商、国家封存监管机构(National Authority for Containment,NAC)关于脊髓灰质炎(脊灰)病毒封存与疫苗采购的第十八次磋商会议在瑞士日内瓦召开。世界卫生组织(WHO)、联合国儿童基金会(United Nations International Children′s Emergency Fund,UNICEF)、全球消灭脊灰行动(Global Polio Eradication Initiative,GPEI)策略委员会、相关国家封存监管机构、IPV/OPV生产厂家的相关代表出席了会议。会议围绕阻断脊灰病毒的传播、扩大脊灰疫苗生产的监管审批途径、新产品的创新与研发及其对供应可能产生的影响、脊灰病毒的封存与认证、Sabin IPV研发最新进展等内容进行了主题报告;对《2019~2023年脊灰尾声战略》进行了全面的介绍和分享,脊灰疫苗生产商与WHO、UNICEF有了充分的交流,进一步加强了参与全球消灭脊灰行动的各个组织、协会、生产商与国家监管机构之间的合作,推进了全球消灭脊灰行动策略的部署。

关键词： 吸附无细胞百日咳   白喉   破伤风   乙型肝炎   Sabin株灭活脊髓灰质炎   加强免疫   安全性  

摘要： 目的评价不同剂量配比及制备工艺的吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风-乙型肝炎-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-HepB-sIPV)免疫大鼠后加强免疫效果及安全性。方法以中、低剂量与铝佐剂相互配伍的不同sIPV配方设计4个DTaP-HepB-sIPV联合疫苗实验组,即中剂量含铝佐剂sIPV组(A组)、中剂量不含铝佐剂sIPV组(B组)、低剂量含铝佐剂sIPV组(C组)、低剂量不含铝佐剂sIPV组(D组),并设相应各组分的对照组和Infanrix hexaTM疫苗参考组。以已完成3剂基础免疫的Wistar大鼠为实验动物,在全程免疫第16个月接种1剂次加强免疫,进行安全性评价,并比较加强免疫前后各组大鼠血清中各组分抗体水平、中和抗体几何平均滴度(GMT)及阳转率,同时观察加强免疫对大鼠外周血中淋巴细胞的影响。结果加强免疫后未观察到不良反应,大鼠接种部位未见红肿、硬结、溃烂等现象,且各组大鼠体重维持稳定。加强免疫后30 d,各组大鼠各型别脊灰病毒中和抗体均为阳性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳转率A组分别为100%、71.4%、85.7%,B组分别为71.4%、85.7%、100%,C组分别为80%、80%、100%,D组分别为71.4%、100%、85.7%;A组诱导的各型别脊灰病毒中和抗体GMT均高于B组,且可达到或超过参考组;B、D组诱导产生的各型脊灰病毒中和抗体GMT均能达到同等剂量相应对照组水平。加强免疫后,各组百白破各组分抗体GMT有5~106倍增长,联合疫苗实验组GMT与对照组相比,总体上差异无统计学意义(P>0.05)。加强免疫后,乙肝抗体阳转率乙肝对照组为66.7%,B组为55.6%,C组为50%,A组为16.7%,D组为14.3%,参考组为0%;各组Anti-HBsAg水平有不同程度的升高,但两两相比,各组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论DTaPHepB-sIPV具有良好的安全性,sIPV中剂量含铝佐剂的DTaP-HepB-sIPV联合疫苗所诱导的各抗体水平更加稳定持久,可作为未来疫苗最佳配比的参考。