关键词： Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗   包材   相容性  

摘要： 目的评价Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(sabin inactivated poliovirus vaccines,sIPV)与3种玻璃包材的相容性。方法将3批sIPV半成品分别分装至同批中性硼硅玻璃管制西林瓶(2 mL)、预灌封注射器及中性硼硅玻璃管制西林瓶(4 mL),将1批sIPV半成品分别分装至3批上述不同的包材中。分别于(37±2)℃保存14 d、(25±2)℃保存6个月、28℃保存36个月,对疫苗的外观、装量、pH、无菌试验、细菌内毒素、D抗原含量等指标进行检测。计算3种包材sIPV于不同温度下保存不同时间的D抗原回收率,并进行比较。结果3种包材分装的sIPV于不同温度下保存不同时间的各项指标检测结果均合格,且Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原回收率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论sIPV与3种不同玻璃包材均具有良好的相容性。

关键词： 急性弛缓性麻痹   非脊髓灰质炎肠道病毒   分子鉴定  

摘要： 目的了解2018年河南省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)的基因型别及流行特征。方法对2018年河南省报告的554例AFP病例的粪便标本进行病毒分离,分离出的NPEV毒株进行VP1基因扩增和测序并确定其基因型别。使用Mega 5.1软件对基因序列进行遗传进化分析。使用SPSS 19软件对NPEV分离率进行统计学分析。结果2018年河南省AFP病例中NPEV毒株的分离率为7.6%(42/554),其中19株为A组肠道病毒,包括8个血清型,23株为B组肠道病毒,包括7个血清型。柯萨奇病毒B组(coxsackievirus B,CV-B)5型和埃可病毒(echovirus,E)7型分离率较高,分别为19.0%(8/42)和16.7%(7/42)。42株NPEV的核苷酸一致性为70.0%~100.0%,与原型株核苷酸一致性为71.2%~85.5%。CV-A4、CV-A6和CV-B5与手足口病病例中分离出的毒株关系较近,E7在手足口病例中发现较少。年龄分布中,5岁以下儿童分离率最高,其中A组NPEV分离率为4.8%(18/377),B组NPEV分离率为5.8%(22/377)。性别分布中,男女性别比为1.8∶1,男性和女性NPEV的分离率(3.4%vs 4.2%)差异无统计学意义(χ^(2)=0.010,P=0.9)。A组病毒主要分布在河南省中部、西北部和西南部,4—5月份分离率最高(42.1%,8/19);B组病毒主要分布在河南省中部、东部和南部,7月份分离率最高(26.1%,6/23)。结论2018年河南省分离的NPEV以CV-B5和E7为优势血清型,并且具有明显的年龄、地域和季节的差异,后期应加强监测,及时有效地控制AFP疾病的发生。

关键词： 脊髓灰质炎灭活疫苗   Sabin株   D抗原   国际标准品   ELISA法  

摘要： 目的对第1代Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine prepared with Sabin strain,sIPV)D抗原含量国际标准品进行国际协作标定。方法13家协作单位分别采用NIBSC提供的统一检测方法及各单位自建方法,对以野毒株生产的脊髓灰质炎灭活疫苗(conventional inactivated poliolyelitis vaccine,cIPV)D抗原含量国际标准品12/104及其替代参考物质08/143、来自不同制造商的两种sIPV候选标准品17/130、17/160及其他3个sIPV样品进行D抗原含量检测,并分析试验有效性和实验室内、实验室间结果的一致性。结果无论采用何种方法,以sIPV候选标准品为参考标准时,有效试验的比例均较以12/104为参考标准时更高,且实验室内的变异度总体较低,D抗原含量几何平均值(geometric mean,GM)在实验室间有较好的一致性。结论两种sIPV候选标准品均适合作为国际标准,但17/160在试验有效性及实验室内、实验室间的一致性略好,选定为第1代sIPV D抗原含量检测的国际标准品。

关键词： 预防接种   百白破联合疫苗   脊髓灰质炎减毒活疫苗   死亡  

摘要： 目的调查1例接种疫苗后死亡案例,为类似事件的调查处置提供参考。方法收集疫苗受种方、接种方、生产企业方等相关材料,对患儿接种疫苗后死亡事件进行调查。结果专家组结合现场调查、查阅资料和现场询问,确定患儿接种疫苗后出现的过敏性休克死亡属于预防接种异常反应。结论应切实做好接种前问询诊和知情告知工作,严格落实受种者疫苗接种后留观30min,加强预防接种服务人员对疫苗接种后严重不良反应急救的培训,推进预防接种异常反应补偿保险工作,做好家属和媒体的沟通,防止社会恐慌。

关键词： Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗   灭活验证   灭活动力学   D抗原  

摘要： 目的对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin inactivated poliovirus vaccine,sIPV)在生产过程中的灭活效果进行验证及评价。方法分别制备Sabin株Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型脊髓灰质炎病毒连续5批纯化液,加入终浓度为92.5μg/mL的甲醛,37℃灭活12 d。收集灭活前(0 d)及灭活1~6、9和12 d样品,采用人喉癌上皮细胞(Hep-2)通过细胞病变法检测0~6 d样品的病毒滴度,ELISA法检测不同灭活时间样品的D抗原含量,并验证9及12 d样品的灭活效果。结果Sabin株Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型脊髓灰质炎病毒均在灭活第3天下降至0.00 lgCCID_(50)/mL,3种型别病毒同日的灭活速率差异无统计学意义(P>0.05)。灭活动力学曲线显示,0~3 d样品的病毒滴度呈直线下降,病毒灭活效果与灭活时间密切相关(Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型相关系数r分别为-0.995、-0.976及-0.996,R^(2)分别为0.991、0.952及0.992)。Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型病毒12 d样品D抗原平均回收率分别为80%、85%和83%,抗原有一定的损失,但差异无统计学意义(P>0.05)。灭活9及12 d样品灭活验证结果均为阴性。结论Sabin株脊髓灰质炎病毒在目前的灭活工艺条件下,均可稳定地被灭活,且能收获含量较高的D抗原,保证了sIPV疫苗的稳定性及安全性。

关键词： 二价脊髓灰质炎疫苗   中山市   KAP调查   影响因素  

摘要： 目的:了解中山市预防接种人员及儿童监护人对二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bOPV)的知晓情况和接种意愿,为预防接种宣传沟通策略的制定提供依据。方法:随机选择中山市5个镇、区作为调查区域,根据日常接种工作日以随机拦截的方式,从预防接种门诊抽取2-12个月月龄儿童监护人400名以及中山市预防接种人员100名为调查对象,调查基本情况、专业情况以及对bOPV的知识、态度、行为情况等。结果:400名儿童监护人调查问卷中有240名儿童监护人调查问卷为8分以上,知晓率为60.00 %;100名接种人员调查问卷均在8分以上为全部知晓,知晓率为100.00 %。bOPV知晓率与接种bOPV频次、与谁长期居住、儿童监护人年龄、文化水平、职业、经济收入、本地居住时间及接种人员年龄、文化程度、对疫苗安全性的认识、疫苗认知是否正确、序贯程序认知是否正确、认为是否有必要引进等指标均相关。结论:在bOPV的接种工作中,应该充分关注对疫苗有关知识的宣传,并且按照不同人群对宣传教育的方法和手段进行调整,以调动监护人对于bOPV有关知识的学习积极性,从而更好地普及预防接种的有关知识。

关键词： 脊髓灰质炎   排毒   二价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗   脊髓灰质炎病毒受体转基因小鼠  

摘要： 目的通过脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒受体转基因小鼠动物模型,探讨接种Ⅰ+Ⅲ型二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bivalent oral poliovirus vaccine,bOPV)后的排毒规律。方法以灌胃方式给脊灰受体转基因小鼠接种3剂bOPV,间隔28 d。每剂bOPV接种后第1、3、5、7天采集当天小鼠粪便样本,实时定量PCR检测每剂bOPV接种后的排毒量,ELISA法检测脊灰特异的肠道黏膜免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)抗体水平,分析排毒与接种剂次、黏膜IgA水平的关系。将接种了bOPV后检测到排毒量高和排毒量低的两组小鼠分别与洁净小鼠共居,观察洁净小鼠接触后的排毒反应。结果随着接种bOPV剂次的增加,疫苗所引发的排毒量逐渐减少。第1剂bOPV接种后排毒量较高的个体在接种下一剂bOPV后的排毒量显著低于首剂排毒量低的个体(P<0.05)。第1剂bOPV接种后IgA呈阳性的个体在第1剂接种后的排毒量高于IgA呈阴性组,但第2剂接种后排毒量低于IgA呈阴性组。与高排毒组小鼠共居后,洁净小鼠发生排毒的机率显著高于与低排毒的小鼠共居的洁净小鼠(P<0.05),且Ⅲ型脊灰疫苗株比Ⅰ型引起洁净小鼠的排毒反应持续性更长。结论在脊灰消灭的最后阶段,预防脊灰流行的一个关键仍在于激发人群对抗脊灰病毒复制的黏膜免疫,减少排毒。增加bOPV接种剂次可减少后续个体接触脊灰病毒后的排毒概率。在b OPV接种后,需加强排毒检测和个人卫生管理,特别是首剂bOPV接种后。

关键词： 多态性,单核苷酸   脊髓灰质炎病毒疫苗   低相对分子量蛋白酶体基因   相关性   抗体水平  

摘要： 目的探讨低相对分子量蛋白酶体(LMP)基因单核苷酸多态性位点(SNPs)与脊髓灰质炎疫苗序贯免疫诱导的脊髓灰质炎病毒抗体应答的相关性分析。方法选取357名2~3月龄的婴幼儿接种2剂灭活脊髓灰质炎疫苗(IPV,由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三类脊灰病毒灭活制成)和1剂二价口服脊髓灰质炎疫苗(bOPV),于疫苗免疫前和基础免疫后第28天时检测婴幼儿血清中3种型别的脊髓灰质炎病毒中和抗体水平;采用TaqMan探针基因分型法对LMP 2基因SNPs位点rs17587(G>A)和LMP 7基因rs2071543(G>T)进行基因分型,分析这2个SNPs位点与脊髓灰质炎病毒抗体应答的相关性。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体几何平均滴度(GMT)水平在携带rs17587和rs2071543位点不同等位基因的个体间比较,差异无统计学意义(P>0.05);rs17587和rs2071543不同基因型携带者的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体GMT水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);rs17587-AA基因型携带者的脊髓灰质炎病毒Ⅱ型中和抗体GMT水平高于AG和GG基因型携带者(P<0.05),但经Bonferroni校正后,rs17587-AA基因型携带者的脊髓灰质炎病毒Ⅱ型中和抗体GMT水平与GG基因型携带者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论LMP基因的SNPs位点rs2071543和rs17587与脊髓灰质炎疫苗免疫后抗体应答无相关性,不是影响脊髓灰质炎疫苗抗体应答的主要遗传因素。

关键词： 双歧杆菌   二价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗   黏膜免疫   免疫球蛋白A  

摘要： 目的探讨双歧杆菌对Ⅰ+Ⅲ型二价脊髓灰质炎(简称脊灰)减毒活疫苗(bivalent oral poliovirus vaccine,bOPV)黏膜免疫的影响。方法给脊灰受体转基因小鼠接种2剂bOPV,间隔28 d,试验组小鼠在每剂bOPV接种前7 d灌胃双歧杆菌,同时对照组小鼠喂PBS。每剂疫苗接种后第3和第7天采集当天小鼠粪便样本,测定其中脊灰特异的IgA水平和排毒水平。在bOPV接种后检测小鼠细胞因子分泌水平和肠道淋巴结的淋巴细胞分群。结果第1剂和第2剂bOPV接种后的第3天,试验组小鼠脊灰特异的黏膜IgA水平均显著高于对照组(P<0.05或<0.01),且第1剂接种第3天,试验组小鼠IgA阳转率显著高于对照组(P<0.05)。试验组小鼠接种第1剂bOPV后第3天,Ⅰ型脊灰病毒排毒量显著低于对照组(P<0.01)。试验组小鼠在bOPV免疫后能激活更多的B淋巴细胞(P<0.000 1)和Th1通路的细胞因子IL-1、TNF-α(P<0.05)。结论双歧杆菌用于bOPV接种前可提高脊灰特异的黏膜免疫IgA分泌水平,且具有一定的减缓排毒作用。

关键词： 脊髓灰质炎病毒疫苗,灭活   免疫原性   制备  

摘要： 目的建立Sabin株毒种制备脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)生产工艺并评价其免疫原性。方法采用Vero细胞培养Sabin株脊髓灰质炎Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒,制备3价Sabin株IPV(Sabin strain IPV,sIPV)。通过ELISA检测D抗原含量。检测病毒滴度,电子显微镜下观察纯化病毒形态并电泳鉴定,分析抗原纯度,同时检测纯化原液宿主细胞残余DNA和蛋白含量。通过大鼠体内接种法比较sIPV和野生株IPV免疫原性,并观察中和抗体滴度变化。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型收获液D抗原含量分别为2437、365、1253 DU/ml,病毒滴度分别为每毫升8.4、7.8和7.9 lg半数细胞培养物感染量。纯化病毒抗原纯度均>99%。电子显微镜下观察可见直径20~30 nm病毒颗粒,电泳鉴定正确。纯化原液的残余宿主细胞DNA和蛋白含量分别12.3 pg/500μl和9.8 ng/ml。sIPV 3针免疫后在大鼠体内诱导产生抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体的几何平均滴度分别为9397.8、554.7和4668.4,与野生株IPV相比Ⅰ型明显增高(t=-3.429,P=0.004),Ⅱ、Ⅲ型无明显差别,初免后19周内均维持在较高水平。结论建立了稳定的sIPV生产工艺,制备的sIPV免疫原性较好。