关键词： 脊髓灰质炎病毒   甲醛   Hep-2细胞   病毒灭活  

摘要： 目的验证4%甲醛溶液使Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎(脊灰)病毒达到预期灭活效果所需要的时间。方法用4%甲醛溶液对15批Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒在(36.5±1.0)℃环境进行灭活,同时以15批未加入4%甲醛溶液的病毒纯化液作为对照组,按照企业注册标准采用微量细胞病变法测定病毒滴度。为了消除4%甲醛溶液对Hep-2细胞的影响,取4%甲醛溶液接种Hep-2细胞作为实验组,同时设置Hep-2细胞为对照组,每天观察对比两组细胞形态。对同一个Hep-2细胞悬液的总细胞数和活细胞数采用传统手工计数和全自动细胞计数仪计数,并比较分析结果。结果实验组随着灭活时间的延长病毒滴度呈下降趋势,灭活第4天起,3个型别样品均检测不到病毒滴度;对照组病毒滴度在每毫升9.1~10.6 lg半数细胞培养物感染量范围内,符合企业注册标准的要求。4%甲醛溶液对Hep-2细胞生长有抑制作用,在培养观察到第3天时细胞全部失去活力死亡;对照组细胞形态良好呈多边形长成致密单层,活细胞组t值为18.098,总细胞组t值为4.005,P值均<0.05,差异有统计学意义。结论脊髓灰质炎病毒在第4天能被彻底灭活,在进行此实验时应先消除甲醛对细胞培养的影响,避免结果出现假病变现象,确保结果的准确性;应用全自动细胞计数能提高计数结果的精确度。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   病毒样颗粒   昆虫细胞   重组杆状病毒  

摘要： 目的构建共表达P1和3CD的重组杆状病毒,利用昆虫细胞重组表达2型脊髓灰质炎病毒(poliovirus type 2,PV2)的病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),制备PV2-VLP进行初步免疫原性研究。方法基于粉纹夜蛾细胞(High 5)密码子偏好性,将PV2的P1基因和3CD基因进行序列优化,并对P1基因进行稳定性突变,构建突变型rBac-PV2-P1s-3CD和野生型rBac-PV2-P1-3CD杆状病毒。Western blot分别检测目的蛋白表达量,离子交换层析纯化PV2-VLP,透射电镜观察VLP高级结构确定组装效率。免疫大鼠评估免疫原性。结果成功构建了可稳定表达P1s蛋白和3CD蛋白的重组杆状病毒。Western blot结果表明热稳定性突变后VLP产量相比野生型有所提高。电镜观察发现直径约30 nm的三维结构,表明VLP成功组装。动物实验结果表明,重组制备的PV2-VLP具有免疫原性,且能有效刺激产生中和抗体。结论用昆虫细胞-杆状病毒表达系统可成功制备有效的VLP类疫苗,为PV-VLP疫苗的研制提供参考。

关键词： 生活污水监测   脊灰病毒   疫苗相似株  

摘要： 目的持续监测2019年生活污水中的脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV),了解脊灰病毒在外环境中的流行变化趋势,为维持无脊灰状态提供实验室环境监测数据支持。方法选择南昌市某区污水处理厂作为长期固定监测点,每月在污水处理厂入水口采集1 L污水作为样本。膜浓缩后在L20B、RD、Hep-2三种细胞上进行病毒分离培养,对阳性分离物进行VP1全长基因的测序分析。结果共分离出脊灰病毒25株,分离率为91.67%(11/12),包括PVⅠ型3株,PVⅢ型22株,PVⅡ型0株。3株PVⅠ型毒株均为疫苗相似株,在全基因组的2749位点处均由腺嘌呤A突变为鸟嘌呤G,导致异亮氨酸突变成甲硫氨酸;2株PVⅢ(JX2019JHH037L、JX2019JHH042R)在2636位点处发生了由鸟嘌呤G突变为腺嘌呤A变异,导致了亲水氨基酸丙氨酸替代了疏水氨基酸苏氨酸。结论在生活污水监测中分离到的脊灰病毒株均为疫苗株和疫苗相似株,未发现脊灰野毒株、脊灰疫苗衍生株及PVⅡ毒株。因此为维持无脊灰状态,需要持续对污水等外环境标本加强监测。

关键词： 急性弛缓性麻痹(AFP)   脊髓灰质炎病毒(PV)   病原学监测   疫苗转换  

摘要： 自2016年5月1日起,我国与全球另外154个国家和地区同步实施脊髓灰质炎(以下简称"脊灰")疫苗免疫策略转换,停用三价口服脊灰减毒活疫苗,改用二价口服脊灰减毒活疫苗。为探讨脊灰疫苗转换对福建省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测结果产生的变化,本研究收集2012-2018年福建省AFP病例的流行病学及实验室监测数据,对脊灰疫苗转换前后AFP病例的监测结果进行描述性分析,采集AFP病例及其接触者粪便标本,并使用RD细胞和L20B细胞进行病毒分离;对L20B阳性分离物进行脊灰病毒(Poliovirus,PV)的型内鉴别(Intratypic differentiation,ITD),对PV衣壳蛋白VP1编码区核苷酸序列测定和分析。使用SPSS 21.0软件对数据进行统计检验,比较采用χ^(2)检验。结果显示,2012-2018年福建省累计报告AFP病例1776例,根据AFP病例分类流程确诊的AFP病例1283例,排除的非AFP病例493例,疫苗转换前后报告发病率平均为2.83/10万和2.71/10万。实验室共检测3123份粪便标本(包括AFP病例、非AFP病例及接触者),其中合格标本采集率为92.42%,7日及时送检率为97.85%,14日内病毒分离完成率接近100%,疫苗转换前后PV平均分离率分别为1.91%(38/1986)、1.58%(18/1137),非脊灰肠道病毒平均分离率分别为10.22%(203/1986)、5.45%(62/1137)。2016年5月1日之前分离出Ⅰ型PV 6株,Ⅱ型PV 13株,Ⅲ型PV 19株;2016年5月1日之后分离出Ⅰ型PV 6株,Ⅲ型PV 12株。本研究结果提示,脊灰疫苗转换前后福建省AFP监测系统运转正常,始终保持较高的敏感性和及时性。2012-2018年福建省分离出的PV均为脊灰疫苗株,毒株血清型别以Ⅲ型为主,VP1编码区核苷酸以低变异为主,未发现疫苗衍生脊灰病毒及脊灰野病毒,疫苗转换后再未检出II型PV,提示II型脊灰疫苗株病毒可能已被阻断。

关键词： 肠道病毒   脊髓灰质炎病毒   非脊髓灰质炎肠道病毒   生活污水   监测  

摘要： 目的了解广州市生活污水肠道病毒(Enterovirus,EV)型别。方法2015-2017年每月采集广州市某污水处理厂生活污水样本,采用阴离子膜吸附-超声波振荡法对样本进行病毒富集,接种于RD、L20B和HEp-2细胞进行EV分离,通过RT-PCR和VP1编码区核苷酸序列测定进行型别鉴定,分析脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)和非脊灰肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)分离阳性率和型别构成。结果在144份生活污水样本中,PV和NPEV分离阳性率分别为69.44%(100份)和79.86%(115份)。共分离到233株PV疫苗相关株,其中PV1、PV2和PV3血清型分别占20.60%(48株)、12.45%(29株)和66.95%(156株);发现3株PV1和1株PV3脊灰疫苗高变异株以及1株II型疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV);2015年、2016年和2017年PV2疫苗相关株分别为25株、4株和0株。共分离到339株NPEV,其中埃可病毒(Echovirus,E)、柯萨奇病毒B组(Coxsackievirus group B,CVB)、柯萨奇病毒A组(Coxsackievirus group A,CVA)、未分型毒株分别占59.59%、34.22%、0.29%、5.90%;E、CVB和CVA分别鉴定出10种、5种和1种基因型,优势基因型为E6(85株)、E11(65株)和CVB3(55株)。结论2015-2017年广州市生活污水EV检出率较高,PV2疫苗相关株显著减少。仍需持续开展外环境EV监测以评估脊灰或NPEV相关疾病的风险。

关键词： 脊髓灰质炎   输入   传播   风险评估   河南省  

摘要： 目的评估河南省2021年脊髓灰质炎(脊灰)野病毒及疫苗衍生脊灰病毒输入传播的风险。方法监测河南省各地区人群免疫水平、急性弛缓性麻痹病例,对输入风险进行评分,根据综合评分结果进行风险等级划分。综合评分越高,输入传播风险越高。结果输入传播的高风险(≥20分)、中风险(8~19分)、低风险(<8分)地区分别为6、14和8个。结论河南省存在脊灰野病毒和疫苗衍生脊灰病毒输入传播的风险,对不同风险等级的地区应采取针对性措施以维持无脊灰状态。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   病毒分离   序列测定   病原学  

摘要： 目的分析内蒙古自治区2015—2019年脊髓灰质炎(脊灰)病毒分离和鉴定情况,为内蒙古自治区防控脊灰提供依据。方法将2015—2019年内蒙古自治区各盟市送检的急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例、AFP病例密切接触者的粪便标本进行病毒分离,对阳性分离物进行脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)型内鉴定,并上送中国疾病预防控制中心进行复核及病毒衣壳蛋白VP1区序列测定及分析。结果共从743份粪便标本中分离出PV 18株,分离率为2.42%;其中,Ⅰ型4株(0.54%),Ⅲ型11株(1.48%),Ⅰ+Ⅲ型1株(0.13%),Ⅱ+Ⅲ型2株(0.27%)。非脊灰肠道病毒(non-poliomyelitis enteroviruses,NPEV)8株,分离率为1.08%(8/743);无脊灰野病毒(wild poliovirus,WPV)。序列测定后判定1株为Ⅲ型疫苗衍生脊灰病毒(vaccine-derived poliovirus,VDPV)。结论内蒙古自治区2015—2019年继续维持无脊灰状态;自2016年5月后未发现Ⅱ型PV;检测出1株Ⅲ型VDPV并成功完成调查处置,未造成VDPV传播与扩散。

关键词： 无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗   脊髓灰质炎灭活疫苗   二价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗   同时接种   不良反应  

摘要： 目的评价儿童无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTaP-Hib)基础免疫与脊髓灰质炎(脊灰)疫苗同时接种的不良反应。方法在北京市通州区3个接种门诊招募3-12月龄儿童,观察DTaP-Hib单独接种、与脊灰灭活疫苗(IPV)同时接种、与二价口服脊灰减毒活疫苗(bOPV)同时接种后0-14d不良反应,比较不良反应发生率。结果儿童DTaP-Hib基础免疫单独接种、与IPV同时接种、与bOPV同时接种的不良反应发生率分别为5.89‰(49/8321)、6.18‰(9/1457)、4.86‰(16/3293)(χ^(2)=0.52,P=0.770),其中局部反应分别为3.97‰、4.12‰、3.34‰,全身反应分别为1.92‰、2.06‰、1.52‰;1级不良反应发生率分别为4.33‰、4.12‰、3.04‰,2级不良反应发生率分别为1.20‰、1.37‰、1.52‰,3级不良反应发生率分别为0.36‰、0.69‰、0.30‰,无4级不良反应发生。结论儿童DTaP-Hib基础免疫单独和与脊灰疫苗同时接种的不良反应发生率均在可接受范围内;同时接种未增加不良反应的发生风险和严重程度。

关键词： 脊髓灰质炎病毒   科技强国   科学救国   风雨征程   科教兴国   一封信   顾方舟   少先队员  

摘要： 建党百年,风雨征程。百年来,中华民族经历了从科学救国、科教兴国到科技强国的发展历程,无数优秀共产党员为了科学事业的发展努力奋斗,砥砺前行。他们的精神永远激励着我们。作为一名少先队员,你一定有很多科学故事想了解,有很多话想对科学家说——顾方舟爷爷:您好!我可以叫您"糖丸爷爷"吗?感谢您创造的"糖丸"让我们小朋友远离脊髓灰质炎病毒。

关键词： 脊髓灰质炎疫苗   免疫程序转换   中和抗体  

摘要： 目的比较灭活脊髓灰质炎病毒疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)免疫程序转换前后江苏省健康儿童的脊灰抗体水平。方法分别于疫苗转换前后采集江苏省内5岁以下健康儿童血清样本200份,使用微量细胞中和试验法测定脊灰中和抗体,比较分析疫苗转换前后脊灰抗体阳性率及几何平均滴度(GMT)的差异。结果疫苗转换前脊灰抗体Ⅰ型阳性率为98.50%,Ⅲ型抗体阳性率为92.00%,GMT分别为:1∶100.43和1∶23.34;脊灰疫苗转换后脊灰抗体Ⅰ型阳性率为99.00%,Ⅲ型抗体阳性率为96.00%,Ⅰ型和Ⅲ型脊灰抗体GMT分别为:1∶213.04和1∶121.10。结论脊灰疫苗转换前后免疫效果存在差异,疫苗转换后人群抗体水平高于疫苗转换前,建议逐步增加IPV剂次以最终实现全程接种IPV。